Лабораторная диагностика эпидемического менингита, гонореи и бленнореи Лабораторная диагностика эпидемического менингита

Эпидемический менингит вызывается менингококками (Neisseria meningitidis). Материалом для исследования служит спинномозговая жидкость, которую берут от боль­ных посредством люмбальной пункции. Под давлением мут­ная спинномозговая жидкость вытекает струей (в норме она прозрачна и вытекает каплями); ее собирают в стериль-

189

ную пробирку и немедленно отправляют в лабораторию. Менингококки очень чувствительны к колебаниям темпера­туры, поэтому пробирку завертывают в вату или грелку.

При исследовании на носительство отделяемое слизистой оболочки носоглотки снимают специальным тампоном, изог­нутым под углом. Материал, доставленный в лабораторию, помещают в термостат.

Микроскопическое исследование спинномоз­говой жидкости дает возможность определить наличие ме­нингококка. Если спинномозговая жидкость имеет вид гноя, из нее готовят мазки без предварительной обработки, при незначительной мутности спинномозговую жидкость центри­фугируют и готовят мазки из осадка. Мазки окрашивают по Граму и метиленовым синим (рис. 79, в). Обнаружение грамотрицательных диплококков бобовидной формы, со­прикасающихся вогнутыми краями, расположенных внутри цитоплазмы лейкоцитов, свидетельствует о присутствии ме­нингококка.

Бактериологическое исследование. Одно­временно с бактериоскопией производят посев спинномозго­вой жидкости или ее осадка. Менингококк растет только в специальных питательных средах, содержащих нативный белок.

При исследовании используют асцитический или сыворо­точный бульон и агар (3 части мясо-пептонного агара и 1 часть асцитической жидкости или сыворотки), а также бульон и агар по Легру (к 3% мясо-пептонному агару, рас­плавленному и остуженному до 56°, добавляют 7з формали-низированной сыворотки и разливают в чашки Петри). Для получения формалинизированной сыворотки к 500 мл лоша­диной сыворотки добавляют 1 мл 40% раствора формальде­гида и через 5 минут 1 мл аммиака, затем ее разводят в 3 раза дистиллированной водой и стерилизуют при 110° в течение 15 минут.

На 2-й день после инкубации при 37° изучают выросшие колонии. Менингококки образуют небольшие, круглые, вы­пуклые, прозрачные колонии. В мазках, взятых из этих ко­лоний, обнаруживают весьма полиморфные диплококки и тетракокки. Микроскопическая картина настолько пестра, что создает впечатление нечистой культуры. Колонии пере­севают на скошенный асцитический или сывороточный агар. Если в чашках со специальными средами нет роста, вторич­но сеют спинномозговую жидкость, которая сохраняется в термостате.

190

На 3-й день исследования полученную чистую культуру идентифицируют, сеют в среды «пестрого» ряда (менинго­кокки расщепляют глюкозу и мальтозу с образованием кис­лоты) и ставят реакцию агглютинации с менингококковыми сыворотками. На 4-й день после учета изменений сред «пе­строго» ряда и развернутой агглютинации выдают резуль­тат.

Исследование отделяемого слизистой оболочки носоглотки. Для микроскопического ис­следования готовят мазки тампоном. Однако обнаружение грамотрицательных диплококков не всегда подтверждает наличие менингококков. В носоглотке могут находиться грамотрицательные микрококки,,не отличимые от менинго­кокка (Neisseria sicca, Neisseria flava, Neisseria catarrha-lis).

Более достоверные результаты получают при бактерио­логическом исследовании. Тампоны с отделяемым носоглот­ки погружают в пробирку с бульоном. Полученную взвесь сеют петлей в чашку Петри с одной из сред, рекомендован­ных для посева спинномозговой жидкости. Выделение чис­той культуры и идентификация ее проводится так же, как при исследовании спинномозговой жидкости.

Серологический метод. До применения сульф­амидных препаратов и антибиотиков обязательно определя­ли тип менингококка, вызвавшего заболевание, так как ле­чение проводилось типовыми менингококковыми сыворотка­ми. В настоящее время используют определение типа с эпидемиологической целью.

Реакцию преципитации ставят для определения типа возбудителя. Прозрачный центрифугат спинномозговой жидкости наслаивают на ти­повую сыворотку, заранее налитую в пробирку. Реакцию учитывают пос­ле выдерживания в течение часа в водяной бане при 37° или в течение 2—15 часов в термостате. При положительной реакции на границе сое­динения спинномозговой жидкости и сыворотки появляется кольцо.

Реакция агглютинации по Ноблю применяется также с целью опреде­ления типа выделенной культуры. Густую взвесь микробов наливают в 3 пробирки по 3 капли, затем в пробирки вносят по Зжапли неразведан­ной или разведенной 1 : 10 менингококковой сыворотки типа А, В и С. Смесь взбалтывают в течение 2—5 минут, после чего в каждую из них доливают 10—20 капель изотонического раствора и учитывают резуль­таты.