Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Praktikum Pyatkin STAR.doc
Скачиваний:
2
Добавлен:
03.01.2020
Размер:
10.07 Mб
Скачать

Лабораторная диагностика Коксаки и echo

Энтеровирусы Коксаки (Coxackievirus) и ECHO (Echovi-rus) вызывают болезни с многообразной клинической кар­тиной в виде спорадических случаев, а также эпидемических вспышек.

Вирусы Коксаки (название дано по месту населенного пункта вблизи Нью-Йорка, где они были впервые обнару­жены) являются этиологическим фактором асептического менингита, эпидемической миальгии, герпангины и др. В настоящее время известно 30 серологических типов ви­русов Коксаки, из которых 24 входят в группу А и 6 — в груп­пу В.

У вирусов ECHO имеются 32 серологических типа, из них только 10 патогенны для человека. По способности размно­жаться на определенных тканевых культурах их дифферен­цируют на 3 группы: А, В и Н. Вирусы ECHO человека, кроме серотипа 9, непатогенны для лабораторных живот­ных. Они размножаются в первичных культурах почек обезьян и амниона человека, из перевиваемых клеток ис­пользуют амниотические клетки человека. В клетках Нф-2 цитопатический эффект отсутствует.

Инфекции, вызываемые вирусами ECHO, также характе­ризуются разнообразием клинической картины, но наиболее отчетливо проявляются асептический менингит и вирусный энтерит.

Перечисленные болезни по клинической картине весьма сходны с предпаралитической стадией полиомиелита и его непаралитическими формами. В связи с этим вирусологи­ческое и серологическое исследования являются необходи­мыми звеньями диагностики этих болезней.

Объектами лабораторных исследований в первую неде­лю болезни являются отделяемое слизистой оболочки но­соглотки, миндалин и спинномозговая жидкость. Испраж­нения больных и переболевших можно исследовать в те­чение 2—6 недель со дня заболевания. Кровь для серологических реакций берут в начале болезни и повтор­

но через 10—14 дней. У трупов исследуют мышцы сердца, печень, поджелудочную железу ц другие органы.

Для выделения энтеровирусов и их идентификации за­ражают мышей-сосунков и культуры тканей. Каждой про­бой рекомендуется заражать три группы животных по 8 мышей 1—2-дневного возраста (одну группу в мозг, вто­рую внутримышечно и третью внутрибрюшинно). Имеют­ся наблюдения, что вирусы Коксаки В легче выделяются при внутримозговом заражении, а вирусы Коксаки А — при внутримышечном и внутрибрюшинном. В мозг вводят не более 0,02 мл взвеси на глубину 2—3 см в область лоб­ного бугра, внутримышечно и в брюшную полость — 0,03—0,05 мл. Наблюдения за животными продолжаются до 14 дней. При положительном результате мыши забо­левают на 4—7-й день после заражения.

Вирусы Коксаки А вызывают вялые параличи с дегене­ративно-воспалительными изменениями в поперечнополоса­тых мышцах. Вирусы Коксаки А, кроме вируса типа 9, с трудом адаптируются к культурам тканей.

Для вирусов Коксаки В характерны спастические пара­личи, тремор, судороги. При гистологических исследова­ниях наблюдаются поражения головного мозга, изменения в коричневом жире и очаговый миозит.

Вирусы Коксаки В легко выделяются в культурах тка­ней. Некоторые серотипы (1 и 5) непатогенны для ново­рожденных мышей.

Заболевших мышей убивают, кожу и кишечник удаляют, тушку растирают и готовят 10% взвесь на растворе Хенк­са. Взвесь центрифугируют, надосадочную жидкость отде­ляют, обрабатывают антибиотиками. При отрицательном результате посева на наличие бактерий, вируссодержащую жидкость сохраняют в холодильнике для дальнейшей ра­боты.

Культуру тканей (первично трипсинизированные клетки почек эмбриона человека или обезьяны, перевиваемые клетки человека HeLa, Нер-2 и др.) заражают тем же ма­териалом и наблюдают в течение 7—10 дней. Среду из пробирок с дегенерированной тканью отсасывают* и ею за­ражают свежую того же происхождения культуру ткани — второй пассаж. Положительный результат во^ втором пас­саже подтверждает размножение вируса в ткани. Культу-ральную жидкость собирают и сохраняют при температуре 25—30°. На основании этих исследований делают предва­рительное заключение. Если мыши заболевают, а в ткани

280

Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]