
- •Правила организации и оборудования микробиологической лаборатории (техника безопасности). Морфология эукариотов (грибы)
- •Оборудование рабочего места бактериолога На рабочем столе должно быть все необходимое для работы:
- •Внимательно прочитать!
- •За несоблюдение правил охраны труда и пожарной безопасности студент отстраняется от занятия!
- •Убавить яркость лампы до минимума вращением рукоятки регулирования яркости горения!
- •Выключить лампу, установив выключатель микроскопа в положение «0».
- •Морфологические особенности грибов
- •Морфология грибов и методы их изучения
- •Методы изучения
- •Типы микроскопов и принципы микроскопии; правила работы с микроскопом при использовании иммерсионной системы
- •Световой микроскоп состоит из:
- •Системы микроскопии
- •Р езультат:
- •Структурные компоненты бактериальной клетки, их функции методы выявления:
- •Техника приготовления препаратов-мазков, их фиксация и окраска
- •Методы фиксации
- •Методы окраски
- •Исследование микроорганизмов в живом состоянии для изучения форм и подвижности. Техника приготовления препаратов «висячая» и «раздавленная» капли
- •Сравнительная характеристика эукариотической и прокариотической клетки
- •Основные формы бактерий
- •Классификация патогенных микроорганизмов
- •Методы выявления актиномицет
- •Методы выявления спирохет (трепонем, боррелий, лептоспир)
- •Методы выявления микоплазм
- •Хламидии (морфология, жизненный цикл хламидий).
- •Методы выявления хламидий
- •Методы выявления риккетсий
- •Взаимодействие бактериофага с оболочкой бактерии
- •Питательные среды (состав некоторых питательных сред)
- •Дифференциально-диагностические среды.
- •1. Пс для культивирования и изучения биохимических свойств.
- •2. Коммерческие наборы – для изучения биохимических свойств (определение набора ферментов микроорганизмов для их идентификации).
- •4. Пс для изучения сахаролитических свойств:
- •5. Пс для изучения протеолитических свойств:
- •Техника посева на жидкие и плотные питательные среды
- •Метод Дригальского
- •Методы, основанные на биологических свойствах микроорганизмов
- •Работа № 5. Биохимическая активность аэробов (дифференциально-диагностические признаки)
- •3 Этап
- •4 Этап
- •1) Что изображено на схеме?
- •1)Куриный эмбрион
- •2) Культура тканей
- •3) Лабораторные животные
- •Физические методы. Методы основаны на выращивании микроорганизмов в среде без воздуха
- •Химические методы основаны на поглощении кислорода воздуха в герметически закрытом сосуде (анаэростате, эксикаторе) такими веществами, как пирогаллол или гидросульфит натрия
- •3) Биологические методы основаны на совместном выращивании анаэробов со строгими аэробами (метод Фортнера)
- •Комбинированные методы основаны на сочетании физических, химических и биологических методов создания анаэробиоза
4. Пс для изучения сахаролитических свойств:
Среды Гисса с углеводами (глюкоза, лактоза, сахароза, арабиноза и другие) в которых выявляют ферментативную активности микроорганизмов. Под действием образующейся при расщеплении углевода кислоты индикатор изменяет окраску среды. Соломенно-желтого цвета среда при положительной реакции меняет цвет на красный или интенсивно розовый, поэтому эти среды названы «пестрый ряд». Микробы, не ферментирующие данный углевод, растут на среде, не изменяя ее цвета. Наличие газа устанавливают по образованию пузырьков в средах с агаром или по скоплению его в «поплавке» на жидких средах.
Пептон - 10 г, хлорид натрия - 5 г, углевод - 10 г, реактив Андреде (фуксин)- 10 мл, вода дистиллированная до 1000 мл, рН после стерилизации 7,2-7,4.
5. Пс для изучения протеолитических свойств:
Среды с желатином. В некоторых бактериях (холерный вибрион, стафилококк, сибиреязвенная палочка и т. д.) протеолитические ферменты выявляются путем разжижения желатины.
Среды с молоком. Микроорганизмы, расщепляющие казеин (молочный белок), вызывают пептонизацию молока - оно приобретает вид молочной сыворотки.
Среды с пептоном. При расщеплении пептонов могут выделяться индол, сероводород, аммиак. Их образования определяют с помощью индикаторных бумажек. Фильтровальную бумагу заранее пропитывают определенными растворами, высушивают, нарезают полосками и, после посева культуры на МПБ, помещают под пробку между нею и стенкой пробирки. После инкубации в термостате учитывают результат. Аммиак вызывает посинение лакмусовой бумажки; при выделении сероводорода на бумажке, пропитанной раствором, содержащим ацетат свинца, бикарбонат натрия, происходит образование сульфата свинца - бумажка чернеет; индол вызывает покраснение бумажки, пропитанной горячим насыщенным раствором щавелевой кислоты.
Работа № 2. Характер роста бактерий на питательных средах
(культуральные свойства)
Цель: изучить характер роста бактерий на плотной питательной среде - МПА.
Самостоятельная работа: описать культуральные свойства колоний, выросших на МПА, результаты внести в таблицу
критерии |
описание |
колонии |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Вывод:
__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________
Теоретическая справка
Работа № 2
Микроорганизмам как всему живому присущи три основные физиологические функции: питание, дыхание и размножение.
Питание необходимо для синтеза в клетке всех органических структур, оно осуществляется с поглощением энергии. Основным источником энергии являются окислительно-восстановительные процессы (дыхание). По типу питания микробы делятся на аутотрофов и гетеротрофов. Аутотрофы усваивают азот и углерод из неорганических веществ (углекислый газ и др.), а гетеротрофы- из сложных органических соединений (аминокислоты, моносахара и др.), синтезированных ранее другими живыми организмами. Гетеротрофы в свою очередь делятся на сапрофитов и паразитов. Сапрофиты нуждаются в органических соединениях мертвого субстрата, а паразиты получают питательные вещества в организме-хозяине. Паразиты могут быть облигатными (внутриклеточными) и факультативными. Облигатные внутриклеточные паразиты (хламидии) лишены способности жить и размножаться вне клеток хозяина, т.к. зависят от их метаболизма. Факультативные паразиты (гонококки, стафилококки и др.) могут питаться как в организме, так и вне его, поскольку обеспечены автономными ферментными системами при образовании веществ и энергии.
Колония – видимое невооруженным взглядом скопление микробов на плотной питательной среде, выросшее из одной клетки.
Колония - это потомство микробов, выросших из одной клетки. Т.к. все микробы в колонии выросли из одной клетки, они относятся к одному виду, т.е. в каждой изолированной колонии (отдельно стоящей, не сливающейся с другими колониями) содержится чистая культура.
Чистая культура – популяция микроорганизмов, состоящая из особей одного вида.
Работа № 3. Характер роста микроорганизмов на жидких питательных средах
Цель: изучить характер роста бактерий на жидких питательных средах; изучить особенности роста микроорганизмов
Самостоятельная работ: описать характер роста на жидкой питательной среде
Опыт № 1 Опыт № 2 Опыт № 3
МПБ МПБ 1% пептонная вода
(кишечная палочка) (возбудитель сибирской язвы) (возбудитель холеры)
Характер
роста: _________________ __________________ ___________________
Вывод:
_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Теоретическая справка
Работа № 3
Дыхание микроорганизмов – биологическое окисление субстрата с выделением необходимой для метаболизма энергии. По типу дыхания микроорганизмы делятся на 3 основные группы: аэробы могут жить только в присутствии кислорода (холерный вибрион); факультативные анаэробы могут жить при любом процентном содержании кислорода и без него (кишечная палочка); анаэробы (облигатные) – только в отсутствие кислорода (возбудители газовой гангрены). При культивировании облигатных анаэробов требуется создание особых условий анаэробиоза. При этом используют особые приборы и среды (анаэростат, эксикатор, среды тиогликолиевая, Вильсона-Блер).
Работа № 4. Техника посева на питательные среды
Цель: ознакомиться с техникой посева на жидкие и плотные питательные среды и указать значение метода (см. теоретическую справку).
Самостоятельная работа: рассмотреть готовые демонстрационные посевы, зарисовать и указать назначение каждой техники посева.
название |
рисунок |
значение |
|
|
|
Дригальскому |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Вывод:
________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Теоретическая справка
Работа № 4