
3. Оформление результатов
Полученные данные заносят в таблицу.
Потери глутаминовой кислоты на стадиях выделения
Исследуемый раствор |
Объём |
Разведение пробы |
Оптическая плотность раствора |
Концентрация глутаминовой кислоты в растворе |
Общее количество глутаминовой кислоты в растворе |
Выход на каждой стадии от предыдущей |
1. Исходная культуральная жидкость |
|
|
|
|
|
|
2. Отделенная от биомассы культуральная жидкость |
|
|
|
|
|
|
3. Осветленная культуральная жидкость |
|
|
|
|
|
|
4. Упаренный концентрат |
|
|
|
|
|
|
5.Маточный раствор после кристаллизации |
|
|
|
|
|
|
6. Суммарный выход глутаминовой кислоты |
|
|
|
|
|
|
Выход (В) глутаминовой кислоты на каждой стадии от предыдущей определяют по формуле (1):
где: Vi – объем раствора на i-й стадии, см3;
Ci – концентрация раствора глутаминовой кислоты на i-й стадии, г/см3.
Суммарный выход глутаминовой кислоты определяют по формуле (2):
где: V4 – объём упаренного концентрата, см3;
С4 – концентрация глутаминовой кислоты в упаренном концентрате, г/см3;
V5 – объём маточного раствора после кристаллизации, см3;
С5 – концентрация глутаминовой кислоты в маточном растворе, г/см3;
Vиcx – объём исходного раствора, см3;
СИсх – концентрация глутаминовой кислоты в исходном растворе, г/см3,
4. Техника безопасности
Лабораторное занятие проводят при строгом соблюдении правил безопасности при работе в химической и микробиологической лабораториях.
Раствор аммиака в пропаноле оказывает сильное раздражающее действие, поэтому работы с ним проводят в вытяжном шкафу.
5. Вопросы по теме занятия
1. Какие способы получения АК вы знаете?
2..Почему при биосинтезе глутаминовой кислоты одноступенчатым микробиологическим способом в среду для культивирования добавляют детергенты или антибиотики?
3..Какую роль играет биотин в биосинтезе глутаминовой кислоты?
4..Каковы основные способы выделения АК из культуральной жидкости и на чем они основаны ?
5. Каков вероятный интервал действия сильнокислотных катионитов по величине рН ?
6 При осветлении культуральной жидкости, содержащей глутаминовую кислоту, её пропускают через осветляющую колонку при рН 4-5. Чем это вызвано?
Почему при сорбции лизина на сильнокислотном катионите КУ-2-8 раствор подкисляют до рН 1,6-2,0? Следует ли подкислять раствор при сорбции на слабокислотном катионите КБ-4П-2?
Написать схемы извлечения, элюирования АК ионитами и их регенерации.
9. Почему выпарку растворов АК производят под вакуумом?
10. Для какой АК – лизина или триптофана в большей степени будет наблюдаться эффект осаждения при добавлении спирта?
11. Чем объяснить то, что для элюирования триптофана со смолы КУ-2-8 применяют спирто-аммиачный раствор, а не водно-аммиачный?