
- •Методические рекомендации для студентов по подготовке к лабораторным работам Лабораторная работа № 1
- •Микробиологическая лаборатория
- •2. Подготовка микробиологической лаборатории к работе
- •Правила работы в микробиологической лаборатории
- •Ведение лабораторных записей
- •Аппараты, приборы, посуда и инвентарь
- •Основные принципы метода электронной микроскопии
- •I. Основные принципы метода электронной микроскопии
- •Различные приемы подготовки к исследованию
- •Электронный микроскоп высокого напряжения
- •Задания для выполнения Задание 1. Ознакомиться с внешним видом и ультраструктурой эукариотных клеток.
- •2. Рассмотрите электронную микрофотографию клеточной стенки растительной клетки (рис.2).Обратите внимание на наличие различных слоев, а также каналоподобных структур в клеточной стенке растений.
- •Задание 2. Ознакомиться с внешним видом и особенностями ультраструктуры прокариотных клеток.
- •Лабораторная работа № 3 изучение морфологии и биологии возбудителей молочнокислого брожения
- •1. Некоторые сведения о морфологии бактерий
- •Краткая характеристика молочнокислых бактерий
- •2. Практическое использование молочнокислых бактерий
- •Ход работы
- •1. Приготовление препарата молочнокислых бактерий
- •2. Определение кислотности молока
- •Лабораторная работа №4 изучение морфологии и биологии возбудителей спиртового брожения. Дрожжи как основной объект биотехнологии.
- •Морфологические признаки дрожжей
- •Культуральные признаки дрожжей
- •Ход работы:
- •Лабораторная работа №5 изучение строения и биологии плесневых грибов как объекта биотехнологии
- •1.1. Систематика грибов:
- •Высшие грибы.
- •Низшие грибы.
- •2 Приготовление препаратов плесневых грибов и их изучение.
- •Ход работы
- •Задание
- •Лабораторная работа №6 биология бактерий р.Clostridium как важнейшего продуцента биотехнологии
- •1. Понятие о маслянокислом брожении
- •2. Культуральные и морфологические признаки клостридиев
- •3. Роль в природе
- •4. Использование клостридиев в биотехнологии
- •5. Ход работы
- •1. Выращивание маслянокислых микроорганизмов
- •2. Микроскопирование маслянокислых микроорганизмов.
- •3. Качественные реакции на масляную кислоту.
- •3.1. Получение маслянокислого железа
- •3.2. Получение масляноэтилового эфира
- •Лабораторная работа №7 изучение строения и биологии актиномицетов как объекта биотехнологии
- •Ход работы
- •Лабораторная работа №8 биология водорослей как объекта биотехнологии
- •Основные признаки и систематика водорослей.
- •Краткая характеристика основных групп (отделов) водорослей и их отдельных представителей.
- •Практическое использование водорослей.
- •IV. Задание для выполнения
- •Лабораторная работа № 9
- •Ход работы
2. Определение кислотности молока
Оборудование и материалы: Молоко, цилиндр 25 мл, бюретка, 0.1 н. раствор едкого натра, 1%-ный спиртовой раствор фенолфталеина, коническая колба
Определение кислотности молока имеет большое практическое значение для оценки его свежести. Свежее молоко связывает небольшое количество щелочи. Это зависит от наличия в нем белков и однозамещенных фосфорнокислых солей, обладающих слабокислыми свойствами. Спустя некоторое время титруемая кислотность молока повышается.так как начинают развиваться микроорганизмы, которые сбраживают лактозу до молочной кислоты.
Кислотность молока выражается в условных градусах или градусах Тернера и обозначают 0Т. Под 1 градусом подразумевается количество миллилитров децинормального раствора щелочи, идущее на нейтрализацию 100мл исследуемого молока.
Оценка свежести молока
Таблица 1
Титруемая кислотность, 0Т |
Характеристика молока |
Менее 16 |
Молоко от больного животного или разбавленного водой. |
16-20 |
Свежее, нормальное молоко. |
20-23 |
Молоко несвежее и не допускается в переработку. |
24-26 |
Кислотность чувствуется на вкус, использовать нельзя. |
26-35 |
Свертывается при кипячении, использовать нельзя. |
60 и более |
Самопроизвольное свертывание. |
В коническую колбу на 100-150мл отмеривается 10 мл исследуемого молока, добавляется 20 мл дистиллированной воды и 3 капли фенолфталеина. Содержимое колбы тщательно взбалтывают и титруют из бюретки 0.1 н. раствором щелочи до появления не исчезающего в течение двух минут слабого розового окрашивания.
Титрование повторяют еще раз. Полученные результаты усредняют. Количество пошедшей на титрование щелочи, умноженное на 10 (пересчет на 100 мл) и будет показывать кислотность данного молока в градусах.
Пример: 2.2 * 10 = 22.00T - кислотность молока в градусах, если на титрование 10 мл молока пошло 2.2 мл щелочи.
Лабораторная работа №4 изучение морфологии и биологии возбудителей спиртового брожения. Дрожжи как основной объект биотехнологии.
Дрожжи являются одними из самых распространенных микроорганизмов. Они встречаются в верхних слоях почвы, в пыли, ягодах и цветах, во многих растениях. Иногда дрожжей так много, что они образуют налет сероватого цвета, видимый невооруженным глазом. Дрожжей много в почве садов и виноградников. Дрожжи распространяют пчелы, осы и другие насекомые, а также ветер. Попадая в благоприятную среду, дрожжи размножаются с удивительной быстротой. В течение всей истории цивилизации дрожжи постоянно находились в сфере деятельности человека и часто напоминали о себе, вызывая процессы брожения различных продуктов.
Cвязь спиртового брожения с жизнедеятельностью дрожжей была отмечена еще в начале ХIХ века, но окончательно была установлена Пастером 1857 г.
Дрожжи - аэробы с хорошо сформированным аппаратом дыхания, но в анаэробных условиях осуществляют спиртовое брожение по гликолитическому пути: они окисляют глюкозу до пировиноградной кислоты, затем происходит ее декарбоксилирование (превращение в уксусный альдегид), а затем восстановление уксусного альдегида в этиловый спирт.
Наряду с главными продуктами брожения (этиловым спиртом и углекислым газом) в небольшом количестве образуются побочные продукты: глицерин, уксусной альдегид, уксусная и янтарная кислоты, сивушные масла - смесь высших спиртов (изоамилового, изобутилового, амилового, н-пропионового и др.). Высшие спирты участвуют в формировании аромата и вкуса напитков спиртового брожения.
Дрожжи являются одним из ведущих биологических агентов традиционной биотехнологии. С их помощью получают этанол, различные ферменты, полисахариды, витамины. Биомассы дрожжевых клеток богата белками.
Дрожжи Saccharomyces, Cerevisiae с древнейших времен использовали в пивоварении и хлебопечении. Они сбраживают глюкозу до этилового спирта с выделением СО2. Дрожжи лишены экзоферментов и поэтому не могут использовать полисахариды (крахмал) и белки в качестве источников углерода и энергии.
Дрожжи рода Candida способны утилизировать н-алканы, что позволяет не только выращивать их на дешевых отходах нефтяной промышленности для получения биомассы, но и использовать их для биологической очистки нефтяных загрязнений воды и почвы.
Среди дрожжей имеются патогенные формы, вызывающие заболевания растений, животных и человека.
ОСНОВНЫЕ ПРИЗНАКИ ДРОЖЖЕЙ
Дрожжи отличаются от бактерий относительно большими размерами, относительно большими размерами, отсутствием подвижности и наличием дифференцированного ядра. В фазе роста они представляют собой одноклеточные эукариотные организмы, вегетативно размножаающиеся почкованием или делением. Вместе с тем известны дрожжи, которые в определенных условиях образуют мицелевидные структуры.