Задания

1. Изучение строения актиномицетов в препаратах, окра­шенных по Граму. Демонстрация друзы.

2. Приготовление препарата из зубного налета, обработка методом серебрения, микроскопия.

3. Изучение морфологии боррелий, трепонем и лептоспир в мазках, окрашенных по Романовскому — Гимзе.

4. Демонстрация лептоспир в «темном поле» зрения и ме­тодом фазового контраста.

40

40

Представителями рода Leptospira являются ъозбулШёЛй желтушного (Leptospira icterohaemorrhagiae) и безжелтуш-пого (Leptospira grippotyphosa и др.) лептоспироза (рис. 24). Цитоплазма имеет многочисленные мелкие завит­ки, тесно прилегающие друг к другу, концы лептоспир загну­ты в виде буквы S или скобы. Известны двухкрючковые, бескрючковые и однокрючковые лептоспиры. По Романов­скому — Гимзе они ок­рашиваются в розова­то-сиреневый цвет.

О краска по Ро­мановском у—Г и м-з е. Краситель Рома­новского — Гимзы со­стоит из метиленового синего, эозина и азура, благодаря чему краси­тель обладает способ­ностью различно окра­шивать элементы мик­робной клетки и форменные элементы крови. Метод Романов­ского — Гимзы широко

используется при диагностике заболеваний, вызываемых трепонемами и простейшими. Цитоплазма простейших при­обретает голубой цвет, а ядра — красный. Элементы крови окрашиваются следующим образом: эритроциты — в розо­вый цвет, ядра лейкоцитов — в фиолетовый, цитоплазма — в голубой, базофильная зернистость — в синий, эозинофиль-ная — в красный, нейтрофильная — в сиреневый.

Перед обработкой препарата краситель разводят водой (рН 7—7,2) в 10—20 раз. Степень разведения меняется в за­висимости от серии красителя и рН воды. Поэтому реко­мендуют каждую новую серию красителя и воду проверять на контрольных мазках крови. Мазки из исследуемого ма­териала (кровь, гной, тканевая жидкость и др.) высуши­вают на воздухе, фиксируют метиловым спиртом 3 минуты, снова высушивают на воздухе и окрашивают. Обработку мазков удобно производить в чашках Петри, на дно кото­рых положены 2 подставки (из предметного стекла, разре­занного вдоль пополам). Препарат кладут мазком вниз на подставки и сбоку осторожно подливают разведенный краси­тель так, чтобы мазки соприкасались с ним. Окраску произ-

39

МОРФОЛОГИЯ И СТРОЕНИЕ РИККЕТСИЙ И ВИРУСОВ

Морфология и строение риккетсий

Риккетсии относятся к классу Microtatobiotes, порядку ickettsiales- они занимают промежуточное положение меж-V бактериями и вирусами. Риккетсии характеризуются ссьма малыми размерами 0,2-0,3x0,3-1,0 р; некоторые з них (возбудитель Ку-

Рис. 25. Риккетсии. / — кокковидная форма; 2 — 3 — палочко­видные; 4 — нитевидная.

Морозову (см. стр. 40) и др. — Гимзе цитоплазма риккет­сий красится в голубой цвет с различными оттенками, ядер­ная субстанция — в красный, однако ввиду малых размеров окрашиваемого материала эти цвета сливаются и восприни­маются как сиреневый.

Окраска по 3 д р о д о в с к о му. Тонкий препарат из органов трупа животного или культуры тканей высуши­вают на воздухе и фиксируют в пламени горелки, наливают разведенный феноловый фуксин Циля (10—15 капель на 10 мл дважды дистиллированной воды). Через 5 минут кра­ситель смывают водой и препарат на 1—3 секунды погру­жают в слабый раствор органической или минеральной кис­лоты (5% раствор лимонной или виннокаменной, 0,01% рас-

41

твор соляной). После этого препарат хорошо промывают водой и окрашивают около 10 секунд 0,5% водным раство­ром метиленового синего, снова промывают водой, высуши­вают и микроскопируют. Риккетсии окрашиваются в руби-ново-красный цвет, клеточные элементы, в которых они на­ходятся, — в голубой, ядра — в синий цвет.