16. Методы обнаружения бактериофагов: метод Аппельмана, метод Грация.Фаготипирование бактерий

ТИТРОВАНИЕ БАКТЕРИОФАГА ПО МЕТОДУ ГРАЦИА

1,0 мл фага смешивают в пробирке с 0,5 мл бактериальной культуры и добавляют в эту же пробирку расплавленный МПА. Все содержимое выливают в чашку с МПА. Дают застыть верхнему тонкому слою и ставят в термостат. При встрече фага с бактерией, происходит лизис последней и образуется негативная колония фага. Такие негативные колонии затем подсчитывают для определения титра. Титром фага называют количество фаговых частиц в 1 мл препарата фага.

Фаготипирование бактерий

Испытуемую суточную бульонную культуру бактерий засевают на поверхность питательного агара в чашке Петри, слегка подсушивают в термостате, затем делят на квадраты, на которые пастеровской пипеткой наносят по одной капле различных типоспецифических фагов. После суточной инкубации отмечают на чашке те квадраты, в которых имеется сплошной лизис бактерий. Фаготип бактериальной культуры определяется тем типом фага, который вызывает ее лизис

Аппельмана Метод метод определения литической активности фага на жидких питательных средах путем установления его максимального разведения, вызывающего полный лизис бульонной культуры чувствительных бактерий.

17. Микрофлора организма человека.Биотопы.Понятия об аутохтонных, аллохтонных, резидентных и транзиторных микроорганизмах.Значение нормальной микрофлоры.Гнатобионты.

Биотопы:

• кожа-сарцинами, стафилококки, дифтероиды, стрептококки, бациллы, грибы.

• Рот. Пол.-у новорожденных:стрептококки,нейссерии, лактобактерии,актиномицеты.Резидентная группа: Streptococcus salivarius, стафилококки, сапрофитные нейссерии, лактобациллы, бактероиды, актиномицеты.Факультативная:синегнойная палочка, спорообразующие бактерии(Dacillus,Clostridium), энеробактерии.

• ЖКТ- желудок:лактобактерии, дрожжи.12перстная, верхние отделы тонкого кишечника:энтерококки, грибы, дифтероиды,молочнокислые бактерии.толстый кишечник:облигатная:бактероиды, вейлонелы;транзиторная:протей,клебсиеллы, клостридии, синегнойная палочка.

• Дыхательные пути- носовые ходы:облигатная:стафилококки, коринебактерии.факультативная:стрептококки,золотистый стафилококк.носоглотка:бактероиды, стафилококки, нейссерии, вейлонеллы.все остальное стерильно.

• Конъюктива, ухо-стерильны.

• Мочеполовая_почки, мочеточник и моча в мочевом пузыре стерильны.мочеиспускательный канал у муж-стафиококки, дифтероиды, бактероиды, у женщин-стерильно.наружные половые органы-микоплазмы, стафилоккоки,

Значение нормальной микрофлоры

Облигатная микрофлора обладает выраженной антагонистическими свойствами в отношении некоторых возбудителей

Свойства нормальной микрофлоры связаны с образованием веществ спиртов молочной кислоты которые тормозят размножение патогенных организмов

Энтеробактерии(E.cоli) синтезируют витамины В, К фолиевую кислоту

В развитии резистентности организма

Гнатобионты:безмикробные животные у котрых при нарушении норм микрофлоры наблюдается гипоплазия лимфоидной ткани, снижение клеточных и гуморальных факторов иммунитета.