Ход работы

1. Готовые чашки Петри с плотной питательной средой на основе ферментативного гидролизата мяса промаркировать с указанием значения показателя высеваемой концентрации клеток, температуры и фамилии студента.

2. Определить оптическую концентрацию бактерий в суспензии по стандарту мутности ГИСК.

3. Выполнить посев микробной суспензии на плотную питательную среду ( из разведения 10^-6 ), затем чашки поставить в термостат и инкубируют при температуре 7 и 27±2С. Чашки засеянные микробной суспензией сплошным «газоном» инкубировать при температуре 7±2С.

4. По истечении 2 суток на чашках с культурами бактерий, инкубируемых при температуре 27±2С описать колонии по следующей схеме:

- диаметр колонии – точечные (D – меньше 1 мм), мелкие (D – 1-2 мм), средние (D – 2-4 мм), и крупные (D – 4-6 мм и более).

- форма колонии - округлая, амебовидная, ризоидная.

- оптические свойства – прозрачная, матовая, флуоресцирующая, полупрозрачная (просвечивает), непрозрачная, блестящая.

- цвет – отмечают цвет колонии и выделение пигмента в среду.

- поверхность – гладкая, шероховатая, складчатая, бугристая.

- профиль – плоский, выпуклый, кратерообразный, врастающий в агар и т. д.

- край колонии – ровный, волнистый, лопастной, ризоидный и т. д.

- консистенция – маслянистая, тестообразная, вязкая, пленчатая.

При описании края и структуры колонии чашки Петри не открывая, помещают под микроскоп дном вверх.

5. Морфологию бактерий изучить из отдельной колонии. Произвести окрашивание по Граму. Окрашенный препарат микроскопировать, пользуясь объективом ВИ-40; мазок рассмотреть с объективом МИ-90. Просматривая препараты, зарисовать микроорганизмы, обращая внимание на форму, взаимное положение клеток и на соотношение размеров бактерий при разном увеличении микроскопа; определить отношение к окраске по Граму. Подсчитать количество колоний на чашке.

6. Через 5 суток культуру, инкубируемую при температуре 7±2С проанализировать: в случае выявления сплошного роста на чашках Петри, засеянных «газоном», определить концентрацию микробных клеток путем смыва с помощью стеклянного шпателя в минимальном объеме физиологического раствора (2-3 см³) и определить морфологию бактерий, как описано выше. На чашках засеянных микробной суспензией с целью выявления единичных колоний в случае обнаружения роста изучить колонии по вышеприведенной схеме и оценить морфологию бактерий из колоний.

Материалы, представляемые в отчет по лабораторной работе

1. Описать последовательность проведения работ

2. Результаты работы записать по форме:

Темп. выращивания

Характер роста

Количество колоний

Морф. клеток

Окраска по Граму

Морфология колоний

диаметр, мм

форма

Оптические свойства

цвет

поверхность

профиль

Край колонии

консистенция

27С

7С

7С

3. Изложить выводы по работе.