- •Министерство образования российской федерации волжский университет им. В.Н. Татищева утверждаю
- •Методические указания к лабораторным и практическим занятиям по дисциплине “Вирусологии”
- •Тольятти, 2012
- •Введение
- •Тема 1. Правила работы с вируссодержащими материалами
- •Методика проведения занятия и методические указания по теме
- •1.1 Техника безопасности и правила работы с вируссодержащим материалом
- •1.2 Требования к рабочим помещениям и обеспечение условий работы
- •1.3 Хранение вирусов и других материалов, учет и этикетировка их в лаборатории.
- •1.4 Основные методы консервации вирусов
- •Тема 2. Получение, транспортировка и подготовка патологического материала для вирусологических исследований.
- •Методика проведения занятия и методические указания по теме
- •2.1 Получение и обработка патологического материала
- •2.2 Получение патологоанатомического материала
- •2.3 Получение проб для гистологического исследования.
- •2.4 Транспортировка и хранение проб.
- •Тема 3. Индикация вирусов в патологическом материале по обнаружению вирионов и вирусных телец-включений
- •Методика проведения занятия и методические указания по теме
- •Тема 4. Использование лабораторных животных в диагностических исследованиях. Цели использования лабораторных животных в вирусологии
- •Методика проведения занятия и методические указания по теме
- •Масса животных в разном возрасте
- •Температура тела, пульс и число дыханий у здоровых животных
- •Состав крови некоторых лабораторных животных (по в.Н.Никитину)
- •Тема 5. Использование лабораторных животных в диагностических исследованиях. Биопроба
- •Методика проведения занятия и методические указания по теме
- •Максимальные объемы вводимого материала для лабораторных
- •Тема 6. Использование лабораторных животных в диагностических исследованиях. Вскрытие лабораторных животных
- •Методика проведения занятия и методические указания по теме
- •Тема 7. Использование в вирусологии куриных эмбрионов. Культивирование вирусов на куриных эмбрионах
- •Тема 8. Использование в вирусологии куриных эмбрионов. Заражение куриных эмбрионов
- •8.1 Методы экспериментального заражения куриных эмбрионов.
- •Тема 9. Использование в вирусологии куриных эмбрионов. Вскрытие куриного эмбриона и получение вируссодержащего материала. Индикация вирусов
- •9.2 Определение гемагглютинирующих свойств вирусов.
- •Тема 10. Использование в вирусологии культур клеток. Типы культур клеток
- •Тема 11. Использование в вирусологии культур клеток. Культивирование вирусов в культуре клеток
- •Тема 12. Использование в вирусологии культур клеток. Заражение культур клеток. Индикация вируса
- •Методика проведения занятия и методические указания по теме.
- •Тема 13. Титрование антител к вирусам в реакции торможения (задержки) гемагглютинации (ртга, рзга)
- •Методика проведения занятия и методические указания по теме.
- •Тема 14. Использование в вирусологии реакции непрямой гемагглютинации
- •Методика проведения занятия и методические указания по теме.
- •Тема 15. Использование в вирусологии реакции диффузной преципитации в агаровом геле
- •Методика проведения занятия и методические указания по теме.
- •15.2 Основные задачи рдп:
- •Тема 16. Титрование вирусов
- •Методика проведения занятия и методические указания по теме.
- •Проверочный тест
- •Библиографический список:
- •Оглавление:
Максимальные объемы вводимого материала для лабораторных
Метод заражения |
Кролики |
Морские свинки |
Белые крысы |
Белые мыши |
Внутрикожный |
0,1 |
0,1 |
0,05 |
0,02 |
Подкожный |
5,0 |
3,0 |
3,0 |
0,5 |
Внутримышечный |
5,0 |
2,0 |
1,0 |
0,3 |
Внутрибрюшинный |
10,0 |
5,0 |
2,0 |
1,0 |
Внутривенный |
5,0 |
2,0 |
2,0 |
1,0 |
Интраназанальный |
1,0 |
0,3 |
0,1 |
0,03 |
Интрацеребральный |
0,3 |
0,05 |
0,03 |
0,02 |
5.3 Содержание лабораторных животных после заражения. После заражения животные должны быть помещены в клетки, на которые навешивают этикетки с указанием вируса или номера экспертизы исследуемого материала, количества и номеров зараженных животных, даты заражения. В рабочем журнале записывают название вируса или номер экспертизы исследуемого материала, количество и характеристику зараженных животных, их маркировку, метод введения и дозу вируса.
За животными устанавливают наблюдение, обращая внимание на их внешний вид, подвижность, прием корма и т. п. Следует отметить, что гибель животных в первые дни после заражения может быть связана с травмой или токсическим действием исследуемого материала.
Задания
1. Отработка приемов фиксации и экспериментального заражения лабораторных животных всеми методами.
2. Заражение внутрикожно белых мышей вирусом эктромелии и кроликов вирусом осповакцины.
Самостоятельная работа студентов
Студенты отрабатывают приемы фиксации и экспериментального заражения лабораторных животных всеми методами.
Контрольные вопросы:
1. С какой целью используют лабораторных животных в вирусологических исследованиях.
2. Требования, предъявляемые к лабораторным животным, уход, содержание.
3. Животные - гнотобиоты. СПФ - животные .
4. Методы заражения лабораторных животных.
Тема 6. Использование лабораторных животных в диагностических исследованиях. Вскрытие лабораторных животных
Цель занятия: Установление у зараженных животных симптомов болезни. Вскрытие зараженных животных с целью обнаружения патологоанатомических изменений и получения вируссодержащего материала. Получение отпечатков мозга.
Оборудование и материалы: суспензии вирусов эктромелии и осповакцины; кролики; белые мыши; клетки для животных; кюветы с восковым дном; стерилизаторы со стерильными инструментами (шприцами, инъекционными иглами, пинцетами анатомическими 14 и 10 см, ножницами глазными); вата; спирт; эфир для наркоза; банка вместимостью 0,5 л с крышкой; стерилизованные ватные тампоны в бумажной упаковке (ватики); стерильный физиологический раствор; фильтровальная бумага; стекла предметные; раствор пикриновой кислоты, мультимедийное оборудование, презентации по теме занятия