13.4. Установление термолабильности уреазы

Уреаза отличается высокой специфичностью действия, субстратом для нее является мочевина (диамид угольной кислоты). Уреаза содержится, например, в соевой муке.

Ход работы

Для определения берут две пробирки, в обе наливают по 1 мл вытяжки уреазы. Первую пробирку помещают на кипящую баню на 10 мин и охлаждают. Затем в обе пробирки добавляют по 1 мл раствора мочевины и по 1-3 капли фенолфталеина. Оставляют пробирки при комнатной темпера­туре на 5-10 мин. Записывают результат и делают вывод.

Образование аммиака можно обнаружить и другим путем. С этой це­лью повторяют опыт и после термостатирования при 37 °С в реакционную смесь осторожно добавляют равный объем 10% раствора гидроксида на­трия. Выделение аммиака обнаруживают по запаху или по посинению лакмусовой бумажки у отверстия пробирки.

13.5. Влияние температуры на активность пепсина

Пепсин является компонентом желудочного сока.

Ход работы

В четыре пробирки наливают по 2 мл молочноацетатной смеси. Пробирку 1 помещают в кипящую водяную баню; пробирку 2 – в водяную баню при 40ºС; пробирку 3 оставляют при комнатной температуре; пробирку 4 помещают в лед.

Через 10 мин, когда содержимое пробирок примет необходимую температуру, во все пробирки добавляют по 0,1 мл желудочного сока, быстро перемешивают и оставляют в тех же условиях. Наблюдая за моментом появления на стенках пробирок первых сгустков казеина, образующегося из казеиногена под действием пепсина, отмечают оптимальную температуру действия данного фермента.

13.6. Влияние температуры на смещение химичесокого равновесия Ход работы

В пробирку налейте 1 мл 0,5% раствора крахмала и добавьте 1 каплю 0,1 М раствора йода. Нагрейте пробирку на водяной бане и отметьте окраску. Затем эту же пробирку охладите под водой и вновь наблюдайте за изменением окраски. Сделайте выводы.

Знаете ли вы что

В картофеле содержится фермент β-амилаза, превращающая крахмал в мальтозу. При температуре 65 С β-амилаза разрушается. Самый эффективный температурный интервал действия β-амилазы лежит в интервале 35-40 С Если картофель перед варкой залить холодной водой, то в процессе прогревания клубней значительная часть крахмала превращается в мальтозу, которая переходит в отвар, что увеличивает потери питательных веществ. Поэтому картофель при варке рекомендуется погружать в кипящую воду.

Контрольные вопросы

1. Различие в действии ферментов и неорганических катализаторов.

2. Значение ферментов для человека и использование ее возможностей в народном хозяйстве.

3. Мономерная и мультимерная структура молекул ферментов. Изозимы.

4. Современные теории объясняющие механизм действия ферментов.

5. Строение ферментов.

6. Термолабильность ферментов.

7. Перечислите факторы среды, влияющие на активность ферментов (скорость ферментативной реакции).

8. Назовите оптимальные температуры для ферментов животного, растительного и микробного происхождения.

9. Как влияет снижение температуры, от оптимальной до 0˚С и ниже, на скорость ферментативной реакции. Чем можно объяснить влияние этого фактора?

10. Практическое использование знаний о влиянии температуры на активность ферментов.

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА №14.