Вопрос 3.2 методы количественной оценки иммуногенности вакцин.

ОБЩИЕ ПРИНЦИПЫ ИЗМЕРЕНИЯ ИММУНОГЕННОСТИ ВАКЦИН

Оценка иммуногенности профилактических вакцин произво­дится в опытах на экспериментальных животных. При этом имму­ногенность прививочных препаратов определяют по

• напряжен­ности иммунитета к соответствующему токсическому или инфекцион­ному агенту

• по уровню определяемых у животных гуморальных факторов иммунитета (антитоксинов, агглютининов, комплемент-связывающих н других антител).

В производстве вакцин для текущего контроля продукции обычно применяют специально установленные в опыте минимальные стандарты иммуногенности. При разработке прививочных препара­тов, а также в случае изучения закономерностей иммунизации при­менение этих стандартов оказывается часто недостаточным, так как не дает точного количественного представления об уровне нммунитета и не позволяет «дозировать» иммуногенность препаратов, т. е. с известной точностью количественно выражать защитные, свойства препаратов, выявляемые в опытах на лабораторных животных.

Для этих целей существуют специально разработанные методы оценки иммуногенности вакцин, основанные или на определении минимальной дозы вакцины, защищающей какую-то часть (обычно половину) животных от определенной дозы инфекционного агента нли специфического токсина-«постоянный уровнь иммунитета», или на установлении среднего уровня иммунологического ответа для группы животных, вакцинированных какой-либо определенной дозой антигена-«постоянная доза антигена»

Принципы:

а) Для получения воспроизводимых результатов и уменьшения ошибки количественного определения иммуногенности каждая се­рия вакцины должна проверяться на достаточно большой группе животных.

б) Испытание вакцины должно проводиться путем однократной прививки, поскольку при кратных прививках уровень достигнутого иммунитета зависит не столько от качества препарата, сколько от иммунологической реактивности животных. Исключение могут со­ставлять те случаи, когда однократная прививка не обеспечивает создания необходимого для измерения уровня иммунитета.

в) Состояние невосприимчивости у вакцинированных животных лучше оценивать не по гуморальным факторам иммунитета (анти­токсины, агглютинины, комплементсвязывающне и др. антитела), а по устойчивости целостного организма к специфическому токсину или инфекционному агенту, поскольку между уровнем антител в крови н иммунитетом к токсину илн инфекции не существует пря­мой пропорциональности. Известное исключение могут составлять антитоксины (противостолбнячные, противодифтерийные, противо-ботулинические).

г) Определение иммуногенности должно проводиться на максимуме иммунитета, достигаемого прн иммунизации данной вакциной, поскольку динамика развития иммунитета и его максимальная вы­раженность зависят от вида вакцинного препарата.

д) Дозы антигенов для иммунизации должны избираться с та­ким расчетом, чтобы испытание напряженности иммунитета прово­дилось введением ие менее 10 DLM токсина. В таком случае на рас­пределение животных по степени их специфической невосприимчи­вости не будет оказывать влияния индивидуальная чувствительность неиммунных животных к токсину. Применение чрезмерно больших доз антигенов может привести к гипер иммунизации животных, к нечувствительности.

е) В качестве стандартного антигена должны применяться пре­параты с постоянной и средней иммуногенностью. Для этой цели применимы лиофильновысушенные вакцины, длительно сохраняю­щие свою иммуногенность без изменения. Нельзя, например, при­менять в качестве стандартных сорбированные анатоксины в жид­ком виде, поскольку они повышают иммуногенность при хране­нии.

ж) Прн сравнении иммуногенности вакцинных препаратов по методу Пригге параллелизм прямых активности имеет место лишь для антигенов одного вида. Вследствие этого рекомен­дуемый «метод трех точек» применим лишь при определении иммуногенности препаратов одного вида. Стандартный вакцинный препарат должен быть того же вида, что н испытуемый.

з) Для испытания иммуногенности вакцины должны приме­няться по возможности животные одной линии, поскольку доказано, что такие животные отличаются меньшими индивидуальными ко­лебаниями чувствительности к антигену.

и) На абсолютную величину иммуногенности вакцины оказы­вает влияние сезонность определения. (примерно в 4 раза)

к) Иммуногенность вакцинного препарата должна выражаться в условных единицах, являющихся количественной мерой иммуно­генности. Этот способ выражения активности вакцин имеет большие преимущества перед общепринятыми способами дозировать препа­раты в антигенных единицах, определяемых до прямого испытания иммуногенности вакцины (единицы связывания, флокуляционные единицы, число микробных клеток, вирусов и т. д.), В отличие от последнего способа выражения активности препа­рата применение «единиц иммунизирующей активности» характе­ризует качество препарата по признаку иммуногенности. Пригге ввел понятие о «защитной единице» (SE — Schutzeinheit). За 1 SE было принято количество антигена (дифтерийного или столбнячного анатоксинов) в миллилитрах или в миллиграммах сухого препарата, защищающее 50% иммунизированных животных от избранной для испытания дозы токсина.

л) При определении иммуногенности вакцин необходимо вычис­ление пределов возможных колебаний результата, которые зависят от количества животных, взятых в опыт, от их однородности в от­ношении иммунологической реактивности, от условий проведения испытания, от вида сравниваемых антигенов.