17, Механизмы ускользания бактерий от иммунных реакций организма

Так, некоторые бактерии (например, Neisseria gonorrhoeae, Haemophilus influenzae, Neisseria meningitidis) для избегания нейтрализующего действия секреторного IgА вырабатывают протеазы, способные разрушать молекулы иммуноглобулина на отдельные компоненты (Fab- и Fc-фрагменты), не способные к их агглютинации. Кроме того, N. gonorrhoeae для уклонения от нейтрализующего действия антител изменяют антигенные свойства пилей. Это происходит в результате генетических перестроек в локусе, контролирующем последовательность аминокислот в белке пилина, являющегося основным компонентом пилий. Локус пилина состоит из одного или двух экспрессированных генов и 10-20 «молчащих» генов. Каждый ген в своем составе содержит шесть областей, названных миникассетами (minicassettes). Изменение свойств и поверхностных характеристик пилина является результатом генетической конверсии, во время которой одна или более миникассет из молчащих генов заменяет миникассету экспрессированного гена. Ряд бактерий для уклонения от защитных сил организма формируют поверхностные структуры, затрудняющие процесс фагоцитоза. Классическим примером такого способа уклонения является Streptococcus pneumoniae, которые содержат полисахаридную капсулу, предотвращающую их фагоцитоз. Другой микроб – Streptococcus pyogenes избегает фагоцитоза благодаря наличию в его капсуле М-протеина, способного блокировать аттракцию микроба к фагоциту и его эндоцитоз. Некоторые патогенные стафилококки создают вокруг себя защитную оболочку из белков хозяина. Секретируя фермент коагулазу, они индуцируют превращение фибриногена сыворотки в фибрин на своей поверхности, тем самым формируя вокруг себя защитный фибриновый слой.

Другим бактериям помогают выжить в организме человека нарушение работы системы комплемента. Так, наличие у некоторых грамотрицательных бактерий в составе ЛПС-комплекса клеточной стенки длинных боковых ответвлений молекулы липида А затрудняет встраивание мембраноатакующего комплекса, тем самым защищая их от комплемент-зависимого лизиса. Микроб Pseudomonas aeruginosa секретирует фермент эластазу, который инактивирует С3а и С5а, таким образом уменьшая локальную воспалительную реакцию и хемотаксис клеток, а также приток защитных антител.

Другим бактериям помогают выжить в организме человека нарушение работы системы комплемента. Так, наличие у некоторых грамотрицательных бактерий в составе ЛПС-комплекса клеточной стенки длинных боковых ответвлений молекулы липида А затрудняет встраивание мембраноатакующего комплекса, тем самым защищая их от комплемент-зависимого лизиса. Микроб Pseudomonas aeruginosa секретирует фермент эластазу, который инактивирует С3а и С5а, таким образом уменьшая локальную воспалительную реакцию и хемотаксис клеток, а также приток защитных антител.

18.Реакция агглютинации. Компоненты, механизм, способы постановки. Применение.

Реакция агглютинации — простая по постановке реакция, при которой происходит связывание антителами корпускулярных антигенов (бактерий, эритроцитов или других клеток, нерастворимых частиц с адсорбированными на них антигенами, а также макромолекулярных агрегатов). Она протекает при наличии электролитов, например при добавлении изотонического раствора натрия хлорида.

Применяются различные варианты реакции агглютинации: развернутая, ориентировочная, непрямая и др. Реакция агглютинации проявляется образованием хлопьев или осадка (клетки, «склеенные» антителами, имеющими два или более антигенсвязывающих центра — рис. 13.1). РА используют для:

1) определения антител в сыворотке крови больных, например, при бруцеллезе (реакции Райта, Хеддельсона), брюшном тифе и паратифах (реакция Видаля) и других инфекционных болезнях;

2) определения возбудителя, выделенного от больного;

3) определения групп крови с использованием моноклональных антител против аллоантигенов эритроцитов.

Для определения у больного антител ставят развернутую реакцию агглютинации: к разведениям сыворотки крови больного добавляют диагностикум (взвесь убитых микробов,) и через несколько часов инкубации при 37 ˚С отмечают наибольшее разведение сыворотки (титр сыворотки), при котором произошла агглютинация, т. е. образовался осадок.

Характер и скорость агглютинации зависят от вида антигена и антител. Примером являются особенности взаимодействия диагностикумов (О- и H-антигенов) со специфическими антителами. Реакция агглютинации с О-диагностикумом (бактерии, убитые нагреванием, сохранившие термостабильный О-антиген) происходит в виде мелкозернистой агглютинации. Реакция агглютинации с Н-диагностикумом (бактерии, убитые фор­малином, сохранившие термолабильный жгутиковый Н-антиген) — крупнохлопчатая и протекает быстрее. Если необходимо определить возбудитель, выделенный от больного, ставят ориентировочную реакцию агглютинации, применяя диагностические антитела (агглютинирующую сыворотку), т. е. проводят серотипирование возбудителя. Ориентировочную реакцию проводят на предметном стекле. К капле диа­гностической агглютинирующей сыворотки в разведении 1:10 или 1:20 добавляют чистую культуру возбудителя, выделенного от больного. Рядом ставят контроль: вместо сыворотки наносят каплю раствора натрия хлорида. При появлении в капле с сывороткой и микробами хлопьевидного осадка ставят развернутую реакцию агглютинации в пробирках с увеличивающимися разведениями агглютинирующей сыворотки, к которым добавляют по 2—3 капли взвеси возбудителя. Агглютинацию учитывают по количеству осадка и степени просветления жидкости. Реакцию считают положительной, если агглютинация отмечается в разведении, близком к титру диагностической сыворотки. Одновременно учитывают контроли: сыворотка, разведенная изотоническим раствором натрия хлорида, должна быть прозрачной, взвесь микробов в том же растворе — равномерно мутной, без осадка.

Разные родственные бактерии могут агглютинироваться одной и той же диагностической агглютинирующей сывороткой, что

затрудняет их идентификацию. Поэтому пользуются адсорбированными агглютинирующими сыворотками, из которых удалены

перекрестно реагирующие антитела путем адсорбции их родственными бактериями. В таких сыворотках сохраняются антитела,

специфичные только к данной бактерии.