Наиболее часто используемые красители

Метиленовый синий. Основной краситель, окрашивает клетки в зависимости от концентрации в синий или голубой цвет. Используют для окрашивания фиксированных мазков (водные растворы в концентрации 1:40 от насыщенного спиртового раствора) и прижизненных препаратов (водные растворы в концентрации 1:1000 от насыщенного спиртового раствора). Насыщенный спиртовый раствор готовят на 96 % этаноле из расчета 3 г порошка метиленового синего на 100 мл этанола.

Фуксин. Основной краситель, окрашивает клетки в красный цвет. Используют для окрашивания фиксированных мазков (водные растворы в концентрации 1:10 от насыщенного спиртового раствора) и прижизненных препаратов (водные растворы в концентрации 1:100 от насыщенного спиртового раствора. Насыщенный спиртовый раствор готовят на 90 % этаноле из расчета 10г порошка фуксина на 100мл этанола.

Генциановый фиолетовый. Основной краситель, окрашивает клетки в фиолетовый цвет. Используют для окрашивания фиксированных мазков (водные растворы в концентрации 1:10 от насыщенного спиртового раствора). Насыщенный спиртовый раствор готовят на 96 % этаноле из расчета 10г порошка генцианового фиолетового на 100мл этанола. Точно так же готовятся растворы кристаллического фиолетового. Для окрашивания препаратов по методу Грама и окрашивания спор готовят растворы красителей на карболовой кислоте (карболовый фуксин Циля и карболовый раствор генцианового фиолетового)

Судан III. Используют для окрашивания жировых включений в бактериальных клетках. Готовят 0,5 % раствор на 96 % этаноле или концентрированной молочной кислоте.

Черная тушь. Раствор туши (5мл туши и 15 мл дистиллированной воды, смешать и дать отстояться 2 недели, использовать надосадочную жидкость) используют для негативной окраски капсул микроорганизмов.

Раствор Люголя. Используют для окрашивания фиксированных мазков по методу Грама (кристаллический йод – 1 г иодид калия – 2 г, дистиллированная вода 300 мл) и для выявления включений гликогена и гранулёзы (кристаллический йод – 7 г, иодид калия – 20 г, дистиллированная вода 300 мл)

Эритрозин. Используют для окрашивания почвенных бактерий. Краситель хорошо окрашивает бактериальные клетки и не окрашивает почвенные частицы. Готовят 1–5 % карболовый раствор красителя (на 100 мл дистиллированной воды 5 г фенола и 1–5 г эритрозина).

Внутриклеточные включения

Многие микроорганизмы в определенных условиях образуют запасные вещества, которые обнаруживаются в клетке в виде гранулярных цитоплазматических включений. Природа запасных веществ различна, чаще всего это полисахариды, липиды, полифосфаты.

Гранулы углеводной природы (полисахариды) выявляют при обработке клеток раствором Люголя. Гранулы гранулёзы окрашиваются в синий, гликогеноподобных полисахаридов – в красновато-коричневый цвет.

Липидные включения у дрожжей и мицелиальных грибов представлены нейтральными жирами, которые легко обнаруживаются в живых клетках без специальных методов окрашивания в виде сильно преломляющих свет капель. Бактерии в качестве резервных липидов образуют поли--оксимасляную кислоту, гранулы которой выявляют Суданом III (красно-оранжевое окрашивание).

Полифосфаты (волютин, метахроматин) в клетках прокариот локализованы в цитоплазме, в клетках эукариот – в вакуолях. Окраска волютиновых зёрен основана на свойстве метахромазии – способности вызывать изменение цвета некоторых красителей (метиленовый синий). Волютин легко выявить окраской по способу Омелянского, основанному на плохой растворимости волютина в растворах кислот. При правильном окрашивании гранулы волютина имеют красный цвет и хорошо видны на фоне синей цитоплазмы.