Рекомендуемая литература:

1. Егорова Т.А., Клунова С.М., Живухина Е.А. Основы биотехнологии. – М.: Изд. центр «Академия», - 2008. – 208 с.

2. Евтушенков А.Н., Фомичев Ю.К. Введение в биотехнологию: Курс лекций. – Минск.: БГУ, 2002. - 105 с.

3. Сазыкин Ю.О., Орехов С.Н., Чакалева И.И. Биотехнология: Учебное пособие. – М.: Изд. Центр «Академия». – 2006. – 256 с.

4. Орехов С.Н. Фармацевтическая биотехнология. Руководство к практическим занятиям. – Учебное пособие. – Под ред. акад. РАМН В.А. Быкова, проф. А.В Катлинского. – М. : ГЭОТАР-Медиа 2009. – 384 с.

5. Елинов Н.П. Химическая микробиология. - Учебник. - М.: Высшая школа. - 1989, 448 с

6. Воробьева Л.И. Промышленная микробиология. - Учебное пособие. - М.: Изд-во МГУ. - 1989, 294 с.

7. Биотехнология. Принципы и применение. Пер. с англ. / Под ред. И. Хиггинса, Д. Беста, Дж. Джонса. - М.: Мир. - 1988, 480 с.

8. Чуешов В.И., Зайцев А.И., Шебанова С.Г. Промышленная технология лекарств. Том 2. Харьков, 2002.

9. Биотехнология микробного синтеза (Под ред. Бекера М.Е.) – Рига – 1980.

10. Биотехнология. /Отв. редактор А.А. Баев. - М.: Наука. - 1984, 310 с.

11. Никитин Г.А. – Биохимические основы микробиологических производств – Киев, 1981.

12. Перт С. Дж. Основы культивирования микроорганизмов. М., - 1979 г.

13. Попова Т.В. – Развитие биотехнологии в СССР – М., Наука - 1988 г.

14. Промышленная микробиология (Под ред. Егорова Н.С.) – М., 1989 г.

15. Процессы и аппараты химической технологии (Под ред. П.Г. Романкова). – Л. – 1981.

16. Специальные журналы: «Биотехнология», «Фармация Казахстана», «Фармация», «Фармацевтический бюллетень», и др.

Лабораторная работа № 1

«Выделение почвенных микроорганизмов как объектов для скрининга продуцентов биологически активных соединений. Культивирование и изучение морфологических характеристик микроорганизмов»

Занятие № 2

Тема занятия: Отбор почвенных проб различных регионов. Приготовление почвенной суспензии и высев на агаризованные среды. Культивирование микроорганизмов в оптимальных для разных родов и видов условиях.

Цель: Освоить технику приготовления почвенной суспензии и высева на твердую агаровую среду в чашках Петри для выделения колоний микроорганизмов как отдельных объектов.

Задачи обучения:

• Знать составы жидких, твердых и полутвердых питательных сред

• Знать технику взятия материала для исследования.

• Знать технику высева исследуемого материала на питательную среду

• Знать оптимальные условия культивирования для разных видов микроорганизмов.

ЗАДАНИЕ 1. Приготовить посевной материал – почвенную суспензию.

• Взвешивают 1 г почвы, специально отобранной в различных регионах страны и хранящейся в лаборатории в холодильнике, и вносят в колбу со стерильной водой. Колбу встряхивают на качалке или шуттеле 15-20 мин до получения равномерной суспензии и вымывания спор микроорганизмов из почвенных комочков.

• Приготовленные ранее матрацы с агаризованной средой помещают на водяную баню для расплавления среды, которую далее охлаждают до 50-70 ºС и разливают в чашки Петри по 15-20 мл при диаметра чашек 90-100 мм соответственно. Чашки с застывшим агаром помещают в стерильный бокс, немного приоткрывают крышки и подсушивают в течение 20-30 мин, чтобы избежать образования сплошного газона растущих микроорганизмов.

ЗАДАНИЕ 2. Провести высев почвенной суспензии на агаризованную питательную среду.

• Полученную суспензию спор разводят в стерильной воде от 1:10 до 1:10,8 и по капле наносят стерильной пипеткой на поверхность агаризованной среды в чашки Петри. Стерильным шпателем растирают каплю по всей поверхности среды. При этом крышку при­держивают левой рукой и одновременно вращают чашку, не отрывая ее от стола. После инкубации посева появляется равномерно сплошной рост бактерий. Для выделения микроорганизмов необходимо, чтобы на одной чашке вырастало около 100 колоний, достаточно удаленных друг от друга, поэтому рабочими разведениями чаще всего являются 1:10,5-1:10,7.

• Засеянные чашки помещают в термостат. Для выделения бактерий и грибов их обычно инкубируют при 24 ºС, для выделения актиномицетов – при 28 ºС. Для выделения термотолерантных или психрофильных микроорганизмов используют специальные условия. Так, для выделения редких актиномицетов рода Micromonospora чашки инкубируют при 37 ºС 2-3 дня с последующим доращиванием в течение 7-12 сут. Такой же срок допустим для большинства культур, при этом в течение всего срока роста чашки просматривают.