Активарование и ингибирование ферментов

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ: Изучить влияние активаторов и ингибиторов на активность ферментов.

Теоретические основы занятия

Скорость ферментативной реакции, как и активность фермента, в значительной степени определяется присутствием в среде активаторов. Активирующее влияние на скорость ферментативной реакции указывают разнообразные вещества органической и неорганической природы. Так, соляная кислота активирует действие пепсина желудочного сока. Ингибиторы замедляют ход химической реакции. С ингибированием ферментов связан механизм действия многих токсинов и ядов на организм.

14.1. Активирование и ингибирование амилазы слюны

К химическим соединениям, действующим как активаторы ферментов, относятся многие соли Na⁺, Mg⁺², Mn⁺², Co⁺² и др. Из ингибиторов ферментов известны соли синильной кислоты, угнетающие некоторые «геминовые» ферменты, монойодуксусная кислота, приостанавливающая спиртовое и молочнокислое брожение, фосфорорганические соединения, необратимо инактивирующие ряд эстераз и др.

Ход работы

Слюну разбавляют в 5 раз. Берут три пробирки. В первую наливают 1 мл воды, во вторую - 0,3 мл воды и 0,2 мл 1 % раствора NаСI, в третью - 0,8 мл воды и 0,2 мл 1 % раствора СuSО₄. Во все пробирки добавляют по 1 мл раствора слюны. Содержимое перемешивают и добавляют по 0,5 мл крахмала. Снова перемешивают и ставят в термостат при температуре 37 °С на 5 мин. Затем все пробирки одновременно охлаждают в стакане со льдом. Во все пробирки добавляют раствор йода. По окраске судят о скорости гидролиза крахмала. Результаты работы заносят в таблицу 22 и делают выводы.

Таблица 22 - Активирование и ингибирование фермента

№	Добавленное вещество	Окраска после добавления йода	Вывод
1	Вода
2	NaCI
3	СuSО4

14.2. Ингибирующее действие ионов на дегидрогеназный комплекс картофеля Ход работы

Делают 4 среза на картофелине. Первый срез оставляют для контроля, второй посыпают хлоридом натрия, третий йодидом натрия, четвертый хлоратом калия. Через 20 мин срезы трех половинок темнеют, а один остается без изменения. Сделайте выводы.

14.3. Влияние желчи на активность липазы

Расщепление жиров в кишечнике на глицерин и высшие жирные кислоты совершается главным образом при участии липазы, секретируемой поджелудочной железой, и, в меньшей степени, липазы, выделяемой железами слизистой кишечника.

Для действия липазы на жир необходимо присутствие желчных кислот образующихся в печени. Они вызывают эмульгирование жиров, приводящее к увеличению поверхности соприкосновения жира с липазой. По химической природе желчные кислоты являются производными холановой кислоты:

Холановая кислота

В качестве источника липазы используют вытяжку из поджелудочной железы или препарат панкреатина. Жирные кислоты обнаруживаются титрованием щелочью.