Лабораторная диагностика лейшманиозов

_в Возбудителями лейшманиозов являются Leishmania tro­pica (вызывает кожный лейшманиоз), Leishmania donovani (вызывает лейшманиоз внутренних органов — кала-азар), Leishmania brasiliensis (возбудитель американского лейш-маниоза).

При лейшманиозах используют микроскопический метод, выделение культур, реже биологический и серологический методы.

Материалом для исследования при кожном лейшманиозе являются грануляционная ткань или пунктат папул, при общем лейшманиозе (кала-азар) —пунктат костного мозга (грудины) или увеличенного лимфатического узла.

Микроскопическое исследование. Из иссле­дуемого материала делают мазки, фиксируют спиртом или смесью Никифорова и опрашивают по Романовскому— Гимзе. В препаратах обнаруживают безжгутиковые лейш-маниальные формы (рис. 96). Они имеют овальную или круглую форму (2—4X1,5—2,5 р,), цитоплазма окрашена в голубой цвет, ядро — в красный и блефаропласт — в фио­летово-красный. От блефаропласта к периферии идет ризо-

290

­пласт — тонкая пластинка, окрашенная в розовый цвет. Паразиты располагаются внеклеточно и внутри клеток.

Выделение культур лейшмании. Исследуемый материал сеют в конденсационную жидкость среды (14 г агара, 6 г поваренной соли и 900 мл дистиллированной во­ды), разливают по пробиркам и стерилизуют под давлени­ем. В пробирку с расплавленной и остуженной до 45° средой добавляют 30% дефибринированной крови кролика и ска­шивают, а затем часть ее распределяют по поверхности. Культивируют лейшмании при температуре 22—25°. Рост появляется на 3—5-й день. При микроскопировании мазков из культуры обнаруживают лептомонадные — жгутиковые формы. Тело паразита удлиненное (10—14X4—5 \х) с ядром и жгутом, который берет начало от блефаропласта, рас­положенного в передней части тела. Иногда наблюдаются скопления лейшмании в виде розеток (см. рис. 32).

Формалиновая реакция. К 1 мл сыворотки боль­ного прибавляют 1 каплю 40% раствора формальдегида. Результат читают через 30 минут и 24 часа. Положитель­ная реакция характеризуется появлением помутнения и желатинизированной сыворотки. Реакция мало специфична.

Биологический метод. Патологическим материа­лом заражают внутрибрюшинно или в печень хомяков. У них развивается висцеральный лейшманиоз. У заражен­ных собак можно наблюдать поражения кожи.

Лабораторная диагностика токсоплазмоза

Возбудитель — Toxoplasma gondii.

Для диагностики токсоплазмоза применяется микроско­пический, серологический методы, аллергические и биоло­гические пробы.

Обычно используют спинномозговую, плевральную, вен-трикулярную жидкости, кровь, мокроту, биопсированные лимфатические узлы. -

Микроскопическое исследование. Из иссле­дуемых жидкостей после центрифугирования при 2000 об/мин в течение 15—20 минут готовят мазки, а из тканей — пре­параты-отпечатки, обрабатывают их жидким фиксатором и окрашивают по Романовскому—Гимзе.

Паразиты имеют изогнутую форму, один конец заострен, у другого округленного полюса располагается ядро; разме­ры клеток 4—6 \х в длину и 2—3 \х в ширину. Располагают­ся они внутриклеточно или внеклеточно (см. рис. 34), кроме

291

того, могут встречаться цисты и псевдоцисты, которые представляют собой скопление нескольких сотен токсоплазм в одной клетке, окруженной видимой оболочкой.

Серологический метод. Для диагностики токсо-плазмоза применяют реакцию связывания комплемента. Ан­тигеном служат токсоплазмы, полученные на куриных и утиных эмбрионах. Эта реакция мало специфична.

Реакция задержки окраски. Токсоплазмы, об­работанные иммунной сывороткой, теряют способность окрашиваться раствором метиленового синего. В этой реак­ции перитонеальное содержимое зараженных мышей смеши­вают с исследуемой сывороткой и выдерживают 30—60 ми­нут в водяной бане при 37—56°, затем в пробирки добавляют метиленовый синий, готовят препараты и микроскопируют. Контролем является та же перитонеальная жидкость, сме­шанная с сывороткой, не содержащей антител; При нали­чии в исследуемой сыворотке антител в первом препарате обнаруживают неокрашенные токсоплазмы, а в контроль­ном — окрашенные.

Аллергическая проба малоспецифична. В каче­стве аллергена используют токсоплазмин.

Заражение животных (белых мышей или морских свинок) производится в мозг или внутрибрюшинно. Выявить возбудитель удается иногда лишь на втором пассаже.