22.1.Выделение растворимого пектина Ход работы

25 г свежего материала (яблоки, сахарная свекла) растирают с кварцевым песком в фарфоровой ступке до однородной массы, переносят в коническую колбу на 500 мл, заливают 100 мл воды, нагретой до 45 °С (не выше), и выдерживают при периодическом взбалтывании 30 мин при этой же температуре на водяной бане.

Затем колбу плотно закрывают каучуковой пробкой и энергично взбалтывают 15— 20 мин. После этого содержимое колбы центрифугируют при 3000 g в течение 10—15 мин и собирают прозрачный раствор пектина.

22.2. Качественное обнаружение пектиновых веществ (реакция эрлиха) Ход работы

3 г растительного материала нагревают в течение 30 мин с 10—20 объемами 1%-ного раствора серной кислоты в колбе с притертым холодильником при 145°С на масляной бане.

Затем гидролизат смешивают с избыточным количеством карбоната бария и нагревают на кипящей водяной бане в течение 15 мин. Осадки сульфата бария и карбоната бария отфильтровывают и фильтрат упаривают. Раствор обрабатывают активированным углем, фильтруют и смешивают с тремя объемами этилового спирта. Полученный хлопьевидный осадок отфильтровывают, растворяют в воде и смешивают с избытком ацетата свинца. Нагревание на водяной бане при наличии галактуроновой кислоты дает кирпично-красный осадок.

22.3. Экстракция пектина Ход работы

Апельсины (можно также использовать лимоны или грейпфруты) разрезают пополам и отделяют от кожицы. Кожуру (50 г) режут на ломтики толщиной 2 мм помещают в четырехлитровый сосуд с 250 мл кипящей воды, приливают около 1 мл концентрированной соляной кислоты (уд. вес 1,19) до рН 2,2 ± 0,1 и, чтобы обеспечить фильтрование, прибавляют 2 г бумажной массы.

Смесь нагревают при перемешивании в течении 30 мин. при 95-100⁰, чтобы обеспечить фильтрование, прибавляют 4 г кизельгура и фильтруют отсасыванием через холст, покрытый слоем кизельгура.

Остаток на фильтре промывают 50 мл кипящей воды. Фильтрат и промывную воду объединяют и быстро охлаждают до температуры ниже 25⁰С, чтобы свести к минимуму тепловое разрушение пектина.

К охлажденному раствору пектина прибавляют 1,5 объема этанола (можно использовать изопропиловый спирт или ацетон), содержащего 0,2 мл концентрированной соляной кислоты (уд. вес 1,19) на 100 мл.

Смесь перемешивают вручную медленно и тщательно и оставляют стоять на 30 мин с тем, чтобы пектин всплыл на поверхность. Осадок отфильтровывают через марлю и отжимают.

Образовавшийся на фильтре ком переносят в 2 объема 50%-ного спирта, растирают, тщательно перемешивают и снова отжимают на ткани. Трех промывок обычно бывает достаточно, чтобы удалить большую часть соляной кислоты и зольных веществ.

22.4. Приготовление пектиновой кислоты Ход работы

Сухой измельченный пектин (10 г), смачивают 95%-ным спиртом, чтобы предупредить образование комков, и быстро при сильном перемешивании прибавляют 1 л воды с температурой 25⁰ перемешивание продолжают ~10 мин до полного растворения.

Затем приливают ~60 мл 1н раствора едкого натра до рН 12, и поддерживают это значение рН в течение 1 часа. Из образовавшегося раствора пектана натрия осаждают пектовую кислоту, прибавляя по каплям до рН 1,5 ~10 мл соляной кислотыс уд. весом 1,19 г/см³ при сильном перемешивании смеси.

Гель пектовой кислоты отжимают на ткани, измельчают, растирая с 2 объемами 50%-ного спирта, и тщательно перемешивают. Пектовую кислоту снова отжимают на ткани и повторяют подобную промывку 50%-ным спиртом обычно 3-4 раза, пока промывной раствор не будет давать отрицательную реакцию с нитратом серебра на хлорид-ион.

После этого волокнистую пектовую кислоту растирают с 2 объемами 95%-ного спирта, перемешивают, отфильтровывают через ткань, отжимают, измельчают и сушат.