10. Підрахунок кількості клітин крові у птиці

У крові птиці на початку підраховують загальну кількість клітин в одному мікролітрі. Для цього використовують методику підрахунку еритроцитів у тварин. Потім готують мазки крові, фарбують як і при виведенні лейкограми. У пофарбованих мазках при великому збільшенні мікроскопа під імерсійним об’єктивом підраховують 1000 клітин з поділом їх на еритроцити, тромбоцити та лейкоцити. Потім підраховують кількість клітин окремих відів в 1 мкл крові. Наприклад: при підрахунку у лічильній камері у 1 мкл крові було 3 400 000 клітин. У пофарбованому мазку підраховано еритроцитів – 980, лейкоцитів – 8, тромбоцитів – 12, що у відсотках складає відповідно 98, 0,8 та 1,2%. Кількість еритроцитів: 3 400 000 : 100 х 98 = 3 332 000 у 1 мкл крові або 3,332 Т/л.

Таблиця 10.1. – Кількість еритроцитів, лейкоцитів і тромбоцитів у крові птиці

Вид птиці	Еритроцити, млн./мкл; Т/л	Лейкоцити, тис./мкл; Т/л	Тромбоцити, тис./мкл; Т/л
Кури	3 – 4	20 – 40	32 – 100
Гуси	2,5 – 3,5	20,5 – 30	35 – 80
Качки	3 – 4,5	20 – 40	35 – 80
Голуби	3 – 3,5	10 – 15	10 – 72

У такий спосіб вираховують також кількість лейкоцитів і тромбоцитів.

11. Приготування, фіксація і фарбування мазків крові

Мазки крові готують на чистому знежиреному предметному склі. Для цього скло кип’ятять у розчині натрію двовуглекислого 30 хвилин, промивають проточною, а потім дистильованою водою. Насухо витерте скло зберігають у банці з притертою кришкою в суміші спирт-ефіру порівну. Перед використанням скло виймають, протирають чистою сухою серветкою, не торкаючись поверхні скла руками.

Краплю крові наносять на середину предметного скла біля одного з його країв. Попереду краплі крові ставлять шліфований край скла під кутом 45 – 50°. Після розтікання краплі по шліфованому краю, скло рухають по предметному склу до протилежного краю.

Перед фіксації мазок сушать на повітрі. По товстому краю простим олівцем або голкою наносять дату виготовлення, інвентарний номер або кличку тварини. Після висушування мазок фіксують шляхом занурювання в одну з перерахованих речовин: метиловий спирт або ацетон – на 5 хв, абсолютний етиловий спирт чи суміш спирт-ефіру порівну – 15 – 20 хвилин.

У лабораторіях ветеринарної медицини для фарбування мазків крові частіше використовують такі методи:

за Романовському – Гімзи. Фіксований препарат кладуть мазком униз на скляний місток у кюветі і наливають під нього робочий розчин фарби (до 1 мл дистильованої води додають дві краплі фабричного розчину фарби Романовського-Гімзи). Фарбування продовжується 15-30 хв, і залежить від навколишньої температури (чим холодніше, тим триваліше фарбування) та якості барвника. На закінчення мазки промивають дистильованою водою і сушать на повітрі.

за Май – Грюнвальдом. На висушений мазок наносять готовий розчин фарби Май – Грюнвальда і витримують 3 – 5 хвилин, потім на 10 – 15 хв. наносять на мазок рівній об’єм дистильованої води та висушують на повітрі (мазок рожево-фіолетового кольору).

За Нохтом. На фіксований мазок наносять барвник (25 мл основного розчина азура ІІ, 20 мл основного розчина єозина калія, 55 мл буферного розчину) на 20 – 45 іноді до 60 хвилин, змивають дистильованою водою та висушують на повітрі (мазок рожево-фіолетового кольору).

За Папангеймом. На фіксований мазок наносять барвник – фіксатор Май – Грюнвальда на 5 хвилин, змивають дистильованою водою після чого наносять азур – єозин (по Романовському – Гімзи або по Нохту) на 15 хвилин знову змивають дистильованою водою та висушують на повітрі (мазок рожево-фіолетового кольору).