Задания

1. Изучение посева рвотных масс больного в пептонной воде: а) приготовление мазков из пленки; б) приготовление препарата «висячей» капли из пленки; в) постановка нитро-зо-индоловой реакции.

2. Изучение посева рвотных масс больного в чашках со щелочным агаром: а) отбор колоний, приготовление мазков, окраска по Граму; б) постановка ориентировочной реакции агглютинации; в) выдача третьего ориентировочного резуль­тата.

3. Исследование воды на наличие холерного вибриона: приготовление мазка и препарата «висячей» капли из плен­ки в пептонной воде.

227

1. Протоколирование всех данных проведенного исследо­вания.

4. Демонстрация ускоренного метода исследования по Ер­мольевой.

ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА БОЛЕЗНЕЙ, ВЫЗЫВАЕМЫХ ГЕМОГЛОБИНОФИЛЬНЫМИ БАКТЕРИЯМИ

К гемоглобинофильным бактериям принадлежат возбуди­тели коклюша и паракоклюша (Bordetella pertussis, Borde-tella parapertussis), мягкого шанкра (Haemophilus ducreyi), острых конъюнктивитов (Haemophilus aegyptius и др.) и бактерия инфлюэнцы (Haemophilus influenzae), которая вы­зывает острые воспалительные процессы верхних дыхатель­ных путей.

При лабораторной диагностике коклюша исследуют мо­кроту, посев которой производят методом «кашлевых пла­стинок». Для этого в момент приступа кашля перед ртом больного на расстоянии 4—8 см помещают открытую чаш­ку Петри с питательной средой Борде — Жангу.

Способ изготовления среды Борде — Жангу:

А. Сварить в автоклаве 100 г мелко нарезанного картофеля с 200 мл 4% раствора глицерина;

Б. Растворить 5 г агара в 150 мл 0,6% поваренной соли. К 150 мл агара прибавить 50 мл жидкости А и автоклавировать. Накануне посева расплавить и остудить до 50° среду и прибавить 30—50% дефибриниро-ванной крови кролика.

Для подавления посторонних микробов рекомендуют добавлять в чашку 15—25 ЕД пенициллина.

После нескольких кашлевых толчков чашку закрывают и помещают в термостат. Если кашель отсутствует, отде­ляемое слизистой оболочки забирают тампоном из задне-глоточного пространства через нижние носовые ходы и заг­нутым тампоном через рот. На 2—5-е сутки на агаре появ­ляются типичные мелкие колонии, которые через 24 часа становятся большими, выпуклыми, мутными и сероватыми, напоминающими каплю ртути (рис. 83).

Выделенные культуры сеют в среды «пестрого» ряда и ис­пытывают на животных. Возбудитель коклюша не фермен­тирует углеводов, не восстанавливает нитраты в нитриты, патогенен для морских свинок, у кроликов альбиносов при внутрикожном введении 0,2 мл смыва двухсуточной культуры, содержащей 8—10 млн. микробных тел, че­рез 18—24 часа вызывает геморрагии с последующим некрозом.

228

рушить естественного расположения бактерий, распределяют толстым слоем по стеклу. При микроскопии окрашенных пре­паратов обнаруживают параллельно расположенные цепоч­ки из грамотрицательных мелких овоидных бактерий, кото­рые могут находиться также внутри клеток.

Кроме бактериоскопического исследования, эти бактерии выращивают в средах с 20—33% дефибринированной крови. Образование колоний наблюдается через 24 часа. Они слег­ка выпуклы, серовато-белые, мелкие, через 2—3 суток коло­нии увеличиваются и приобретают кратерообразное вдавле-ние.

При диагностике конъюнктивитов исследуют отделяемое слизистой оболочки конъюнктивы. Материал подвергают микроскопии и посеву на кровяной агар, свернутую сыворот­ку, слабо щелочной агар и желатину.

При микроскопии обнаруживают мелкие полиморфные грамотрицательные палочки—бактерии Кох—Уикса (Наегп. aegyptius) или короткие толстые грамотрицательные палоч­ки, складывающиеся по две или короткими цепочками — бактерии Моракс — Аксенфельда (Moraxella lacunata). Оба вида бактерий растут в средах с добавлением крови. Moraxella lacunata разжижают свернутую сыворотку и же­латину. На этих средах через 24—36 часов вокруг колонии образуются лакуны.