Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
posobie_biokhimia_chast_2.doc
Скачиваний:
0
Добавлен:
01.04.2025
Размер:
6.04 Mб
Скачать

3. Органические составные части мочи.

К органическим составным частям мочи относятся пировиноградная кислота, мочевые пигменты, мочевина, креатинин, мочевая кислота, аминокислоты и др. С мочой выводятся также некоторые ферменты, витамины, гормоны. К патологическим составным частям мочи относятся белок, глюкоза, кетоновые тела, желчные и кровяные пигменты, гомогентизиновая и фенилпировиноградная кислоты.

3.1. Качественное обнаружение и количественное определение белка в моче.

В норме в моче человека содержится минимальное количество белка (у взрослого от 20 до 60 мг, у детей - от 3 до 47 мг за 24 часа), присутствие которого не может быть доказано обычно применяемыми в лаборатории реакциями. При ряде заболеваний количество белка в моче увеличивается, и он начинает определяться обычными методами. Цветные реакции не пригодны для открытия белка в моче из-за наличия собственной окраски у мочи. Кроме того, она может содержать вещества, препятствующие появлению характерной окраски.

3.1.1. Проба кипячением в слабокислой среде.

В пробирку вносят 1 мл мочи и проверяют ее реакцию на лакмус. Если моча щелочная, то ее предварительно очень слабо подкисляют добавлением 1% раствора уксусной кислоты. Мочу кипятят. В присутствии белка образуется муть или осадок. При кипячении мочи может выпадать осадок фосфатов и карбонатов кальция и магния. В этом случае осадок растворяется при добавлении 1-2 капель 10% раствора уксусной кислоты и повторном кипячении.

3.1.2. Проба кипячением в кислой среде в присутствии насыщенного раствора поваренной соли.

К 1 мл мочи прибавляют 5 капель насыщенного раствора хлорида натрия, 1-2 капли 10% раствора уксусной кислоты и кипятят. В присутствии белка образуется белый хлопьевидный осадок или муть.

3.1.3. Проба Геллера.

В пробирку помещают 1 мл концентрированной азотной кислоты и осторожно из пипетки, спуская по стенке пробирки, наслаивают мочу. При наличии белка на самой границе двух жидкостей образуется белый аморфный осадок или муть в виде кольца. Проба с концентрированной азотной кислотой чувствительна - она открывает до 0,033 г/л белка.

3.1.4. Проба с сульфосалициловой кислотой.

Проверяют реакцию мочи. Мочу щелочной реакции подкисляют 2-3 каплями 5-10% раствора уксусной кислоты. В пробирку наливают 3 мл мочи и прибавляют 6 капель 20% раствора сульфосалициловой кислоты. Моча, содержащая белок, мутнеет. Результаты читают на темном фоне.

Проба с сульфосалициловой кислотой одна из самых чувствительных, она открывает белок при содержании его в моче до 0,015 г/л. Однако проба дает ложноположительные результаты с некоторыми лекарствами (производными пенициллина).

3.1.5. Количественное определение белка в моче по методу разведения (метод Брандберг – Робертс - Стольникова).

Экспериментально установлено, что если при взаимодействии слоя азотной кислоты и слоя мочи образование белкового кольца произойдет между 2 и 3 минутами, то в данной моче содержится 0,033 г/л белка.

В пробирку помещают 1 мл реактива Ларионовой и осторожно по стенке пробирки наливают такое же количество мочи. При рассмотрении на темном фоне появление тонкого белкового кольца между 2-й и 3-й минутами на границе двух жидкостей указывает на наличие в моче 0,033 г/л белка. Если кольцо появляется раньше двух минут после наслоения, мочу следует развести водой и произвести повторное наслоение разведенной мочи. При этом подбирают такое разведение мочи, при наслоении которой кольцо образуется между 2-й и 3-й минутами. Если кольцо имеет нитевидную форму, мочу нужно развести в 2 раза, при широкой форме кольца - в 4 раза и при компактной форме - в 8 раз. Количество белка вычисляют путем умножения 0,033 г/л на степень разведения.

Расчет количества белка в зависимости от разведения мочи представлен в таблице 7.

Таблица 7. Определение содержания белка в моче методом разведения.

Количество мочи, мл

Количество воды, мл

Кратность

разведения

Количество белка, г/л

1

1

2

0,066

1

2

3

0,099

1

3

4

0,132

1

4

5

0,165

Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]