Раздел 4. Основные распознающие и эффекторные молекулы иммунной системы Тема. 11. Реакции антиген-антитело как инструмент исследований в биологии

Занятие 2. Методы, основанные на реакциях агглютинации, нейтрализации, комплемент-зависимого лизиса и их применение в биологии (форма проведения - семинар с элементами практического занятия, включающего демонстрацию результатов реакций, подсчет зон локального гемолиза в геле на готовых и фиксированных препаратах)

Вопросы к теме:

1. Реакция агглютинации. Классификация вариантов реакции агглютинации, их чувствительность.

2. Реакция агглютинации бактерий, использование в микробиологии.

3. Реакция активной, пассивной, непрямой гемагглютинации. Области применения и чувствительность. Реакция торможения гемагглютинации и реакция торможения непрямой и пассивной гемагглютинации. Антиглобулиновая проба Кумбса. Реакция латекс-агглютинации. Тест с восстанавливающими агентами (2-меркаптоэтанол) для оценки классов образующихся антител.

4. Реакция нейтрализации. Области применения.

5. Реакции комплемент-зависимого лизиса. Их классификация. Реакция иммунного гемолиза, ее использование для определения общей (гемолитической) активности белков системы комплемента, титра гемолизинов (антител).

6. Реакция связывания комплемента. Принцип и области применения.

7. Метод локального иммунного гемолиза в геле агарозы для определения числа антителообразующих клеток. Варианты активного, пассивного, непрямого и реверсионнного гемолиза.

Раздел 4. Основные распознающие и эффекторные молекулы иммунной системы Тема. 11. Реакции антиген-антитело как инструмент исследований в биологии

Занятие 3. Методы, основанные на использовании меченных изотопами, ферментами, люминисцентными красителями, коллоидным золотом и другими агентами антигенов и антител (форма проведения - семинар с демонстрацией основных принципов рассматриваемых реакций, отдельных компонентов оборудования для их проведения, компьютерного анализа результатов)

Вопросы к теме:

1. Методы, основанные на использовании меченных изотопами, ферментами, люминисцентными красителями, коллоидным золотом и другими агентами антигенов и антител. Их классификация и чувствительность.

2. Конкурентный анализ в жидкой фазе на примере радиоиммунного конкурентного анализа в жидкой фазе (РИА), применение в биологии.

3. Твердофазный иммуноанализ на примере твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA), применение в биологии.

4. Иммуноблоттинг.

5. Методы анализа антигенов клеточной поверхности. Прямая и непрямая иммунофлюоресценция. Проточная лазерная цитометрия. Иммуноферментные варианты иммуноцитохимического и иммуногистохимического окрашивания. Иммуноцитохимическое окрашивание в электронной микроскопии. Реакция комплементзависимого цитолиза.

6. Понятие о моноклональных антителах и гибридомной биотехнологии.

Раздел 7. Планирование иммунологических экспериментов и исследований

Тема 15. Основные методические подходы к оценке воздействия различных факторов на иммунную систему животных и человека

Занятие 4. Основные методические подходы к оценке воздействия различных факторов на иммунную систему животных и человека (форма проведения - семинар с демонстрацией отдельных элементов рассматриваемых методических подходов)

Вопросы к теме:

1. Основные методические подходы к оценке воздействия различных факторов на иммунную систему в эксперименте на животных.

2. Методы интегральной оценки функций иммунной системы мышей и других лабораторных млекопитающих. Оценка выраженности гуморального иммунного ответа (по числу антителообразующих клеток и титру антител), реакции гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ). Зависимость выраженности антителообразования и ГЗТ от дозы и способа введения антигена (на примере эритроцитов барана). Оценка клеточности и клеточного состава органов лимфомиелоидного комплекса.

3. Реакция трансплантат против хозяина и хозяин против трансплантата, их моделирование на мышах.

4. Оценка функций фагоцитирующих клеток.

5. Методы оценки стволовых кроветворных клеток. Моделирование в эксперименте процессов антигенезависимой и антигензависимой дифференцировки иммунокомпетентных клеток, их взаимодействия при иммунном ответе. Полимеразная цепная реакция и другие молекулярно-биологические методы в экспериментальной иммунологии.

6. Особенности оценки функций иммунной системы человека.