
- •Методы культивирования анаэробных бактерий
- •Выделение чистых культур анаэробных бактерий
- •Метод Цейсслера
- •Характеристика бактериальных токсинов
- •Классификация основных групп белковых токсинов
- •Практическая часть занятия
- •Протокол №1 микробиологического исследовании по выделению чистой культуры аэробных бактерий
- •Протокол №2 по изучению биохимических свойств
- •Протокол №3 по выделению чистой культуры анаэробных бактерий
- •Ситуационные задачи
Классификация основных групп белковых токсинов
Тип |
Группа, подфуппа |
Возбудитель - продуцент |
Цитотоксины |
Антиэлонгаторы Энтеротоксины Дсрмонекротоксины |
|
Мембранотоксины |
Лейкоцидины Гемоличины с фосфатида зной активностью О-стрептолизин. Пневмоличин А-токсин Тетанолизин |
|
Функциональные блокаторы |
Термостабильныс Энтеротоксины. Термолабильные энтеротоксины. Холероген Токсиблакаторы «мышиные» токсины Коклюшный стимулирующий фактор Нуйротоксины |
|
Эксфолиатины, эритрогенины |
Эксфолиатины Эритрогенины |
|
Вторая группа - «мембранотоксины» - повышают проницаемость мембраны эритроцитов (гемолизины) и лейкоцитов (лейкоцидины), вызывая их гибель.
Третья группа - «функциональные блокаторы» - включает термолабильные и термостабильные энтеротоксины. активизирующие клеточную аденилатциклазу, приводя к повышению проницаемости стенки тонкой кишки и увеличению выхода жидкости в ее просвет - диарее. Эта группа включает, например, холероген, продуцируемый холерным вибрионом, термолабильные энтеротоксины кишечной палочки и других энтеробактерий.
Токсикоблокаторы. «мышиные» токсины, вырабатываемые сибиреязвенной и чумной палочками, в отличие от энтеротоксинов инактивируют аденилатциклазу, являясь антагонистами данного фермента.
Нейротоксины (тетаноспазмин, ботулинический токсин) блокируют передачу нервных импульсов в клетках спинного и головного мозга.
Четвертая группа - эксфолиатины (продуцируемые золотистым стафилококком) и эритрогенины (образуемые скарлатинозным стрептококком), влияют на процессы межклеточного взаимодействия.
Экзотоксины обладают высокой иммуногенностью, что проявляется в способности вызывать иммунный ответ со стороны макроорганизма, в частности индуцировать синтез специфических антител - антитоксинов, нейтрализующих гомологичный токсин.
Ряд белковых токсинов, например столбнячный, дифтерийный, ботулинистический, гангренозный и др., под действием формалина утрачивают свою ядовитость, сохраняя при этом иммуногенные свойства. Такие токсины получили название - анатоксинов. Они применяются в качестве вакцин для профилактики одноименных заболеваний. Например, вакцина АКДС, содержащая столбнячный и дифтерийный анатоксины.
Многие бактерии (стафилококки, стрептококки и др.) образуют не один, а несколько белковых токсинов, обладающих разным действием.
Токсигенность бактерий изучают в опытах на чувствительных лабораторных животных
Практическая часть занятия
Цель занятия:
изучить методы культивирования и выделения чистых ку льту р анаэробных бактерий;
изучить биохимические свойства бактерий и методами их определения.
Мотивационная характеристика темы:
Изучение биохимических свойств бактерий наряду с определением морфологических, тинкториальных и культуральных свойств позволяет идентифицировать микроб и установить его роль в качестве возбудителя инфекционного заболевания.
Студент должен знать:
классификацию микроорганизмов по способу дыхания
методы культивирования анаэробов
основные методы выделения чистых культур анаэробов
основные тесты, характеризующие биохимические свойства микробов
Студент должен уметь:
выделять чистую культуру бактерий;
должен уметь идентифицировать выделенную культуру по морфологическим, тинкториальным, культурным и биохимическим свойствам.
Студент должен иметь навыки:
соблюдения правил противоэпидемического режима и техники безопасности в бактериологических лабораториях:
обеззараживания инфицированного материала, антисептической обработки рук, контаминнрованных исследуемым материалом:
стерилизации бактериальных петель прокаливанием;
посева и пересева исследуемого материала на питательные среды;
идентификации изучаемой культуры по биохимическим тестам.
Оснащение занятия:
На группу:
Таблицы: «Выделение чистой культуры анаэробов», «Методы культивирования анаэробов».
Таблицы: «Биохимические свойства бактерий», «Ферментативная активность бактерий кишечно-тифозной группы», «Токсины бактерий».
Анаэростат, эксикатор.
Демонстрация роста анаэробов на среде Китта-Тароцци
Демонстрация сахаролитических и протеолитических свойств кишечной палочки на средах Гисса.
На рабочее место:
Микроскоп.
Посевы исследуемого материала (прошлого практического занятия) на чашках Петри с МПА.
Пробирка со скошенным агаром.
Чистая культура грамотрицательной палочки на скошенном агаре.
Пробирки со средами Гисса: глюкозой, лактозой, сахарозой.
Пробирка с МПБ.
Индикаторные бумажки на индол и сероводород.
Пинцет, бактериологическая петля.
Спички, карандаш по стеклу.
Спиртовка.
Набор для окраски по методу Г рама.
Пробирка с физраствором.
Предметные стекла.
Пробирка с исследуемым материалом на обнаружение анаэробов.
Пробирка со средой Китта-Тароцци.
Банка с дезраствором.
Учебная карта занятия:
Продолжить протокол №1 по выделению чистой культуры аэробных бактерий:
изучить посевы на чашке с МПА;
отобрать подозрительную колонию и описать ее;
приготовить из колонии мазок, окрасить по Граму и промикроскопировать.
отсеять подозрительную колонию на скошенный агар.
результаты внести в протокол.
Изучить биохимические свойствами микроорганизмов по таблицам и демонстрационным материалам.
С целью идентификации чистой культуры грамотрицательной палочки определить:
сахаролитические свойства, сделав посев на среды Гисса (с глюкозой, лактозой, сахарозой);
протеолитические свойства, сделать посев на МПБ и внети в пробирку индикаторные бумажки на сероводород и индол;
ход исследования оформить в виде протокола №2.
Ознакомиться с методами культивирования анаэробных бактерий по таблицам и демонстрационным материалам.
Провести посев исследуемого материала на среду Китта-Тароцци для выделения анаэробных бактерий. Ход исследования оформить в виде протокола №3.