Контрольные вопросы

1. Каков минеральный состав крови?

2. Приведите уравнения, характеризующие механизм действия основных буферных систем кровию

3. В каких случаях развиваются гипокальциемия и гиперкальциемия?

4. В чем отличие сыворотки от плазмы?

5. Укажите причины гипо- и гиперпротеинемий.

Работа 9. Обнаружение желчных пигментов в моче

Билирубин обычными методами в нормальной моче не открывается, хотя и может находиться в ней в виде следов. Выделение билирубина с мочой повышается при гипербилирубинемии. В этих случаях качественные пробы на билирубин становятся положительными. Реакции на желчные пигменты основаны на получении окрашенных продуктов окисления билирубина: биливердина (зеленый), билицианина (синий), холетелина (желтый) и др.

В пробирку вносят 1 мл концентрированной азотной кислоты и осторожно из пипетки наслаивают мочу. Реакция называется «проба Гмелина». Она основана на окислении билирубина мочи под влиянием азотной кислоты с примесью азотистой в ряд окрашенных в разные цвета продуктов окисления. При наличии желчных пигментов на границе двух жидкостей появляются зеленое, синее, фиолетовое, красное и желтое кольца в указанной последовательности, что соответствует разным степеням окисления билирубина. Дальше всего от азотной кислоты располагается зеленое кольцо биливердина (наименее окисленный продукт), ближе всего к азотной кислоте — желтое кольцо холетелина (наиболее окисленный продукт).

Контрольные вопросы:

1. Приведите схему образования билирубина в организме.

2. Что такое «прямой» и «непрямой» билирубин?

3. Какие виды желтух приводят к гипербилирубинурии?

4. Как отличить механическую желтуху от гемолитической по анализу крови?

Работа 10. Биохимия костной и соединительной ткани

В состав костной ткани входит вода (50%), органические (28%) и неорганические (22%) вещества. Среди последних большую часть составляет фосфат кальция (85%), в значительно меньших количествах содержатся карбонат кальция (10%), фосфат магния (1,5%) и фторид кальция (0,3%). Неорганические вещества зубной ткани представлены главным образом гидроксиапатитом [Са₃РО₄)₂]₃ • Са(ОН)₂.

1. Получение вытяжки из костной ткани и зуба.

В колбу помещают 5 г костной ткани, приливают 25 мл 0,5%-ного раствора серной кислоты и оставляют на сутки. Неорганические вещества переходят в раствор. Вытяжку отфильтровывают.

Навеску в 0,5 г зуба помещают в колбу и добавляют 30 мл 10% раствора соляной кислоты, кипятят под тягой. Когда зуб полностью растворится, содержимое колбы охлаждают и отфильтровывают.

2. Открытие ионов кальция. К 2 мл вытяжки добавляют 3 - 4 капли насыщенного раствора оксалата аммония. Выпадает осадок оксалата кальция:

3. Открытие ионов магния. Оксалат кальция, полученный в предыдущем опыте, отделяют фильтрованием. К фильтрату добавляют 3-4 капли концентрированного раствора аммиака, выпадает осадок фосфата магний-аммония:

MgHPO₄ + NH₄OH  MgNH₄PO₄ + H₂O

4. Открытие фосфорной кислоты. К нескольким миллилитрам профильтрованной вытяжки прибавляют 5 - 6 капель молибденового реактива и нагревают до кипения. Медленно образуется желтый кристаллический осадок фосфоромолибдата аммония:

12 (NH₄)₂MoO₄ + H₃PO₄ + 21 HNO₃  (NH₄)₂PO₄12MoO₃ + 21 NH₄NO₃ + 12 H₂O