5. Теория п.Ф.Здродовского

Вышеописанные теории рассматривают иммуногенез в отрыве от целостного организма. Теория отечественного ученого П.Ф.Здродовского удачно объединила теорию Бернета с теорией нейрогуморальной регуляции физиологических функций организма Г.Селье. По Здродовскому антиген, как стрессор, вызывает раздражение гипофиза неспецифично по отношению к антигену. Гипофиз продуцирует соматотропный гормон (СТГ) и адренокортикотропный гормон (АКТГ). СТГ вызывает стимуляцию размножения клеток, а АКТГ через усиление продукции надпочечником кортикостероидов - подавляет размножение клеток. Превалирование одного процесса над другим зависит от дозы антигена, состояния организма, условий. Идет нейрогуморальная регуляция иммуногенеза. А специфическое действие антигена заключается в отборе соответствующего клона лимфоцитов по Бернету.

6. Общая характеристика реакций " антиген-антитело "

Механизм реакции АГ-АТ заключается в образовании связи паратопа антитела с эпитопом антигена, активного центра антитела с антигенной детерминантой. С учетом как минимум двухвалентности антитела и обычной многовалентности антигена создается возможность образования прочной решетки. Теория решетки до настоящего времени привлекается для объяснения образования прочных комплексов антиген-антитело. Имеет значение соотношение количеств реагирующих компонентов, в избытке антигена и в избытке антитела комплексы не только не образуются, но и может раствориться уже образовавшийся комплекс антиген-антитело. При этом нет видимого результата реакции, хотя взаимодействие АГ-АТ произошло. Количественные соотношения АГ и АТ необходимо учитывать при постановке реакций. Принято выделять две фазы реакций АГ-АТ: первую, специфическую, не зависящую от электролитов (собственно специфическая реакция между паратопом и эпитопом), невидимую, и вторую, неспецифическую, требующую присутствия электролитов и дополнительных условий, видимую. Например, взаимодействие микробов с антителами в безэлектролитной среде приводит к связыванию антител, хотя видимой реакции и не происходит.

7.Серологические реакции

7.1. Реакции между антигеном и антителом называют гуморальными реакциями или же серологическими (от лат. serum - сыворотка). Эти реакции проходят в организме для борьбы с антигеном, а в лабораторных условиях мы ставим серологические реакции для решения ряда диагностических задач. Названия этих реакций могут быть различными. Нужно лишь понимать, что название реакции отражает главным образом то, что происходит с антигеном. На­при­мер: ре­ак­ция пре­ци­пи­та­ции, агг­лю­ти­на­ции, ли­зи­са, свя­зы­ва­ния ком­пле­мен­та. Со­от­вет­ст­вен­но и ан­ти­те­ла, уча­ст­вую­щие в такой реакции, называют преципитинами, агглютининами, лизинами, комплементсвязывающими, антитоксинами, вируснейтрализующими антителами и т.п. Реально это может быть одно и то же антитело, но внешний результат реакции различен из-за различий в условиях постановки и учета. Если говорят, что обнаружены агглютинины - значит антитела обнаружены в реакции агглютинации и т.д. Вы­де­ля­ют: двух­ком­по­нент­ные ре­ак­ции - РА, РП, РН; трех­ком­по­нент­ные - им­мун­но­го ли­зи­са, оп­со­ни­за­ции, РСК, ре­ак­ции с ме­че­ны­ми реа­ген­та­ми - РИФ, РИА, ИФА.

7.2. Реакция преципитации (РП) - это осаждение растворенного антигена под действием антител.

Когда антитело соединяется с антигеном в растворе образуется преципитат, то есть осадок комплекса антиген-антитело. Реакция может быть проведена различными способами:

1. Простое смешивание. Раствор антигена смешивается с антителом в пробирке и оставляется для осаждения. Эта реакция идет быстро (несколько минут при 37 C), и преципитат оказывается наиболее массивным, когда антиген и антитело присутствуют в оптимальных соотношениях. Избыток антигена или антитела может подавлять формирование преципитата - феномен прозоны (этот феномен наблюдается и при других реакциях антиген-антитело).

2. Реакция кольцепреципитации. Раствор антигена наслаивают на поверхность антитела в узкой пробирке или капилляре. На границе соприкосновения двух жидкостей образуется узкое кольцо преципитата. Реакция кольцепреципитации требует малых количеств реагентов и происходит быстро.

3. Преципитация в геле (двойная диффузия), иммунодиффузия. Антиген и антитело диффундируют навстречу друг другу в агаровой среде из отдельных лунок, выбитых в пластине агара (рис. 1)

Реакция преципитации в геле применяется, например, для определения токсигенности некоторых бактерий, например - Corynebacterium diphtheriae. Производят посев культуры микроорганизмов под прямым углом к помещенной на поверхность питательного агара полоске фильтровальной бумаги, содержащей иммунную сыворотку. Если культура продуцирует токсин, образуется линия преципитации.

4. Простая радиальная иммунодиффузия по Манчини. Антиген помещается в лунку, выбитую в геле агара, содержащем антитело в соответствующем разведении. Кольцо преципитата формируется там, где реагенты встречаются в оптимальных пропорциях. Чем выше концентрация антигена, тем больше диаметр кольца. Измерение диаметра кольца преципитата позволяет количественно определять антиген.

Этот метод используется для определения концентрации IgG, IgM и IgA в сыворотке человека.

5. Иммуноэлектрофорез объединяет методы иммунодиффузии и электрофореза. Иммуноэлектрофорез проводится в две стадии. Сначала жидкость, содержащая белковые антигены, помещают в лунку геля и проводят электрофорез. Антигены распределяются параллельно направлению электротока в виде отдельных пятен по линии, проходящей через лунку. Каждое пятно является индивидуальным компонентом исследуемой смеси антигенов. Когда ток выключают, проводят иммунодиффузию. Для этого заполняют канавку, проходящую параллельно направлению электрофореза, соответствующей иммунной сывороткой. Молекулы антитела иммунной сыворотки распространяются перпендикулярно фронту движения антигенов. Дуга преципитата, или линия преципитации, формируется только там, где каждый компонент комплекса антиген-антитело встречаются в зоне эквивалентности. Этот метод широко используется для анализа белковых компонентов образцов сыворотки. Таким способом могут быть обнаружены, например, измененные иммуноглобулины в сывопротке.