Визначення токсигенності дифтерійних культур за допомогою реакції преципітації у гелі
Принцип: реакція преципітації запропонована для визначення токсигенності коринебактерій дифтерії та проводиться на фосфатно-пептонному агарі в чашці Петрі. По центру чашки розміщують смужку стерильного фільтрувального паперу, змоченого антитоксичною протидифтерійною сироваткою. Після підсушування на відстані 1 см від краю смужки бляшками діаметром 10 мм сіють виділені культури. У одній чашці можна сіяти від 3 до 10 культур, одна з яких – контрольна – має бути свідомо токсигенною.
Оцінка результатів: Обрахування реакції проводять через 24 – 48 - 72 год. Якщо культура токсигенна, на деякій відстані від смужки паперу виникають лінії преципітату, що збігаються з лініями преципітату контрольної культури. Вони мають вигляд "стріл-вусиків", які добре видно у світлі, що проходить.
Рис.
2 Визначення токсигенності дифтерійних
культур.
Висновок по досліду(з поясненнями): _______________________________________________________________
_______________________________________________________________
Вивчення культуральних та ферментативних властивостей Corynebacteriun diphtheria.
Назва середовища |
Рисунок |
|
Corynebacteriun diphtheria на середовищі Леффелера
|
|
|
Культуральні властивості |
|
|
Проба Пізу
|
|
|
Проба Закса |
|
|
Вивчити антитоксичний протидифтерійний імунітет у реакції непрямої гемаглютинації.
Принцип. У реакції непрямої гемаглютинації (РПГА) як носій використовують еритроцити. Навантажені антигеном еритроцити склеюються у присутності специфічних антитіл до цього антигену і випадають в осад. Сенсибілізовані антигеном еритроцити (еритроцитарний діагностикум) використовують в РПГА для виявлення антитіл (серодіагностика).
Постановка. У лунках полістиролового планшета готують ряд послідовних розведень сироватки. У передостанню лунку вносять - 0,5 мл свідомо позитивної сироватки і в останню 0,5 мл фізіологічного розчину (контроль). Потім в усі лунки додають по 0,1 мл розведеного еритроцитарного діагностикуму, струшують і поміщають у термостат на 2 г.
Обрахування. У позитивному випадку еритроцити осідають на дні лунки у вигляді рівного шару клітин із складчастим або зазубленим краєм (перевернута парасолька), в негативному - осідають у вигляді ґудзика або колечка.
Номер сироватки |
Розведення сироватки |
|||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Результат реакції (рисунок) |
||||||||||
І |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
ІІ |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Висновок (з поясненнями) |
|
|||||||||