1. За­да­чи при­клад­ной им­му­но­ло­гии

Им­му­но­ло­гия - нау­ка, тео­ре­ти­че­ские дос­ти­же­ния ко­то­рой очень бы­ст­ро вне­дря­ют­ся в прак­ти­ку. Еще до тео­ре­ти­че­ско­го обос­но­ва­ния, на за­ре за­ро­ж­де­ния им­му­но­ло­гии, Э.Джен­не­ром был раз­ра­бо­тан спо­соб про­фи­лак­ти­ки на­ту­раль­ной ос­пы пу­тем вак­ци­на­ции, до от­кры­тия ви­ру­сов по­лу­че­на ви­рус­ная вак­ци­на про­тив бе­шен­ст­ва Л.Пас­те­ром. Бу­к­валь­но че­рез не­сколь­ко лет по­сле от­кры­тия в 1975 г. Г.Ке­ле­ром и К.Миль­штей­ном гиб­ри­дом­ной тех­но­ло­гии на­ча­лось мас­со­вое про­из­вод­ст­во мо­но­кло­наль­ных ан­ти­тел для прак­ти­че­ских нужд, что по­зво­ли­ло го­во­рить о на­ча­ле но­вой эры в био­ло­гии и ме­ди­ци­не, при­бли­зив­шей их к фи­зи­че­ским нау­кам бла­го­да­ря ис­поль­зо­ва­нию ме­то­да вы­со­кой точ­но­сти, а ав­то­ры в ре­корд­но ко­рот­кий для от­кры­тий в об­лас­ти ме­ди­ци­ны срок, в 1978 г., бы­ли удо­стое­ны Но­бе­лев­ской пре­мии. При­клад­ное зна­че­ние им­му­но­ло­гии для со­вре­мен­ной ме­ди­ци­ны труд­но пе­ре­оце­нить. Ре­ак­ции им­му­ни­те­та лег­ли в ос­но­ву ме­то­дов ла­бо­ра­тор­ной ди­аг­но­сти­ки ин­фек­ци­он­ных бо­лез­ней, им­му­но­ло­ги­че­ские ме­то­ды ши­ро­ко ис­поль­зу­ют­ся в ди­аг­но­сти­ке и кон­тро­ле за ле­че­ни­ем мно­гих не­ин­фек­ци­он­ных за­бо­ле­ва­ний, транс­план­та­то­ло­гии, он­ко­ло­гии, аку­шер­ско-ги­не­ко­ло­ги­че­ской прак­ти­ке и др. Им­му­но­ло­ги­че­ские пре­па­ра­ты при­ме­ня­ют­ся для ле­че­ния, про­фи­лак­ти­ки и ди­аг­но­сти­ки ин­фек­ци­он­ных и не­ин­фек­ци­он­ных за­бо­ле­ва­ний, в этио­ло­гии ко­то­рых при­ни­ма­ют уча­стие мик­ро­ор­га­низ­мы.

При­ме­не­ние им­му­но­ло­ги­че­ских ре­ак­ций и пре­па­ра­тов для ди­аг­но­сти­ки ин­фек­ци­он­ных бо­лез­ней (се­ро­ло­ги­че­ская ди­аг­но­сти­ка, ал­лер­ги­че­ская ди­аг­но­сти­ка, се­ро­ло­ги­че­ская иден­ти­фи­ка­ция мик­ро­ор­га­низ­мов) под­роб­но изу­ча­ет­ся сту­ден­та­ми во вре­мя прак­ти­че­ских за­ня­тий на на­шей ка­фед­ре.

На этой лек­ции мы кос­нем­ся од­но­го из важ­ней­ших на­прав­ле­ний при­клад­ной им­му­но­ло­гии - им­му­но­те­ра­пии и им­му­но­про­фи­лак­ти­ки ин­фек­ци­он­ных за­бо­ле­ва­ний, или, как это бы­ло при­ня­то го­во­рить рань­ше, уче­нию о вак­ци­нах и сы­во­рот­ках. При­клад­ная им­му­но­ло­гия при­зва­на про­во­дить раз­ра­бот­ку но­вых и со­вер­шен­ст­во­ва­ние су­ще­ст­вую­щих пре­па­ра­тов для им­му­но­те­ра­пии и им­му­но­про­фи­лак­ти­ки и им­му­но­ди­аг­но­сти­ки, а так­же ме­то­дов их при­ме­не­ния в прак­ти­ке здра­во­охра­не­ния.

2. ВАК­ЦИ­НЫ

Вакцины - ан­ти­ген­ные пре­па­раты из микроорганизмов для соз­да­ния ис­кус­ст­вен­но­го ак­тив­но­го им­му­ни­те­та.

Тер­мин «вак­ци­на» был вве­ден соз­да­те­лем ме­то­да вак­ци­но­про­фи­лак­ти­ки ин­фек­ци­он­ных за­бо­ле­ва­ний Л.Пас­те­ром в знак при­зна­ния за­слуг анг­лий­ско­го вра­ча Э.Джен­не­ра, пред­ло­жив­ше­го ос­по­при­ви­ва­ние с ис­поль­зо­ва­ни­ем ви­ру­са ко­ровь­ей ос­пы (vaccinus - ко­ро­вий). Пер­вый вак­цин­ный штамм был за­им­ст­во­ван в го­то­вом ви­де у при­ро­ды, од­на­ко прин­цип про­фи­лак­ти­ки ин­фек­ци­он­ных за­бо­ле­ва­ний пу­тем вве­де­ния ос­лаб­лен­но­го (ат­те­нуи­ро­ван­но­го) воз­бу­ди­те­ля был раз­ра­бо­тан Л.Пас­те­ром. Ис­то­рия раз­ви­тия это­го ме­то­да дос­та­точ­но пол­но из­ло­же­на в учеб­ной ли­те­ра­ту­ре, к ко­то­рой мы и от­сы­ла­ем сту­ден­тов по это­му во­про­су.

Стро­го го­во­ря, в на­стоя­щее вре­мя при­ве­ден­ное оп­ре­де­ле­ние вак­ци­ны не со­всем точ­но, так как име­ет­ся пер­спек­ти­ва и прак­ти­че­ские на­ра­бот­ки по соз­да­нию син­те­ти­че­ских, а так­же ан­ти­идио­ти­пи­че­ских (из мо­но­кло­наль­ных ан­ти­тел) вак­цин, ко­то­рые нель­зя на­звать пре­па­ра­та­ми из мик­ро­ор­га­низ­мов. Од­на­ко, эти но­вые вак­ци­ны по­ка еще на­шли ши­ро­ко­го прак­ти­че­ско­го при­ме­не­ния, ме­ди­ци­на до на­стоя­ще­го вре­ме­ни ис­поль­зу­ет в прак­ти­ке здра­во­охра­не­ния, глав­ным об­ра­зом, тра­ди­ци­он­ные вак­ци­ны. По­это­му мы со­хра­ня­ем при­ве­ден­ное вы­ше оп­ре­де­ле­ние вак­цин.

КЛАС­СИ­ФИ­КА­ЦИЯ ВАК­ЦИН

ТРА­ДИ­ЦИ­ОН­НЫЕ	НО­ВЫЕ
1-го по­ко­ле­ния ( кор­пус­ку­ляр­ные ) жи­вые уби­тые 2-го по­ко­ле­ния (химические) ана­ток­си­ны ком­по­нен­ты мик­ро­ор­га­низ­мов субъ­е­ди­нич­ные (рас­ще­п­лен­ные)	Син­те­ти­че­ские оли­го­пеп­ти­ды оли­го­са­ха­ри­ды Жи­вые ген­но­ин­же­нер­ные Про­дук­ты ре­ком­би­нант­ных сис­тем субъ­е­ди­нич­ные ан­ти­идио­ти­пи­че­ские
Мо­но­вак­ци­ны, по­ли­ва­лент­ные ас­со­ции­ро­ван­ные ад­сор­би­ро­ван­ные	С при­ме­не­ни­ем средств уси­ле­ния им­му­но­ген­но­сти и про­тек­тив­ной ак­тив­но­сти

Тра­ди­ци­он­ные вак­ци­ны - это в пер­вую оче­редь жи­вые вак­ци­ны, со­дер­жа­щие штам­мы воз­бу­ди­те­лей с ос­лаб­лен­ной ви­ру­лент­но­стью. Ат­те­нуа­ция, ос­лаб­ле­ние ви­ру­лент­но­сти ос­но­вы­ва­ет­ся на эм­пи­ри­че­ски най­ден­ном пас­те­ров­ском прин­ци­пе куль­ти­ви­ро­ва­ния мик­ро­ор­га­низ­мов в не­бла­го­при­ят­ных ус­ло­ви­ях: при по­вы­шен­ной тем­пе­ра­ту­ре (са­мая пер­вая на­уч­но раз­ра­бо­тан­ная вак­ци­на, си­би­ре­яз­вен­ная, по­лу­че­на Пас­те­ром пу­тем куль­ти­ви­ро­ва­ния B.anthracis при 42 - 43 С, при до­бав­ле­нии в сре­ду ан­ти­мик­роб­ных ве­ществ (ту­бер­ку­лез­ная вак­ци­на BCG по­лу­че­на Каль­мет­том и Ге­ре­ном при дли­тель­ном пас­са­же воз­бу­ди­те­ля ту­бер­ку­ле­за на пи­та­тель­ной сре­де с до­бав­ле­ни­ем жел­чи), при пас­си­ро­ва­нии че­рез ма­ло­вос­при­им­чи­вый ор­га­низм, пу­тем се­лек­ции ма­ло­ви­ру­лент­ных ва­ри­ан­тов воз­бу­ди­те­ля (чум­ная вак­ци­на Жи­ра­ра и Ро­би­ка из штам­ма EV).

Од­на­ко, не­об­хо­ди­мо по­ни­мать, что лю­бые ме­то­ды ат­те­нуа­ции - это се­лек­ция ма­ло­ви­ру­лент­ных му­тан­тов мик­ро­ор­га­низ­мов, а со­от­вет­ст­вую­щие ус­ло­вия лишь спо­соб­ст­ву­ют се­лек­цио­ни­ро­ва­нию, так как ат­те­нуи­ро­ван­ный штамм дол­жен иметь ге­не­ти­че­ски за­кре­п­лен­ную ос­лаб­лен­ную ви­ру­лент­ность.

В свя­зи с этим по­сто­ян­но воз­ни­ка­ют опа­се­ния о воз­мож­но­сти ре­вер­сии ат­те­нуи­ро­ван­ных штам­мов в ис­ход­ный ви­ру­лент­ный «ди­кий» вид. Прав­да, в от­но­ше­нии су­ще­ст­вую­щих жи­вых вак­цин эти опа­се­ния до сих пор ни­ко­гда не оп­рав­ды­ва­лись.

Жи­вые вак­ци­ны об­ла­да­ют ря­дом не­со­мнен­ных пре­иму­ществ: они соз­да­ют, как пра­ви­ло, на­пря­жен­ный и стой­кий им­му­ни­тет, сход­ный с пост­ин­фек­ци­он­ным, так как мо­де­ли­ру­ют ес­те­ст­вен­ные взаи­мо­от­но­ше­ния мик­ро - и мак­ро­ор­га­низ­мов. Жи­вая вак­ци­на раз­мно­жа­ет­ся в ор­га­низ­ме, вак­цин­ный штамм мо­жет пер­си­сти­ро­вать (дли­тель­но на­хо­дить­ся) в ор­га­низ­ме. Эн­те­раль­ная по­лио­мие­лит­ная вак­ци­на мо­жет да­же вы­де­лять­ся с фе­ка­лия­ми, обес­пе­чи­вая ес­те­ст­вен­ную им­му­ни­за­цию на­се­ле­ния вак­цин­ным штам­мом, что при­во­дит к вы­тес­не­нию ви­ру­лент­ных штам­мов ви­ру­са из циркуляции сре­ди на­се­ле­ния.

Не­дос­та­ток жи­вых вак­цин - опас­ность раз­ви­тия тя­же­лых ин­фек­ци­он­ных ос­лож­не­ний у лю­дей с по­ро­ка­ми им­мун­ной сис­те­мы - им­му­но­де­фи­ци­тов. Та­ким лю­дям про­ти­во­по­ка­за­но вве­де­ние жи­вых вак­цин. Кро­ме то­го, нам не уда­лось по­лу­чить эф­фек­тив­ные жи­вые вак­ци­ны про­тив ря­да за­бо­ле­ва­ний.

Уби­тые (инактивированные) вак­ци­ны го­то­вят из максимально им­му­но­ген­ных мик­ро­ор­га­низ­мов пу­тем инак­ти­ва­ции тем­пе­ра­ту­рой, фор­ма­ли­ном, фе­но­лом, спир­том, ульт­ра­фио­ле­то­вы­ми лу­ча­ми в ус­ло­ви­ях, ис­клю­чаю­щих де­на­ту­ра­цию ан­ти­ге­нов. Наи­бо­лее час­то ис­поль­зу­ет­ся уби­тая кок­люш­ная вак­ци­на, но су­ще­ст­ву­ют так­же леп­тос­пи­роз­ная, эн­це­фа­лит­ная и мно­гие дру­гие.

Вак­ци­ны 2-го по­ко­ле­ния - хи­ми­че­ские. Их раз­ра­бот­ка бы­ла вы­зва­на тем, что кор­пус­ку­ляр­ная вак­ци­на со­дер­жит мно­же­ст­во ан­ти­ген­ных де­тер­ми­нант, про­тек­тив­ны­ми же свой­ст­ва­ми об­ла­да­ют лишь не­мно­гие из них, по­это­му оп­рав­да­но стрем­ле­ние очи­стить вак­ци­ны от не­ак­тив­ных бал­ла­ст­ных ве­ществ и кон­ст­руи­ро­вать вак­цин­ные пре­па­ра­ты толь­ко из вы­со­ко­им­му­но­ген­ных ком­по­нен­тов мик­ро­ор­га­низ­мов.

А н а т о к с и н - обез­вре­жен­ный фор­ма­ли­ном эк­зо­ток­син, по­те­ряв­ший свои ядо­ви­тые, но со­хра­нив­ший ан­ти­ген­ные свой­ст­ва, т.е. спо­соб­ность вы­зы­вать об­ра­зо­ва­ние ан­ти­тел - ан­ти­ток­си­нов. По­лу­ча­ют ана­ток­си­ны (си­но­ним - ток­сои­ды) из эк­зо­ток­си­на об­ра­бот­кой 0,4 % фор­ма­ли­на при 40 °С в те­че­ние 4-х не­дель (уп­ро­щен­ная схе­ма для за­по­ми­на­ния, пра­ви­ло “чет­вер­ки“). По­лу­че­ны диф­те­рий­ный, столб­няч­ный, бо­ту­ли­ни­че­ские, ган­гре­ноз­ные, ста­фи­ло­кок­ко­вый анатоксины, хо­ле­ро­ген-ана­ток­син и некоторые другие.

Еди­ни­цы ак­тив­но­сти ана­ток­си­на - ЛФ (LF) и ЕС. 1 ЛФ - ко­ли­че­ст­во ана­ток­си­на, даю­щее на­чаль­ную флок­ку­ля­цию с 1 МЕ со­от­вет­ст­вую­щей ан­ти­ток­си­че­ской сы­во­рот­ки. Тит­ру­ет­ся in vitro в ва­ри­ан­те по­ста­нов­ки ре­ак­ции пре­ци­пи­та­ции - ре­ак­ции флок­ку­ля­ции. В ЛФ обыч­но до­зи­ру­ют диф­те­рий­ный ана­ток­син. Ос­таль­ные ана­ток­си­ны обыч­но до­зи­ру­ют в ЕС (еди­ни­цах свя­зы­ва­ния). 1 ЕС - до­за ана­ток­си­на, свя­зы­ваю­щая 1 МЕ ан­ти­сы­во­рот­ки. Для тит­ро­ва­ния в ЕС к из­вест­но­му ко­ли­че­ст­ву МЕ ан­ти­ток­си­че­ской сы­во­рот­ки до­бав­ля­ют пор­цию ана­ток­си­на и за­тем тит­ру­ют в ре­ак­ции ней­тра­ли­за­ции на жи­вот­ных ко­ли­че­ст­во ос­тав­ших­ся не­свя­зан­ны­ми МЕ сы­во­рот­ки, что по­зво­ля­ет оп­ре­де­лить чис­ло свя­зав­ших­ся МЕ.

Из хи­ми­че­ских вак­цин мож­но, по­ми­мо ши­ро­ко ис­поль­зую­щих­ся ана­ток­си­нов, от­ме­тить ме­нин­го­кок­ко­вую хи­ми­че­скую вак­ци­ну, сып­но­ти­фоз­ную и др.

Для по­вы­ше­ния им­му­но­ген­но­сти хи­ми­че­ских вак­цин их ад­сор­би­ру­ют на гид­ро­оки­си алю­ми­ния и др. со­еди­не­ни­ях, что пе­ре­во­дит рас­тво­ри­мые ан­ти­ге­ны в свя­зан­ные на хи­ми­че­ской ос­но­ве, соз­да­ет­ся де­по в ор­га­низ­ме с мед­лен­ной ре­зорб­ци­ей ан­ти­ге­нов и уси­ле­ни­ем им­мун­но­го от­ве­та. Ве­ще­ст­ва, по­вы­шаю­щие им­му­но­ген­ность пре­па­ра­тов, на­зы­ва­ют адь­ю­ван­та­ми (лат. adjuvans- по­мо­гаю­щий).

Мо­но­вак­ци­на­ми на­зы­ва­ют вак­ци­ны, со­дер­жа­щие ан­ти­ге­ны од­но­го ви­да воз­бу­ди­те­ля, по­ли­ва­лент­ны­ми - со­дер­жа­щие ан­ти­ге­ны раз­ных се­ро­ва­ров од­но­го ви­да (по­лио­мие­лит­ная вак­ци­на из воз­бу­ди­те­лей трех се­ро­ти­пов), ас­со­ции­ро­ван­ны­ми - вак­ци­ны из ан­ти­ге­нов раз­ных ви­дов мик­ро­ор­га­низ­мов. Наи­бо­лее ши­ро­ко при­ме­ня­ют ас­со­ции­ро­ван­ную вак­ци­ну АКДС - ад­сор­би­ро­ван­ную кок­люш­но-диф­те­рий­но-столб­няч­ную вак­ци­ну. Она со­дер­жит уби­тую кок­люш­ную вак­ци­ну, диф­те­рий­ный и столб­няч­ный ана­ток­си­ны.