Ход работы

Приготовить экстракт картофеля. Разлить его в 4 пробирки по 1 мл и провести опыт в соответствии со следующей схемой.

1. довести до кипения и охладить

2. добавить 10 капель соляной кислоты

3. добавить 15 капель раствора этилендиаминтетраацетата натрия (ЭДТА)

4. добавить 1 мл перекиси водорода

Отметить все изменения и оформите результаты в виде таблицы 24.

Таблица 24 - Определение влияния различных веществ на активность каталазы

Реагенты	Наблюдения	Уравнения реакции
HCI
ЭДТА
Н2О2

14.6. Белки как противоядие для ионов тяжелых металлов

Взаимодействие ионов металлов с белками лежит в основе использования молока как противоядия при отравлении тяжелыми металлами.

Ход работы

В опытную пробирку наливают по 1 мл раствора амилазы, 1 %-го раствора крахмала, 1 %-го раствора ацетата свинца (II) и молока. В контрольную пробирку наливают по 1 мл растворов амилазы, крахмала, ацетата свинца (II) и воды. Пробирки встряхивают и выдерживают 20 минут при температуре 30°С. Добавляют в обе пробирки по 1 капле 1 %-го йода. В обеих пробирках есть ионы Pb²⁺, инактивирующие амилазу. Но в присутствии молока активность амилазы сохраняется, о чем свидетельствует отсутствие синего окрашивания раствора при добавлении йода.

14.7. Воздействие формальдегида на активность амилазы

Формальдегид – высокореакционноспособное карбонильное соединение, способное реагировать с белками, разрушая их структуру. В этом заключается его токсическое действие на организм человека.

Ход работы

В опытную пробирку приливают по 1 мл растворов крахмала, амилазы и 5 %-го формальдегида. В контрольную пробирку приливают по 1 мл раствора крахмала, амилазы и воды. Выдерживают 20 минут при 30 °С. Затем в обе пробирки добавляют по 1 капле 1 %-го раствора йода. Синее окрашивание в пробирке с формальдегидом свидетельствует об инактивации амилазы.

Контрольные вопросы

1. Общая характеристика регуляторов ферментов.

2. Характеристика строения и действия активаторов.

3. Химическая природа и механизм действия ингибиторов.

4. Характеристика аллостерических (ключевых) ферментов и их роли в регуляции процессов метаболизма.

5. Приведите примеры различных активаторов ферментов.

6. Типы ингибирования. Привести примеры.

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА №15.

ЗАВИСИМОСТЬ АКТИВНОСТИ ФЕРМЕНТОВ ОТ рН СРЕДЫ

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ: Изучить влияние рН среды на активность ферментов.

Теоретические основы занятия

Ферменты, подобно всем белковым молекулам несут заряженные группы. Общий заряд белковой молекулы зависит от рН среды. Зависимость скорости ферментативной реакции от величины рН носит колоколообразный характер. Основное количество ферментов проявляют максимальную активность в узком диапазоне рН - оптимум рН. Для большинства из них оптимум рН 7,4, однако для пепсина 1-1,5, для трипсина - 8,6. При очень низких и очень высоких значениях рН ферменты денатурируют.