
- •Издание второе, переработанное и дополненное
- •Пяткин Кирилл Дмитриевич, Маркова Надежда Степановна, Трофимова Нина Дмитриевна Руководство к практическим занятиям по медицинской микробиологии
- •Издательство «Медицинаэ Москва, ПетроверигскиЯ пер., 6/8 Заказ 7. 11-я типография Главполиграфпрома Комитета по печати при Совете Министров ссср. Москва, Нагатинская ул., д. 1. Цена 72 коп.
- •Микробиологическая лаборатория и ее оборудование. Принципы устройства микроскопов и правила микроскопии Микробиологическая лаборатория и ее оборудование
- •Принципы устройства микроскопов и правила микроскопии
- •Задания
- •Методика приготовления препаратов (мазков) и простые способы окраски. Морфология и строение бактерий (изучение основных форм)
- •2 Заказ ш 7
- •Феноловый фуксин Циля
- •Фуксин Пфейффера
- •Метиленовый синий (тиазин-тетраметил-тионин)
- •Задания
- •Задания
- •Способ Нейссера
- •Морфология и строение актиномицетов и спирохет Морфология и строение актиномицетов
- •Морфология и строение спирохет
- •Задания
- •Морфология и строение вирусов
- •Задания
- •Морфология и строение грибов
- •Задания
- •Морфология и строение простейших
- •Задания
- •Методы стерилизации
- •Культивирование микроорганизмов. Методы посева и выделения чистых культур аэробных бактерий
- •Методы посева чистых культур аэробных бактерий
- •Выделение чистых культур аэробных бактерий
- •Задания
- •Методы выделения чистых культур аэробных бактерий (продолжение). Культивирование и выделение чистой культуры анаэробных бактерий
- •Выделение чистых культур аэробных и анаэробных бактерий (продолжение). Изучение ферментативных свойств бактерий
- •Методы культивирования и выделения риккетсии
- •Методы культивирования и выделения вирусов
- •Задания
- •Действие физических и химических факторов а микроорганизмы. Санитарно-бактериологическое исследование почвы, воды и воздуха
- •Санитарно-бактериологическое исследование почвы, воды и воздуха
- •3 Адания
- •Микрофлора тела человека
- •Действие биологических факторов на микроорганизмы
- •Задания
- •Методические указания о правилах взятия некоторых материалов для микробиологического исследования
- •Задания
- •Задания
- •Задания
- •Задания
- •Получение диагностических сывороток
- •Взаимодействие токсина с антитоксином
- •Реакция преципитации
- •Задания
- •Реакции агглютинации
- •Реакция лизиса и гемолиза
- •Задания
- •Реакция связывания комплемента
- •Реакция фагоцитоза
- •Приготовление и применение вакцин
- •Задания
- •Получение и применение лечебных сывороток
- •Аллергические пробы
- •Лабораторная диагностика стафилококковых и стрептококковых инфекций Лабораторная диагностика стафилококковых болезней
- •Лабораторная диагностика стрептококковых болезней
- •Лабораторная диагностика инфекций, вызываемых пневмококками
- •Задания
- •Лабораторная диагностика эпидемического менингита, гонореи и бленнореи Лабораторная диагностика эпидемического менингита
- •Лабораторная диагностика гонореи и бленнореи
- •Лабораторная диагностика туляремии
- •Лабораторная диагностика бруцеллеза
- •Лабораторная диагностика инфекций, вызываемых escherichia coli. Лабораторная диагностика брюшного тифа, паратифов а и в
- •Задания
- •Лабораторная диагностика холеры
- •Задания
- •Задания
- •Лабораторная диагностика сибирской язвы
- •Задания
- •Задания
- •Свойства дифтерийных и непатогенных коринебактерий
- •Задания
- •Лабораторная диагностика туберкулеза
- •Задания
- •Лабораторная диагностика актиномикоза и трепанематозов Лабораторная диагностика актиномикоза
- •Лабораторная диагностика сифилиса
- •Лабораторная диагностика лептоспирозов
- •Задания
- •Лабораторная диагностика болезней, вызываемых риккетсиями
- •Задания
- •Лабораторная диагностика вирусных инфекций
- •Задания
- •Лабораторная диагностика полиомиелита
- •Лабораторная диагностика Коксаки и echo
- •19 Заказ № 7
- •Задания
- •Задания
- •Лабораторная диагностика дерматомикозов
- •Задания
- •Лабораторная диагностика инфекций, вызываемых простейшими
- •Лабораторная диагностика малярии
- •Лабораторная диагностика лейшманиозов
- •Лабораторная диагностика токсоплазмоза
- •Лабораторная диагностика амебиаза
- •Задания
- •Физиология микроорганизмов
Задания
1. Санитарно-бактериологическое исследование воды (окончание): а) учет изменений в розоловом агаре; б) оп- ределение коли-титра и коли-индекса по специальным таб- лицам и оценка качества воды.
Посев протея OXi9 на обычный мясо-пептонный и феноловый агар.
3.Микроскопия и зарисовка готовых препаратов с дифтерийными коринебактериями, измененными под влиянием различных факторов.
121
модиев также прокалывают кожу пальца иглой, наносят капли крови на предметное стекло, готовят мазки и препараты «толстой» капли.
Отбор проб испражнений производят в судно, которое тщательно промывают горячей или проточной водой, чтобы не оставалось следов дезинфицирующих веществ, губительно действующих на возбудители кишечных заболеваний. На сухое дно судна укладывают стерильную бумагу размером 25X25 см. Из испражнений берут слизисто-гнойные комочки и засевают их в чашки с соответствующими питательными средами. Нередко материал берут, не ожидая дефекации, из прямой кишки резиновыми катетерами или стеклянными трубками из тугоплавкого стекла с оплавленными концами. Диаметр трубок должен быть равен 3—4 мм, длина 14— 15 см. Открытый конец трубки вводят в прямую кишку на глубину 10 см у взрослых и на глубину 5 см у маленьких детей. При транспортировке проб испражнений в лабораторию их помещают в короткие пробирки, которые закрывают резиновой или корковой пробкой. С внутренней стороны пробки укрепляют металлическую или деревянную ложку. На дно пробирки наливают консервант, чаще используют 30% раствор глицерина с 0,6% раствором хлористого натрия (рН 7,8).
Рвотные массы собирают в стерильные или прокипяченные стеклянные банки с притертыми пробками, нейтрализуют их 10% раствором соды.
Мочу выпускают стерильным катетером, собирают во флаконы и сеют. Для бактериоскопического исследования на наличие гонококков и выделения сальмонелл брюшного тифа и паратифов (учитывая наличие элективных сред) мочу собирают обычным путем.
Спинномозговую жидкость извлекают в количестве 8— 10 мл иглой с широким просветом, делая прокол между IV и V поясничным позвонком, жидкость разливают в 2—3 стерильные пробирки, защищают от охлаждения ватой и немедленно направляют в лабораторию.
Серозное и гнойное отделяемое язв, содержимое везикул и пустул берут лосле обработки спиртом пораженного участка стерильным ватным тампоном, из более глубоких слоев—бактериологической петлей. При наличии закрытых бубонов или абсцессов делают пункцию шприцем.
Отделяемое слизистой оболочки зева и носа снимают:стерильными ватными тампонами (на толстой проволоке или деревянной, хорошо выструганной палочке), вставленными в
123
стерильные пробирки, и исследуют на наличие дифтерийных коринебактерии, менингококка, гемолитического стрептококка и др. При одновременном взятии отделяемого слизистой оболочки зева и носа пользуются двумя тампонами.
Материал из зева берут натощак или не ранее 2 часов после еды и полоскания горла. Корень языка придавливают шпателем и под контролем глаза, не касаясь языка, слизистой оболочки щек и зубов (учитывая наличие в слюне бактерицидных веществ), захватывают слизь. При обнаружении пленки необходимо снять часть ее, так как в ней содержатся патогенные микроорганизмы. Тщательно упакованные пробирки с тампонами доставляют в лабораторию не позднее 2—3 часов с момента взятия материала и производят посевы. Кратковременное хранение тампонов до отправки в лабораторию разрешается только в темном прохладном месте. Слизь для исследования на. наличие менингококка снимают с задней стенки носоглотки, поэтому проволоку с тампоном изгибают почти под прямым углом. Прижимая шпателем корень языка, тампон подводят к задней стенке носоглотки, затем его осторожно выводят обратно, помещают в пробирку и немедленно направляют в лабораторию.
Мокроту (первые утренние выделения) собирают в банку, плотно закрывающуюся пробкой. У маленьких детей можно собирать тампоном заглоточную слизь или, раздражая слизистую оболочку зева, вызывают у ребенка кашель и захватывают тампоном комочек мокроты. Можно использовать также промывные воды желудка, так как дети не откашливают мокроту, а заглатывают ее.
При взятии трупного материала из внутренних органов (печень, селезенка, лимфатические узлы, легкие) поверхность органа прижигают раскаленным скальпелем, затем вырезают кусочки органов, размером 1—2 см3. Желчный пузырь удаляют с кусочком печени. На желудок накладывают лигатуры, вырезают и направляют в лабораторию. Для исследования содержимого тонкого и толстого кишечника используют их отрезки, разрезы делают с каждой стороны между двумя лигатурами. Экссудат и гной головного мозга собирают ватным тампоном непосредственно после вскрытия черепа.
Отобранные пробы помещают в банки с притертыми пробками, которые со всеми предосторожностями укладывают в железный ящик и опечатывают.
124
ИНФЕКЦИЯ И ИММУНИТЕТ
Для изучения инфекционного процесса и иммунитета применяют специальные методики, с помощью которых выявляют свойства болезнетворных микробов, а также ответную реакцию макроорганизма на внедрение возбудителя.
Кроме уже описанных методов лабораторной диагностики заболеваний (микроскопический и выделение чистых культур микробов), производят экспериментальное заражение животных, серологические исследования и аллергические пробы.
МЕТОДЫ ИЗУЧЕНИЯ ИНФЕКЦИОННОГО ПРОЦЕССА. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ЗАРАЖЕНИЕ ЖИВОТНЫХ
Экспериментальное заражение животных производят с целью: 1) выделения чистой культуры микроба, 2) воспроизведения заболевания, 3) изучения патогенности и вирулентности возбудителя.
Выбор экспериментальных животных обусловливается целью работы. Для заражения используют кроликов, морских свинок, белых мышей, белых крыс. Они восприимчивы к различным инфекционным болезням человека, удобны в обращении и легко размножаются в питомниках. Реже заражают хорьков, хлопковых крыс, обезьян, птиц и др.
В специальных, особенно вирусологических, лабораториях используют стандартизированных животных, для чего получают чистые линии. Линией называется группа животных, выведенная путем родственного скрещивания, способствующего закреплению в потомстве нужных признаков. Существует более 200 линий мышей, 50 линий кроликов, 10 линий морских свинок и т. д.
В связи с развитием новой отрасли биологии — гнотобио-логии (безмикробного выращивания животных)—стало возможным производить более точные исследования вопро^ сов инфекционного процесса и иммунитета. У беременных
Взятие материала и транспортировку его в случаях особо опасных инфекций (чума, холера и др.) производят по специальной инструкции.
Документация. В сопроводительной записке к пробам, посылаемым на исследование, должны быть указаны фамилия, имя, отчество больного или погибшего, наименование объектов, цель исследования, учреждение, направляющее их, адрес лаборатории, куда они должны быть доставлены, и дата.