Фитохимический анализ на сапонины

Для качественных реакций готовили водный настой 1:10, нагревая измельченное сырье на водяной бане в течение 10 минут. Настой после охлаждения фильтровали и проводили с ним качественные реакции [29].

1. Реакции, основанные на физических свойствах

а) реакция пенообразования

Использовали две пробирки, в одну приливали 5 мл 0,1 н кислоты хлороводородной, а в другую – 5 мл 0,1 н щелочи. Затем в обе пробирки добавляли по 2–3 капли извлечения. При наличии в сырье тритерпеновых сапонинов в обеих пробирках должна образовываться пена, равная по объему и стойкости. Если сырье содержит сапонины стероидной группы, то в щелочной среде образуется пена в несколько раз больше по объему и по стойкости [29].

1. Реакции, основанные на химических свойствах сапонинов

а) к 2 мл водного настоя в пробирке прибавляли несколько капель ацетата свинца. Тритерпеновые сапонины осаждаются средним ацетатом свинца, а стероидные – основным [29].

б) реакция Лафона. К 2 мл водного настоя прибавляли 1 мл кислоты серной концентрированной, 1 мл этилового спирта и 1 каплю 10 % раствора сернокислого железа. При наличии в исследуемом извлечении сапонинов, после нагревания, появляется сине-зеленое окрашивание [29].

3. Фитохимический анализ на простые фенолы

Измельченное сырье в количестве 0,5 г кипятили с 10 мл воды в течение 3 минут и фильтровали через бумажный фильтр [29].

1. К 1 мл фильтрата прибавляли 4 мл раствора аммиака и по каплям 1 мл 10 % раствора натрия фосфорномолибденовокислого в кислоте хлороводородной; при наличии в извлечении простых фенолов появляется синее окрашивание [29].

2. К 1 мл фильтрата прибавляли небольшой кристаллик сульфата закисного железа; если присутствуют простые фенолы – красновато-фиолетовое, затем темно-фиолетовое окрашивание и темно-фиолетовый осадок (арбутин) [29].

3. К 2–3 мл фильтрата прибавляли 2–3 капли раствора железоаммониевых квасцов. Появление черно-синего окрашивания и осадка свидетельствовует о наличии простых фенолов и дубильных веществ [29].

Фитохимический анализ на антраценпроизводные

Реакция Борнтрегера

Реакция основана на способности окисленных форм антрацена давать вишнево-красное окрашивание со щелочью и аммиаком [29].

0,5 г измельченного сырья кипятили в течение 5 мин. в колбе вместимостью 50 мл с 10 мл 10 % раствора щелочи. При этом происходит щелочной гидролиз антрагликозидов, окисление восстановленных форм и взаимодействие агликонов со щелочью с образованием красного окрашивания (антрахиноляты). В случае присутствия в растениях дубильных веществ, флавоноидов и пигментов извлечение может быть не красным, а бурым. К извлечению прибавляли 10 мл воды и фильтровали через вату в делительную воронку вместимостью 100 мл. Фильтрат подкисляли 10 % раствором хлористоводородной кислоты до слабо кислой реакции по лакмусу. При этом должно наблюдаться исчезновение красного окрашивания, раствор становится мутным за счет выпадения в осадок агликонов антрахинонов, нерастворимых в воде. Затем прибавляли 10 мл хлороформа и содержимое делительной воронки взбалтывали. Агликоны растворяются в хлороформе, окрашивая его в желтый цвет. 3 мл хлороформного извлечения встряхивали в пробирке с равным объемом аммиака. При наличии антраценпроизводных аммиачный слой окрашивается в вишнево-красный цвет (за счет эмодина), а хлороформный слой остается окрашенным в желтый цвет (за счет хризофанола) [29].

Реакция с 1 % cпиртовым раствором ацетата магния

Реакция основана на способности антраценпроизводных давать окрашенные комплексы с ацетатом магния; при этом 1,2- диоксипроизводные образуют фиолетовое окрашивание; 1,4 – пурпурное; 1,6- и 1,8 – оранжево-красное [29].

1,0 г сырья помещали в колбу вместимостью 50 мл со шлифом, добавляли 10 мл 95 % спирта и нагревали с обратным холодильником на кипящей бане 10 минут. Полученное извлечение охлаждали, фильтровали. К 1 мл спиртового извлечения добавляли несколько капель реактива. Наблюдали за изменением окраски раствора [29].

Микросублимация

Антраценпроизводные легко возгоняются при температуре 100 С и выше. Реакцию проводят в сухой пробирке. В пробирку помещали небольшое количество порошка растительного сырья и нагревали плитке. Антраценпроизводные, возгоняясь, конденсируются на холодных стенках пробирки в виде желтого налета. При воздействии на него 1 капли щелочи последний должен окрашиваться в вишнево-красный цвет [29].