Рекомендации к составлению протокола

Зависимость активности амилазы от рН среды представить графически, откладывая по оси абсцисс значение рН среды, при котором проводился гидролиз крахмала, а по оси ординат — время в минутах, необходимое для гидролиза крахмала до стадии эритродекстрина. Сделать вывод, при каком значении рН оптимум действия фермента.

15.4. Влияние рн среды на активность каталазы Ход работы

Три кусочка картофеля (1 см³) немного раздробить пинцетом, положить в чашки Петри. Лакмусовой бумагой определить рН сока картофеля, 5% раствора гидроксида натрия и 5% соляной кислоты.

На первый кусочек картофеля наносим несколько капель 3% пероксода водорода. Наблюдаем образование газа.

На второй кусочек капнем 5% гидроксида натрия, подождём 1мин и затем капнем пероксида водорода. Что наблюдаем?

Третий кусочек картофеля обрабатывается несколькими каплями 5% соляной кислоты и пероксида водорода также как второй – гидроксидом натрия.

Результаты сравниваются в соответствии с показателями рН.

Сделать выводы.

Аналогичный опыт можно проделать с кусочками сырого мяса.

Контрольные вопросы

1. Кинетика ферментативных реакций.

2. Каково оптимальное значение рН среды для ферментативной активности ферментов?

3. Как определить изменение активности амилазы под влиянием рН?

4. Характеристика оптимальных рН и её параметры для амилазы солода и слюны.

5. Каковы физико-химические основы влияния оптимальной рН на активность ферментов?

6. Каковы физико-химические основы влияния на активность ферментов сдвига рН от зоны оптимума в любую сторону?

7. Практическое применение знаний о влиянии рН на скорость ферментативных реакций и процессов.

Лабораторная работа №16.

СПЕЦИФИЧНОСТЬ ДЕЙСТВИЯ ФЕРМЕНТОВ.

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ: изучить специфичность действия ферментов.

ТЕОРЕТИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ ЗАНЯТИЯ

Специфичность действия ферментов – это способность катализировать одну или несколько близких реакций, преобразовывать одно вещество или один вид связей. Специфичность ферментов бывает нескольких видов: абсолютная, относительная (групповая), стереохимическая.

16.1. СРАВНЕНИЕ ДЕЙСТВИЯ НЕОРГАНИЧЕСКИХ КАТАЛИЗАТОРОВ И ФЕРМЕНТОВ

Главное отличие ферментов от катализаторов неорганической природы состоит в исключительно высокой каталитической активности и ярко выраженной специфичности действия в условиях нормальной температуры, рН и давления.

Ход работы

В пять пробирок наливают по 3 мл раствора с массовой долей крахмала 1 %. В первую и пятую добавляют по 1 мл воды, во вторую – 1 мл вытяжки из солода, в третью и четвертую – по 1 мл раствора с массовой долей серной или соляной кислоты 10 %.

Содержимое перемешивают встряхиванием и первые три пробирки ставят в термостат при 37-38 С, а четвертую и пятую – в кипящую водяную баню. Через 20 мин пробирки из термостата и водяной бани убирают, горячие охлаждают до комнатной температуры и в каждой проводят пробы с йодом и пробу Троммера. Расщепление крахмала шло в тех пробирках, где содержимое окрашено в желтые, красные и фиолетовые тона.

Записывают окраску содержимого каждой пробирки и на основании полученных результатов делают вывод о том, какие из исследованных веществ являются катализаторами и при какой температуре происходит их каталитическое действие. Результаты опыта заносят в таблицу 29.

Таблица 29 - Сравнение действия неорганических катализаторов и ферментов

№ пробы	Субстрат, 2 мл	Катализатор, 1 мл	Температура инкубации, ˚С	После инкубации
				Проба с йодом	Проба Троммера
1	Крахмал	Вода	37-38
2	Крахмал	Амилаза	37-38
3	Крахмал	Кислота	37-38
4	Крахмал	Кислота	100
5	Крахмал	Вода	100