Лабораторная диагностика инфекций, вызываемых пневмококками

Пневмококки (Dlplococcus pneumoniae) являются возбу­дителями крупозной пневмонии, катаральной пневмонии и других поражений дыхательного аппарата, ползучей язвы роговицы^ реже нагноительных процессов среднего уха, гай­моровой полости, а также сепсиса и менингита.

Исследованию подлежат мокрота, гной, спинномозговая жидкость, кровь, органы трупа.

Микроскопическое исследование. Из иссле­дуемых материалов (кроме крови) готовят мазки и окраши­вают по Граму. Пневмококки располагаются попарно, клет­ки имеют вытянутую форму в виде пламени свечи и окру­жены капсулой (рис. 79, а). На основании микроскопии можно судить о наличии пневмококка. Однако более досто­верные результаты получают при тщательном изучении вы­деленной культуры.

Получение чистой культуры из материала, не загрязнен­ного посторонними микробами, не представляет затрудне­ний. Кровь в количестве 5—10 мл сеют в сывороточный буль­он (1 часть сыворотки и 3 части мясо-пептонного бульона, рН 7,2—7,4) или в сахарный бульон. Цосле 18—24 часов инкубации в термостате производят пересев в чашку с 10% кровяным агаром. Спинномозговую жидкость центрифуги­руют и осадок сеют на кровяной агар. Колонии пневмо­кокка напоминают колонии стрептококка: мелкие, почти плоские, непрозрачные, с небольшой зоной позелене­ния, реже гемолиза. Характерно вдавление в центре ко­лонии.

187

лунками. Через 2 минуты препараты «висячей» капли исследуют с по­мощью иммерсионной системы при искусственном синем освещении. При положительной реакции в капле с гомологической сывороткой видны увеличенные капсулы.

2. Метод Сэбина — микроагглютинация. У мыши через 5—6 часов после внутрибрюшинного заражения мокротой больного пастеровской пипеткой берут перитонеальную жидкость и наносят 4 капли на предмет­ное стекло. К 3 каплям добавляют равное количество агглютинирующих сывороток I, II и III типов, а к 4— одну каплю изотонического раствора. Сыворотки I и II типов предварительно разводят 1 : 10, а сыворотку III типа — 1 : 5. Каждую каплю тщательно смешивают, после высушивания фиксируют и окрашивают в течение минуты фуксином Циля, разведен­ным 1 : 5. В мазке с гомологичной сывороткой при микроскопии хорошо видны агглютинировавшиеся микробы. В мазках с отрицательным ре­зультатом все поле зрения покрыто равномерно распределенными пнев­мококками.

Задания

1. Продолжение бактериологического исследования гноя: а) изучение культуральных свойств выделенных стрептокок­ков и стафилококков; б) микроскопия мазков из выделен­ных культур; в) посев чистой культуры стафилококка в цит-ратную плазму; г) учет дермонекротической пробы.

2. Продолжение бактериологического исследования крови. Изучение характера роста гемокультуры стрептококка на кровяном агаре.

3. Заключение по проведенному исследованию гноя и крови.

4. Изучение роста пневмококка на кровяном агаре и в сы­вороточном бульоне.

5. Изучение морфологии пневмококка в препаратах — отпечатках из органов белой мыши, погибшей от пневмокок­ковой септицемии.