3.2. Полуколичественный метод определения глюкозы и кетоновых тел в моче с помощью тест-полосок.

В моче здорового человека глюкоза содержится в очень малых количествах и обычными реакциями, применяемыми при анализе мочи на сахар, не выявляется. Явление, когда глюкоза определяется в моче обычными методами, называется глюкозурией. Глюкозурия может быть следствием гипергликемии и быть связана с нарушением инсулярного аппарата, гиперфункцией надпочечников, гипофиза, щитовидной железы, а также с единовременным приемом большого количества сахара. Кетоновые тела появляются в моче при сахарном диабете, при голодании (кетонурия).

Индикаторная бумага «DIA PHAN» применяется для экспрессного анализа содержания глюкозы и кетоновых тел в моче.

Наливают небольшое количество исследуемой мочи в стаканчик или пробирку. Погружают индикаторную бумагу в исследуемую мочу так, чтобы полностью смочить и нижний и верхний индикаторы. Немедленно извлекают бумажку из мочи, кладут смоченным концом на плитку. По наибольшему совпадению цвета индикаторов с цветной шкалой ориентировочно определяют концентрацию глюкозы и кетоновых тел в моче.

3.3. Обнаружение кровяных пигментов в моче кипячением со щелочью (проба Геллера).

Гематурия - появление в моче форменных элементов крови. Моча при гематурии окрашена в темно-красный или буро-красный цвет. Гемоглобинурия - появление свободного гемоглобина в моче в результате наступившего внутрисосудистого гемолиза. В случае гемоглобинурии моча имеет рубиново-красную окраску, эритроциты в осадке мочи отсутствуют. При кипячении со щелочью кровяные пигменты гидролизуются с отщеплением гематина, имеющего бурую окраску. Из гематина под влиянием редуцирующих веществ мочи образуется гемохромоген, окрашенный в красный цвет. Осадок фосфатов щелочноземельных металлов, выпадающий из мочи в щелочной среде, захватывает гематин и гемохромоген и окрашивается соответственно в бурый или красный цвет.

К 1 мл мочи добавляют по каплям 10% раствор гидроксида натрия до щелочной реакции. Выпадает хлопьевидный осадок фосфатов кальция и магния. Пробирке дают стоять до охлаждения содержимого. На дно оседает осадок фосфатов, окрашенный при наличии кровяных пигментов в бурый цвет (гематин) или красный (гемохромоген). В нормальной моче осадок фосфатов имеет белый или грязно-белый цвет.

Контрольные вопросы

1. Какие физиологические и патологические факторы влияют на сдвиг рН мочи в кислую или щелочную сторону?

2. При каких заболеваниях в моче присутствует белок?

3. При каких патологиях наблюдаются гематурия и гемоглобинурия?

4. Какие состояния приводят к развитию глюкозурии?

Работа 8. Биохимия крови

1. Буферные свойства сыворотки крови

Буферные системы поддерживают рН крови на постоянном уровне, близком к 7,4. К ним относятся бикарбонатная, фосфатная, белковая и гемоглобиновая буферная система. Значение рН плазмы 7,4 определяется физиологической концентрацией в ней компонентов бикарбонатной и фосфатной буферных систем. Основным внеклеточным буфером является бикарбонатный.

В одну пробирку наливают 1 мл сыворотки, в другую - 1 мл воды. В обе пробирки прибавляют по 3-4 капли раствора индикатора бромфенолового синего и затем по каплям из бюретки 0,1 н. раствор соляной кислоты. Отмечают, какое количество кислоты пошло в том и другом случае до достижения одинакового изменения окраски.