План изучения темы.

1. Микробиологический контроль в аптечных учреждениях.

2. Микрофлора лекарственного сырья и готовых лекарственных средств.

3. Микробиологические исследования лекарственных средств.

После изучения темы студент должен уметь.

1. Проводить микробиологическое исследование готовых лекарственных средств, стерилизуемых в процессе производства.

2. Проводить микробиологическое исследование лекарственных средств, не стерилизуемых в процессе производства.

Дополнительный материал к занятию.

Посев лекарственных средств на стерильность (метод прямого посева). Испытуемый препарат, если необходимо, растворяют в соответствующем растворителе и высевают в количествах, указанных в таблице.

Количество испытуемого препарата для посева в зависимости от объёма содержимого единицу (ампул, флаконов), составляющих серию.

Объём содержимого одной единицы, мл	Объём лекарственного средства для посева, мл	Объём питательной среды
менее 1	весь объём	в 10 раз больше
1-4	1	объёма образца
5-19	2	для
20-100	2-4	посева
более100 *	10

* - Если объём содержимого единицы превышает 100 мл, предпочтительнее использовать метод мембранной фильтрации.

Посевы с тиогликолевой средой инкубируют при температуре от 30 до 35С, а в соево-казеиновой среде или среде Сабуро - от 20 до 250С. Продолжительность инкубации посевов в обеих питательных средах составляет 14 суток. Если во всех посевах роста нет, лекарственный препарат стерилен.

Метод мембранной фильтрации. При определении стерильности лекарственных средств, обладающих антимикробным действием, и лекарственных средств, разлитых в ёмкости больше 100 мл, используют метод мембранной фильтрации. Лекарственное средство фильтруют в асептических условиях через 2 стерильных мембранных фильтра, затем смывают 3-4 порциями по 100 мл физ. раствора. Каждую мембрану стерильными ножницами разрезают пополам, половину помещают в тиогликолевую среду, половину - в жидкую соево-казеиновую среду или среду Сабуро.

Посевы выдерживают в термостате при тех же температурах в течение 7 суток при ежедневном просмотре. Для контроля полноты смывания другую мембрану разрезают пополам и по половине мембраны помещают в питательные среды, куда засевают тест - микробы: Staphylococcus aureus и Candida albicans. Наличие роста этих микробов после инкубации в термостате указывает на полноту смывания. Для контроля стерильности условий фильтрования производят фильтрование растворителя, и фильтры засевают в те же питательные среды.

Испытание на пирогенность проводится путём введения кроликам (3) в краевую вену уха воды или лекарственного средства с измерением ректальной температуры 3 раза с интервалом 1 час. При этом строго соблюдаются условия, исключающие возможность повышения температуры тела кроликов от случайных причин.

Воду или раствор лекарственного вещества считают непирогенным, если после введения ни у одного из 3 подопытных кроликов ни при одном из трех измерений не наблюдалось повышение температуры более чем на 0,6° по сравнению с исходной температурой и в сумме повышение температуры у 3 кроликов не превышало 1,4°. Если у одного или 2 кроликов температура повысилась более чем на 0,6° и в сумме у 3 кроликов повышение температуры составляет более 1,4°, испытание повторяют дополнительно на 5 кроликах; воду или раствор считают непирогенными, если не более чем 3 всех 8 кроликов наблюдалось индивидуальное повышение температуры на 0,6° и более и общая сумма повышений температуры у всех 8 кроликов не превышала 3,7°.

О пирогенности подробнее см. раздел «Инфекция».