Расчёт результатов

Рассчитывают выход гликогена (в пересчёте на сухое вещество дрожжей).

Х = а∙2·100 / в, %

где а – количество гликогена, г;

2 – коэффициент пересчета;

100 – множитель перевода в проценты;

в – навеска дрожжей, г.

Растворяют на предметном стекле небольшую часть гликогена в нескольких каплях воды и добавляют раствор Люголя. Фиксируют окраску, появляющуюся при охлаждении и исчезающую при нагревании.

23.2. ГИДРОЛИЗ ГЛИКОГЕНА

Небольшую часть гликогена гидролизуют и доказывают наличие в его составе глюкозы.

Ход работы

К гликогену добавляют 3-4 мл 10% раствора соляной кислоты и кипятят 15-20 минут. Охлаждают и нейтрализуют смесь 10% раствором гидроксида натрия. Добавляют равный объём Фелинговой жидкости. Смесь нагревают до начала кипения. Образуется красный оксид меди.

23.3. ВЫДЕЛЕНИЕ ГЛИКОГЕНА ИЗ ПЕЧЕНИ

Гликоген содержится практически во всех органах и тканях животных и человека; наибольшее количество обнаружено в печени и мышцах.

Ход работы

0,5 г печени животного помещают в ступку, добавляют 3 мл 5% раствора трихлоруксусной кислоты и растирают пестиком 10 мин. Затем к экстракту добавляют 5 мл дистиллированной воды, суспензию перемешивают и фильтруют через бумажный фильтр, смоченный водой.

Далее проводят опыты как описано в предыдущем опыте.

КОНТРОЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ

1. Что такое гликоген? С какой фракцией крахмала он имеет сходство по строению?

2. Какое строение имеет гликоген?

3. Что служит исходным материалом для синтеза гликогена?

4. В каких случаях расходуется гликоген, для каких нужд организма?

5. Какие конечные и промежуточные продукты распада гликогена известны?

6. Какое влияние оказывает различное содержание гликогена на состояние мышечной ткани при её переработке?

7. В каких количествах содержится гликоген в различных органах?

Лабораторная работа №24. Определение липидов и изучение их свойств

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ: Изучить биологические функции липидов, освоить методы их идентификации.

Теоретические основы занятия

Липидами называют соединения, разнообразные по химической структуре, которым присущи три особенности - они присутствуют в живых тканях, растворимы в органических растворителях и нерастворимы в воде (но возможны исключения, например лизолецитин).

Липиды входят в состав клеточных мембран, выполняя структурную функцию и обусловливая определенную степень проницаемости этих образований для различных веществ. Важна роль липидов как теплорегулятора и амортизатора. К липоидам относятся фосфолипиды, гликолипиды, сульфолипиды, стерины и стериды.

Техника безопасности

1. Все органические растворители: гексан, хлороформ, этанол, диэтиловый эфир - в той или степени ядовиты и огнеопасны, поэтому работать с ним нужно в вытяжном шкафу.

2. Диэтиловый эфир легко воспламеняется, а пары его в воздухе образуют горючие смеси (летучие, температура кипения около 36 С).

3. При выполнении данной работы в лаборатории не должно быть открытого огня.

24.1. Метод тонкослойной хроматографии

Липиды экстрагируют из биологического материала органическими растворителями, разделяют с помощью ТСХ на пластинах с закругленным слоем силикагеля и определяют полуколичественно (по площади пятна).