Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования НИЖЕГОРОДСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ МЕДИЦИНСКАЯ АКАДЕМИЯ Российского федерального агентства здравоохранения и социального развития

Фармацевтический факультет

__________________________

Кафедра фармацевтической химии и фармакогнозии

Химико-токсикологический анализ на группу веществ,

Изолируемых экстракцией водой в сочетании с диализом (нитриты, нитраты)

Учебно–методическое пособие для студентов 4 курса фармацевтического факультета

Количество часов:

Лекционных – 1

Лабораторно-практических - 10

Нижний Новгород

2009

Химико-токсикологический анализ на группу веществ, изолируемых экстракцией водой в сочетании с диализом (нитриты, нитраты). Учебно–методическое пособие для студентов 4 курса фармацевтического факультета – Нижний Новгород: изд-во Нижегородской государственной медицинской академии, 2009.

Учебно-методическое пособие составлено для студентов 4 курса фармацевтического факультета. В пособии рассмотрены метод изолирования нитратов и нитритов из биологического материала, их качественное и количественное определение.

Рекомендовано к изданию ЦМС Нижегородской государственной медицинской академии (протокол № 1 от 16.02.09).

Составители: С.А. Гаврилова, Л.Н. Карякина, Н.Б. Мельникова, Т.В. Саликова.

Рецензенты:

С.А. Гаврилова,

Л.Н. Карякина,

Н.Б. Мельникова,

Т.В. Саликова

Химико-токсикологический анализ на группу веществ, изолируемых экстракцией водой в сочетании с диализом (нитриты, нитраты)

1. Изолирование

Изолирование водой в сочетании с диализом.

Изолирование солей азотной и азотистой кислот из объектов проводят настаиванием с водой, для очистки от высокомолекулярных соединений используют диализ водной вытяжки через полупроницаемую мембрану (рис. 1).

водная вытяжка

ВМС

H₂O

~ 4 час

диализ

измельчение

диализат

качественный анализ

количественный анализ

Рис. 1. Схема изолирования из биологического материала водой в сочетании с диализом.

Установка для диализа представляет собой стеклянную трубку диаметром ~ 5 – 7 см, на дно которой натянута полупроницаемая мембрана. Трубка с мембраной помещена в цилиндр большего диаметра с дистиллированной водой.

Измельченный растительный материал (картофель, лук, капуста, зелень и др.) в количестве ~ 10 г помещают в стеклянную трубку с мембраной, которую опускают в диализационный цилиндр с дистиллированной водой в объеме 100 – 200 мл, из которых рекомендуется взять несколько миллилитров для того, чтобы смочить биоматериал во внутренней трубке. Проводят диализ в течение 4-6 часов. Для увеличения скорости диализа можно предварительно замочить мембрану в дистиллированной воде на 1 – 2 суток. В этом случае время диализа снижается до 2 - 3 часов. Диализат используют для анализа.

2. Качественный анализ

Описанные ниже качественные реакции изучаются сначала на водных растворах известных веществ. При выполнении контрольной задачи описанные реакции применяют к исследованию диализата.

1. Нитрит - ион

   1. Реакция с дифениламином. На предметное стекло помещают три капли раствора дифениламина в концентрированной серной кислоте и несколько капель исследуемого раствора. В присутствии нитрит - ионов появляется темно-синее окрашивание. Аналогичная реакция идет с участием нитрат – иона.

2. Реакция с реактивом Грисса. К 10 мл исследуемого раствора прибавляют 1 мл реактива Грисса (смесь равных объемов раствора сульфаниловой кислоты и α – нафтиламина), и, если необходимо, нагревают до 70–80 ⁰С на водяной бане. Появление розового окрашивания свидетельствует о наличии нитрит - ионов.

2. Нитрат - ион

1. Реакция с дифениламином. Реакция аналогична реакции с дифениламином на нитрат – ион.

2. Реакция восстановления нитрат – иона до аммиака. К 10 мл исследуемого раствора прилить 10–15 капель щелочи, добавить 25–50 мг цинковой пыли, полученную смесь нагреть. Нитраты восстанавливаются до аммиака, который обнаруживается по покраснению фенолфталеиновой бумаги, смоченной в дистиллированной воде и внесенной в пары исследуемого раствора.

NaNO₃ + 4 Zn + 7 NaOH → NH₃ + 4 Na₂ZnO₂ + 2 H₂O

Результаты наблюдения качественных реакций занести в таблицу:

Таблица 1. Реакции обнаружения нитрат- и нитрит-ионов.

Ион	Аналитический эффект
	с дифениламином	с реактивом Грисса	восстановление цинком
NO2-
NO3-