2 Курс , 4 семестр Тема «энзимодиагностика» занятие № 3.

1. Характеристика ферментов, присутствующих в плазме крови.

2. Причины гипо- и гиперферментемий.

3. Характеристика отдельных ферментов, имеющих значение для энзимодиагностики.

4. Общие правила работы с ферментами. Требования к биологическому материалу для работы с ферментами.

Домашняя работа: дать характеристику ферментов: АЛТ, АСТ, ЛДГ, КК, α-амилазы, ЩФ, КФ, ХЭ, γ-ГТП, липазы в форме таблицы:

№ п/п	Название фермента	Катализируемая реакция	Тканевая локализация, изоферменты	Диагностическое значение

Темы рефератов: 1) Энзимодиагностика функционального состояния печени.

2) Энзимодиагностика сердечно-сосудистой системы. Лабораторные работы, выполняемые на занятии: опредление активности α-ами-лазы в моче и плазме крови методом Каравея, определение активности α-амилазы в моче методом Вольгемута. На занятии студенты пишут обучающий тест, решают ситуационные задачи.

Отделение «Лабораторная диагностика», 2 курс, 4 семестр. Тема: «Энзимодиагностика»

Методическое пособие для самоподготовки студентов Общие правила работы с ферментами. Требования к биологическому материалу при определении активности ферментов.

1. Преаналитический этап.

1.1. Забор биологического материала. Лабораторные исследования, как правило, проводятся у пациента натощак, утром спустя 10-12 ч после последнего приема пищи. Для исследования активности ферментов чаще всего используется сыворотка или плазма. Для получения сыворотки крови в пробирку берут цельную крови без антикоагулянта. В течение 5-10 мин такая кровь свертывается, т.е. из нее выпадает сгусток фибрина, окрашенный в красный цвет благодаря наличию в нем эритроцитов. Для получения плазмы крови необходимо предотвратить процесс свертывания крови, для чего предварительно в пробирку вносят антикоагулянт (раствор ЭДТА, гепарина, цитрата натрия). При определении активности ферментов в плазме крови следует учитывать, что многие антикоагулянты способны ингибировать энзиматическую активность (например, оксалаты подавляют активность ЛДГ, ЭДТА ингибирует активность кислой и щелочной фосфатаз). Следует учитывать, что гемолиз эритроцитов приводит к повышению активности некоторых ферментов в сыворотке/плазме крови (например, в эритроцитах активность ЛДГ и АЛТ значительно выше их активности в сывортке). Плазму от эритроцитов, а сыворотку от сгустка необходимо отделить не позже, чем через 1 ч после взятия крови.

1.2. Транспортировка и хранение биологического материала. Если выполнение анализа задерживается, либо пробы отправляются в отдаленную лабораторию, то сыворотку/плазму хранят в холодильном контейнере, холодильнике или замораживают при -20^оС. Хранение сыворотки, как правило, сопровождается снижением активности ферментов. Для большинства из них активность не изменяется при комнатной температуре в течение 6-8 ч, при 4^оС – около недели, а в замороженном состоянии – на протяжении одного месяца. Следует четко следовать инструкции по хранению биологического материала для каждого фермента!