3. Лабораторная диагностика вич-инфекции

ОАК

Можно решить в условиях специальных стационаров или амбулаторно. Информативным является сосчитанное выявление лейкопении, лимфоцитопении, анемии и тромбоцитопении.

Иммунный статус

Проводят в специализированных центрах и стационарах имеющих специальное оборудование и обученные кадры. Определяет количество клеток Т4 (хелперов) в одном миллилитр крови. У человека с неповрежденной иммунной системой иммунный статус, как правило, составляет 800-1200 клеток на миллилитр крови. У детей количество клеток составляет 2000-3000. Снижение иммунного статуса до 500 клеток и ниже создает опасность развития угрожающих жизни заболеваний - оппортунистических инфекций.

При ВИЧ-инфекции рекомендуется проходить обследование на иммунный статус не реже 1 раза в 6 месяцев.

Информативно для оценки иммунодефицита также является оценка Т-лимфоциторной формулы, которая блокируется при ВИЧ-инфекции. Находятся Т-лимфоциты Т4 и Т8. (хелперы и супрессоры). Учитывается количественное содержание и их коэффициент (Т4/Т8), который в норме должен быть не менее 1. Критериями иммунодефицита служит снижение коэффициента Т4:Т-8 < 1.

Диагностическое наблюдение за этими показателями крови, особенно за лимфацитамиТ4, важно не только для диагностики ВИЧ-инфекции и для прогноза и для начала специальной терапии, которую начинают при Т4 < 0,5х10⁹ Нужно помнить, что определение иммунодефицита не является основой диагностики ВИЧ-инфекции, так как оно может быть и при других патологиях, вызывающих иммунодефицит.

Вирусологическая диагностика (ПЦР и вирусологическая нагрузка)

Вирусная нагрузка отражает количество свободных частиц (копий) вируса, циркулирующих в крови. Тест на вирусную нагрузку чаще основан на методе полимеразной цепной реакции (ПЦР), при которой измеряет количество копий РНК вируса в 1 миллилитре. Менее 20.000 копий вируса на 1 миллилитр крови считается невысокой вирусной нагрузкой, больше 20.000 копий - сигнал опасности. Даже самый чувствительный из современных тестов не может определить вирусную нагрузку ниже 50 копий, поэтому, когда говорят, что в результате противовирусного лечения в крови пациента не обнаруживается вирус, это не означает, что вирус исчез, но что количество копий на 1 миллилитр ниже предела чувствительности используемой тест-системы.

Регулярные обследования на иммунный статус и вирусную нагрузку позволяют:

• вовремя назначить противовирусное лечение;

• вовремя начать профилактику оппортунистических инфекций:

Серологическое исследование.

В России в настоящее время стандартной процедурой лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции является обнаружение антител у ВИЧ-инфецированных с последующим подтверждением их специфичности в реакции иммунного блоттинга.

Антитела к ВИЧ появляются у 90-95% зараженных в течение 3 месяцев после заражения, 5-9%- через 6 месяцев от момента заражения, и у 0,5-1%- в более поздние сроки.

Обнаружение антител к ВИЧ включает 2 этапа:

• На первом этапе проводится выявление суммарного количества антител против антигенов ВИЧ с использованием различных тестов методикой РИФА;

• На втором этапе методом иммунного блоттинга проводят определение наличие антител к отдельным белкам вируса:

Лабораторная диагностическая тактика.

Сначала проводится тестирование антител в специальных лабораториях методом РИФА. Несмотря на высокую чувствительность, этот метод все же не достаточно специфичен, так как может оказаться ложноположительным (чаще) или ложноотрицательным (реже). При положительной РИФА проводят повторное исследование той же тест-системой ту же сыворотку.

Если и эта реакция окажется положительной, то проводят арбитражное исследование крови пациента в региональных центрах. В центрах проводят повторно РИФА, но уже с другой тест-системой. При получении отрицательного результата во 2 тест-системе сыворотку исследуют в 3 тест-системе. При получении отрицательных результатов во второй и третьей тест-системах, полученных в региональных центрах, выдают заключение об отсутствии антител к ВИЧ.

При получении положительного результата в первой и третьей тест-системах сыворотку исследуют иммунным блоттингом. Только после этого метода можно считать, что ВИЧ-инфекция подтверждена серологически, но и этот метод может дать сомнительные результаты, что требует повторных исследований подтверждение другими тест-системами и диспансерным наблюдением за пациентом. Для точной диагностики желательно использовать тест-системы разных фирм.

Кровь для исследования берется обычным способом в количестве 3-5 мл и сразу же направляется в лабораторию. При невозможности отправки крови, на центрифуге отделяют плазму, которую можно хранить в холодильнике до 7 суток. При транспортировке емкости должны быть герметически закупорены (пенициллиновые флаконы) и находиться в специальных контейнерах. Забор крови проводят с соблюдением всех необходимых предосторожностей и обязательно в перчатках. При попадании крови на кожу, пораженную поверхность дезинфицируют 70%-ным этиловым спиртом в течение 5 мин. (лучше дважды с интервалом в одну минуту).

Показаниями для серологического исследования являются эпидемиологические и клинические данные. Обязательному контролю подлежат люди из группы риска, доноры и беременные женщины.

Специфические антитела чаще начинают обнаруживаться в крови пациента через 1,5-2 месяца от момента заражения, у некоторых больных этот период растягивается до 1-1,5 лет.

Аллергическая диагностика.

Информативной также является постановка кожно-аллергических проб. В качестве аллергенов используется туберкулин, трихофитин, кондадин и др. аллергены. Более надежен набор из четырех аллергенов. Для иммунодефицита характерно отсутствие трех из четырех аллергических реакций, а отсутствие всех четырех говорит о резко выраженном иммунодефиците.