1. Назначение, цели и задачи проекта

Предложены способы получения, стандартизации, хранения и использования клеточных трансплантатов из ядросодержащих клеток (ЯСК) костного мозга (КМ) путем их интрамиокардиального, трансэндокардиального, интракоронарного, любого другого внутрисосудистого введения для лечения заболеваний сердца и сосудов: сердечной недостаточности (СН) разной этиологии, ишемической болезни сердца (ИБС), дилатационной кардиомиопатии (ДКМП) и др.

Для получения препаратов ЯСК осуществляется эксфузия костномозговой взвеси (КМВ) путем пункции заднего или переднего гребня подвздошной кости. КМВ подвергают процессингу (обработке) для получения фракций ЯСК (в качестве средства) для применения при различных заболеваниях сердечно-сосудистой системы, сопровождающиеся снижением сократительной функции миокарда. Полученный материал характеризуется, стандартизуется, в ряде случаев замораживается и хранится в жидком азоте.

Данная технология предназначена для применения в медицинских целях врачами: хирургами, кардиохирургами, трансфузиологами, кардиологами. Требования к квалификации врачей-специалистов: знания (повышение квалификации) в области применения клеточных технологий в медицине, иммунологии; опыт работы не менее трех лет по специальности.

Процессинг (обработка и выделение) ЯСК может осуществляться только в культуральной лаборатории, ремонт которой должен соответствовать ОСТ 42-510-98 (GMP) и ОСТ 42-505-96, что должно быть подтверждено документально территориальными органами Санитарно-эпидемиологического надзора. Лаборатория должна быть оборудована сертифицированным оборудованием, включающим ламинарные шкафы, CO2-инкубаторы, центрифуги и другое необходимое оборудование. Производственная лаборатория должна иметь надлежащим образом оформленные договорные отношения с сертифицированными лабораториями для проверки КМВ, ЯСК, биотрансплантатов на наличие/отсутствие возбудителей распространенных инфекций, перечень которых соответствует перечню для тестирования на инфекционную безопасность препаратов крови и ее компонент.

Метод может применяться только в специализированном кардиологическом стационаре в условиях процедурного кабинета, операционной или рентгенэндоваскулярной операционной в зависимости от способа введения.

Успехи кардиологов, хирургов и специалистов в области интервенционных методов лечения привели к уменьшению доли острых нарушений кровообращения, таких как инфаркт миокарда и инсульт, в структуре смертности населения в развитых странах. По данным Центров контролирующих заболеваемость и их профилактику (Centers for Disease Control and Prevention), средняя продолжительность жизни была бы на 10 лет больше при отсутствии столь высокой распространенности сердечно-сосудистых заболеваний, охватывающих все страны и континенты. Они приводят к длительной нетрудоспособности взрослого контингента населения и требуют колоссальных экономических затрат. В 21-м веке на лидирующую позицию в этом важном демографическом показателе вышла сердечная недостаточность (СН). В России, в настоящее время, СН имеют более 8 млн. пациентов, у 10 % из которых она является осложнением дилатационной кардиомиопатии.

В основе всех современных методов лечения патологии сердца лежат восстановление кровоснабжения сердца, хирургическое ремоделирование его полостей. У пациентов с критическим снижением массы жизнеспособного миокарда вследствие диффузного некроза и/или апоптоза ни хирургические, ни, тем более, терапевтические мероприятия неэффективны, поскольку регенерационные свойства сердца весьма ограничены. Кардиомиоциты не обладают значимой пролиферативной активностью, при повреждении миокарда преобладают фибропластические реакции стромы, которые необратимы. Поэтому имеется необходимость в разработке принципиально новых подходов к лечению пациентов с заболеваниями сердца. В подобных случаях альтернативным методом лечения может стать применение методов клеточной трансплантации с целью стимуляции неоангиогенеза, создания новых сократительных элементов путем имплантации в миокард стволовых/прогениторных клеток для улучшения перфузии, восстановления функции и/или стимуляция регенерации собственных кардиомиоцитов. В экспериментальных исследованиях последних лет было показано, что трансплантация клеток различного фенотипа (эмбриональные кардиомиоциты, миобласты, взрослые предифференцированные стромальные клетки костного мозга и др.) положительно влияют на сократительную функцию миокарда. При этом было показано, что привнесенные в миокард клетки длительно переживают, пролиферируют и дифференцируются в миокарде после трансплантации, выделяют различные биоактивные вещества: ростовые факторы, цитокины и др. Основные эффекты от имплантации клеток выражаются в индукции репаративных процессов в месте повреждения, ограничении роста зоны ИМ, улучшении механических свойств рубцово-измененной мышцы сердца, улучшении васкуляризации миокарда путем стимуляции неоангиогенеза, при этом достоверно улучшается перфузия миокарда.

В последние годы исследователи стали придавать особое значение такому источнику стволовых и прогениторных клеток как костный мозг. Экспериментальные исследования подтвердили эффективность и безопасность применения клеток костного мозга в восстановлении функции пораженного миокарда. Так, доклинические исследования, проведенные ЗАО "Реметэкс" совместно с НЦССХ им.А.Н.Бакулева РАМН показали, что аллогенные мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки (ММСК) костного мозга при интрамиокардиальной и интракоронарной трансплантации в инфарцированный миокард крыс переживают после трансплантации в течение по меньшей мере 6 суток, не вызывая реакции отторжения, активно влияют на процессы ремоделирования миокарда. Экспериментальные исследования послужили основанием для развития клеточной кардиомиопластики в клинической медицине. С 2001 г начались ограниченные клинические исследования по интракоронарному и интрамиокардиальному введению различных клеточных популяций как за рубежом, так и в России. Во всех работах продемонстрирована клиническая эффективность и безопасность этих методов лечения.

В основу технологии положена стандартная методика забора КМВ, выделение из КМВ взвеси различных фракций ЯСК, их криоконсервирование и применение при ряде сердечно-сосудистых заболеваний.