Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
для диплома 2.doc
Скачиваний:
1
Добавлен:
01.04.2025
Размер:
404.99 Кб
Скачать

Фитохимический анализ на флавоноиды

1 г высушенного и измельченного сырья и 20 мл этанола помещали в колбу и нагревали на водяной бане до кипения. Колбу встряхивали несколько раз, закрывали пробкой и оставляют на 1 час, периодически перемешивая ее содержимое. Извлечение фильтровали через вату и проводили качественные реакции [12].

Проба Синода (цианидиновая проба)

Использовали две пробирки с одинаковым количеством экстракта, в каждую прибавляли по 3 капли концентрированной кислоты хлороводородной. Затем в одну из пробирок добавляли несколько крупинок магния. Обе пробирки нагревали на водяной бане до кипения и оставляли на 10 минут. При наличии в извлечении флавоноидов в пробирке с магнием появляется оранжевое или ярко-красное окрашивание. Если в экстракте присутствуют антоцианы, халконы, ауроны и катехины, то вследствие образования оксониевых солей они дают окраску с концентрированной кислотой без добавления металлического магния [29].

Флавоны обычно дают неяркие оранжево-красные окраски, флавонолы и флаваноны развивают глубокую розовую, алую или малиновую окраску.

Окрашивание развивается вследствие того, что происходит восстановление флавонов и флавонолов до антоцианидинов, которые в кислой среде образуют окрашенные оксониевые соли [29].

Проба с 1 %-ным спиртовым раствором хлорида алюминия.

К 0,5 мл спиртового извлечения добавляли несколько капель реактива. Флавоноиды образуют желтое (желто-зеленое) окрашивание [12].

Реакция со щелочью

К 0,5 мл спиртового извлечения добавляли несколько капель 10 % спиртового раствора щелочи. Флавоны и флавонолы растворяются в щелочах с образованием желтой окраски. Халконы и ауроны сразу же образуют со щелочами красные или пурпурны растворы [12].

Проба с 0,5 %-ным спиртовым раствором железа хлорида

К 0,5 мл спиртового извлечения добавляли несколько капель 0,5 % спиртового раствора железа хлорида. Ортодиоксифенольные группы в молекулах флавоноидов обуславливают зеленую, а триоксифенольные группы в рядовом положении - синюю окраску [12].

Реакция с раствором основного ацетата свинца

К 1 мл извлечения добавляют 3–5 капель 2 %-ного основного ацетата свинца. Появление желто-оранжевого окрашивания свидетельствует о наличии флавоноидов [29].

Борно-лимонная реакция

К 0,5 мл спиртового извлечения добавляли каплю лимонной кислоты и несколько капель борной. 5-оксифлавоны и 5-оксифлаванолы взаимодействуют с борной кислотой в присутствии лимонной (или щавелевой), образуя ярко-желтое окрашивание с желто-зеленой флуоресценцией [12].

Реакция с раствором аммиака

К 0,5 мл спиртового извлечения добавляли несколько капель раствора аммиака. Флавоны, флаваноны, флавонолы и флаванонолы дают желтое окрашивание при нагревании переходящее в оранжевое или красное. Халконы и ауроны тотчас же дают красное или пурпурное окрашивание. Чистые катехины окрашивания не дают, однако присутствие даже в небольшом количестве примесей (продуктов окисления) вызывает появление желтой окраски. Антоцианы в присутствии аммиака или карбоната натрия дают синее или фиолетовое окрашивание [12].

Реакция с 1 %-ным раствором ванилина в кислоте хлороводородной концентрированной

К 0,5 мл спиртового извлечения добавляли несколько капель 1% раствора ванилина в кислоте хлороводородной концентрированной. Катехины образуют красно-малиновое окрашивание (производные флороглюцина и резорцина) [12].