7.4. Исследование химического состава гликопротеидов

Гликопротеиды - сложные белки, содержащие в качестве простетической группы углеводы и их производные. Из гликопротеидов наиболее распространены муцин и мукоиды, входящие в состав всех тканей и жидкостей. Муцин содержится в слюне и других слизистых выделениях желез, мукоиды - в хрящах, связках и др. Гликопротеиды не растворимы в воде, хорошо растворяются в щелочах, в кислой среде выпадают в осадок.

Ход работы

7.4.1.1. ВЫДЕЛЕНИЕ МУЦИНА ИЗ СЛЮНЫ

В пробирку берут около 2 мл слюны и по каплям прибавляют концентрированную уксусную кислоту (4-5 капель). Образуется сгусток муцина.

7.4.1.2. НАФТОЛОВАЯ ПРОБА НА УГЛЕВОДНЫЙ КОМПОНЕНТ

(реакция Подобедова)

Углеводы муцина обнаруживают нафтоловой пробой (реакция Подобедова-Молиша).

Реакция обусловлена взаимодействием оксиметилфурфурола, образующегося из гексоз под влиянием серной кислоты с -нафтолом. При этом образуется окрашенный продукт конденсации.

Эта реакция дает положительный результат со всеми веществами, в состав которых входят углеводы.

Ход работы

К сгустку муцина добавляют 1-2 капли 1% раствора (спиртового) -нафтола или тимола, перемешивают, а затем по стенке осторожно приливают 1 мл концентрированной серной кислоты. На границе раздела двух слоев жидкостей появляется фиолетово-красное кольцо (хорошо заметно на белом фоне).

7.4.2. ОТКРЫТИЕ УГЛЕВОДНОГО КОМПОНЕНТА В ЯИЧНОМ БЕЛКЕ

В сухую пробирку вносят 5 капель 10% раствора белка и проделывают реакцию Молиша. На дне пробирки появляется красное окрашивание.

7.4.3. ОТКРЫТИЕ УГЛЕВОДНОГО КОМПОНЕНТА В ДЕНАТУРИРОВАННОМ ЯИЧНОМ БЕЛКЕ

А. В пробирку помещают кусочек вареного яичного белка и 3 мл концентрированной соляной кислоты. Осторожно нагревают не доводя до кипения. Белок приобретает фиолетовое окрашивание.

Б. В две пробирки вносят по 1 мл 1% раствора яичного белка. В 1-ю вносят 2-3 капли 0,1% раствора альфа-нафтола, во 2- пробирку 2-3 капли 1% раствора тимола. Содержимое пробирок перемешивают и осторожно по стенке доливают по 0,5 мл конц. серной кислоты и дают постоять. На границе раздела фаз в 1-й пробирке появляется фиолетовое кольцо, во 2-й пробирке – красное кольцо.

7.5. Исследование химического состава фосфопротеидов

Фосфопротеины состоят из простого белка и фосфорной кислоты в качестве простетической группы. Фосфорная кислота соединена с остатками оксиаминокислот (серии, треонин) белковой части по типу сложных эфиров. К фосфопротеинам относится казеин молока, ововителлин яичного желтка и др. Они являются питательным материалом. Вместе с аминокислотами фосфопротеины доставляют необходимую для организма фосфорную кислоту. Фосфорная кислота особенно важна для развития скелета и зубов растущих организмов.

7.5.1. Выделение казеина из молока

В молоке казеин содержится в виде растворимой кальциевой соли. При подкислении казеинат кальция разлагается и выпадает в осадок в свободном виде. Избыток кислоты мешает осаждению, т.к. при рН ниже изоэлектрической точки (изоэлектрическая точка казеина рН = 4,7) молекула белка перезаряжается, и казеин вновь переходит в раствор.