Морфология и строение вирусов

Вирусы (рис. 26) относятся к живым системам. Их под­разделяют на: а) паразиты бактерий и других низших расте­ний — фаги; б) паразиты высших растений; в) паразиты че­ловека и животных.

Они характеризуются очень малой величиной и проходят через мелкие поры фильтров, измеряемые миллимикронами (миллимикрон — одна тысячная микрона). Размеры их ко­леблются от 10 до 350 тр.. Вирусы подразделяются на две группы: 1) вирусы, содержащие РНК, и 2) вирусы, содержа­щие ДНК. Они являются абсолютными внутриклеточными паразитами различных представителей растительного и жи­вотного мира. Многие из них вызывают тяжелые инфекцион­ные болезни у человека.

Более детальное изучение морфологии вирусов стало до­ступным с применением электронной микроскопии. При по­мощи этого метода у вирусов выявлена своеобразная обо­лочка— поверхностная мембрана, изучена их форма и бо­лее точно определены размеры. Форма у вирусов может быть: шаровидной, палочковидной, кубоидальной, спермато-зоидной и нитевидной.

Для определения размеров вирусов используют: 1) фильт­рование через коллодийные мембраны; 2) центрифугирова­ние в ультрацентрифугах; 3) фотографирование в электрон­ном микроскопе.

Фильтрование через коллодийные мембраны. В зависимо­сти от содержания коллодия и характера растворителя полу­чают фильтры с различной величиной пор. Взвесь вирусов перед фильтрацией освобождается от крупных частиц цент­рифугированием или специальной фильтрацией. Данные, по­лученные этим методом, приближаются к результатам, ус­тановленным при помощи электронного микроскопа.

Центрифугирование взвесей, содержащих вирусы, произ* водят в ультрацентрифугах, дающих 30 000—50 000 об/мин. Для этого капилляры помещают открытым концом вниз в камеру, куда наливается жидкость с вирусом. Вирионы при

42

центрифугировании осаждаются и концентрация вируса в жидкости, наполняющей капилляр, уменьшается. Зная ско­рость осаждения частиц вируса, вязкость жидкости и другие данные, по специальной формуле вычисляют величину ви­руса.

Вирусы фотографируются в электронном микроскопе, затем их величину измеряют. При вычислении размеров ви­русов учитывается увеличение микроскопа.

Вирусоскопия. Некоторые вирусы были обнаруже­ны обычным световым микроскопом задолго до использова­ния электронной микроскопии. Они были выявлены Паше-ном в содержимом пустул при оспе, осповакцине (тельца Пашена). С помощью электронного микроскопа при изуче­нии ряда других вирусных инфекций выявлены вирусы зна­чительно меньших размеров. Для обнаружения вирусов ос­пы пользуются специальными методами окраски мазков из пустул больного, искусственно увеличивающими вирус до размеров 0,2 jx. Наиболее эффективным из них считается метод серебрения по Морозову (см. стр. 40). Вирус оспы окрашивается по методу Морозова в черный цвет. Истинная морфология его кубоидальная, но в окрашенном виде и при исследовании световым микроскопом он приобретает кокко-видную форму.

Внутриклеточные включения. Одной из особенностей ви­русов является образование внутриклеточных включений. Они обнаруживаются в цитоплазме, ядрах клеток, а некото­рые — одновременно и в цитоплазме и в ядрах.

Внутриклеточные включения являются строго специфич­ными и имеют большое диагностическое значение. Так, при заболевании бешенством это тельца Бабеша — Негри, ос­пой— тельца Гуарниери и др. В зависимости от вида виру­сов им свойственны определенные размеры, структура, от­ношение к красителям. Предполагают, что внутриклеточные включения при вирусных заболеваниях представляют собой скопления вирионов, в образовании которых принимают уча­стие и патологические элементы клетки. Включения при не­которых заболеваниях характеризуются наличием неокра­шенной зоны.

Окраску внутриклеточных включений производят по мето­ду Туревича, Муромцева и др.

Метод Туревича. Препараты — срезы аммонова рога при бе­шенстве или срезы из роговицы зараженного кролика при оспе окра­шивают железным гематоксилином в течение 2 минут и промывают во­дой. Затем в течение минуты их докрашивают 1% водным раствором

44

кислого фуксина и снова промывают водой. После этого обрабатывают смесью из равных частей насыщенного водного раствора пикриновой кислоты и. 96° спирта. Препарат быстро промывают, высушивают и по­гружают на несколько секунд в абсолютный спирт, высушивают и мик­роскопируют.

Метод Муромцева. Кусочки аммонова рога растирают в ступ­ке. Мазки делают на предметном стекле и фиксируют их метиловым спиртом или ацетоном в течение 1—2 часов, промывают водой, окраши­вают 5—10 минут красителем Мансона (2 г метиленового синего, 5 г буры и 100 мл дистиллированной воды), разведенным 1 :50. После этого мазки переносят в 10% раствор танина до получения бледно-голубой окраски; промывают водой, высушивают, обрабатывают абсолютным спиртом несколько секунд, высушивают и микроскопируют.

Тельца Бабеша — Негри обнаруживают при бешенстве в клетках центральной нервной системы, в мазках или сре­зах мозга, окрашенных по Туревичу или Муромцеву. Эти включения имеют округлую или эллипсоидную форму. В од­ной клетке может находиться несколько включений различ­ной величины и формы. При окраске по Туревичу цитоплаз­ма клеток светло-желтая, тельца Бабеша — Негри вишнево-красные с черными зернами. По Муромцеву цитоплазма окрашивается в бледно-голубой цвет, ядра клеток —в си­ний, а тельца Бабеша — Негри — в бледно-фиолетовый.

Тельца Гуарниери находят при оспе в пораженных эпи­телиальных клетках, они круглой или овоидной формы, гра­нулярной структуры, окрашиваются по Туревичу в темно-си­ний цвет.