- •Кафедра микробиологии, вирусологии и иммунологии
- •2. Исторический очерк развития микробиологии
- •3.Роль российских и украинских ученых в развитии микробиологии, вирусологии и иммунологии
- •4. Развитие микробиологии в одессе
- •5. История кафедры микробиологии одесского
- •1. Задачи прикладной иммунологии
- •Новые подходы к созданию вакцин
- •7. Диагностические иммунопрепараты.
- •Моноклональные антитела
- •1. Основные принципы классификации микроорганизмов
- •2. Морфология бактерий
- •Спору можно определить как стойкую форму существования некоторых бактерий.
- •4. ТинкториальНые свойства бактерий
- •1. Вступление
- •2. Питание бактерий
- •3. Дыхание бактерий
- •4. Ферменты бактерий
- •5. Культивирование бактерий
- •7. Культуральные свойства бактерий
- •8. Продукты жизнедеятельности бактерий
- •9. Роль микроорганизмов в круговороте веществ
- •10. Принципы классификации микроорганизмов
- •11. Некультивируемые формы бактерий (нфб)
- •4. Содержание лекционного материала: текст лекции
- •2. Классификация форм изменчивости
- •3. Основные понятия генетики микроорганизмов
- •5. Мутационная и адаптивная формы
- •7. Практическое значение генетики микроорганизмов и генная инженерия в медицинской микробиологии
- •Определение предмета учения об инфекции
- •2. Понятие о возбудителе инфекционной болезни
- •3. Патогенность, вирулентность
- •4. Факторы вирулентности
- •5. Динамика инфекционного процесса
- •Формы инфекции и их характеристика
- •7. Элементы учения об эпидемическом процессе
- •Эволюция микробного паразитизма и происхождение
- •Лекция 6. Виды и формы иммунитета. Иммунная система организма. Факторы неспецифической защиты и иммунологическая реактивность
- •3. Исторический очерк развития иммунологии.
- •Понятие о клеточных, гуморальных и функциональных механизмах защиты, как единой системе невосприимчивости
- •7. Неспецифические факторы защиты
- •Лекция 7. Антигены. АнтитЕла
- •3. Свойства антигенов
- •6. Структура антител. Классы иммуноглобулинов
- •3. Идиотип-антиидиотипические взаимодействия
- •6. Субпопуляции т –и в – лимфоцитов. Натуральные Киллеры
- •Натуральные килери
- •Лекция 9 теории иммуногенеза. Реакции «антиген-антитело»
- •1. Варианты клеточных взаимодействий
- •2. Первые теории имуногенеза
- •3. Инструктивные и селективные теории
- •4. Клонально-селекционная теория бернета
- •5. Теория п.Ф.Здродовского
- •6. Общая характеристика реакций " антиген-антитело "
- •7.Серологические реакции
- •Реакция агглютинации.
- •Иммуноферментный анализ (ифа).
- •Другие типы реакций антиген-антитело.
- •8. Применение серологических реакций в диагностике
- •Общая характеристика аллергии и ее
- •2.Определение понятий и краткий исторический очерк учения об аллергии
- •3. Классификация аллергических реакций
- •4. Характеристика реакций немедленного
- •5. Характеристика аллергических реакций I - III типов.
- •6. Аллергические реакции IV типа.
- •8. Роль аллергии в иммунитете.
Иммуноферментный анализ (ифа).
Иммуноферментный анализ - высокочувствительный, дающий возможность определять антиген в концентрации ниже 1 пикограмма (10-12 г) на милилитр, простой в применении метод. Кроме того, он более дешев, потому что не требует дорогостоящей аппаратуры, и более безопасен, потому что не требует применения радиоактивных материалов, но такой же точный и надежный, как и радиоиммунный метод. ИФА основан на следующих двух феноменах.
1. Антитела и некоторые антигены могут адсорбироваться на лунках полистироловых пластин (или другом твердом носителе) и полностью сохранять иммунологические свойства.
2. Антигены и антитела могут быть связаны с ферментами с полным сохранением функциональной активности коньюгатов, как иммунологических, так и ферментативных. Вот почему этот метод называется иммуноферментным. В английской литературе его называют чаще ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay). Активность фермента используется для того, чтобы измерить количество антигена или антитела, содержащихся в пробе. Для ИФА используют ферменты пероксидазу, щелочную фосфатазу, -галактидазу и глюкозоксидазу.
Имеются два основных варианта ИФА, которые применяются для клинических целей: двойной сэндвич-метод для обнаружения и измерения антигена; и непрямой иммуносорбционный метод для обнаружения и измерения антитела. Последний метод представлен на рис. 5. Начальный этап непрямого ИФА включает адсорбцию антигена на стенках лунки. Добавляют исследуемую сыворотку и инкубируют. Если антитела сыворотки связались с иммобилизированным антигеном, их присутствие обнаруживается путем добавления меченого ферментом антиммуноглобулина (анти-Ig G или анти-IgM). Затем добавляют субстрат для фермента; степень гидролиза субстрата соответствует изменению цвета и пропорциональна концентрации антител, присутствующих в пробе. Окрашивание может наблюдаться визуально или спектрофотометрически.
При двойном сэндвич-методе иммунную сыворотку адсорбируют на стенках лунок планшета. Добавляют исследуемый антиген, и, если он специфичен антителам, антиген связывается с адсорбированными на стенках лунки антителами. Добавляют коньюгат антител с ферментом. Антитела связываются с антигеном, уже фиксированным
первым антителом, создавая «сэндвич»: коньгат фермента с антителом-антиген-антитело. Наконец, доавляют субстрат для фермента. Скорость ферментативной реакции прямо пропорциональна количеству связанного с ферментом антитела, а оно, в свою очередь, пропорционально количеству исследуемого антигена. Количественный учет реакции проводят спектрофотометрически.
ИФА используется для обнаружения многих инфекционных вирусов, бактерий, грибов, и паразитов типа простейших. Например, один образец иммунной сыворотки от беременной женщины может быть исследован одновременно на многие инфекционные болезни, напаример, вызываемые вирусом краснухи (который может вызвать врожденные пороки развития или внутриутробную смерть) и вирусом герпеса типа 2 (который может вызвать серьезные врожденные пороки развития нервной системы и в результате микроцефалию).