
- •Практикум по микробиологии Учебно-практическое издание
- •Содержание
- •Введение
- •Правила работы в микробиологической лаборатории
- •Ведение лабораторных записей
- •Методы микроскопического исследования микроорганизмов
- •Методы микроскопии
- •Морфология бактерий
- •Содержание лабораторной работы Задание 1. Приготовление препаратов для прижизненного исследования микроорганизмов
- •Задание 2. Приготовление фиксированного мазка микроорганизмов и изучение при помощи иммерсионной системы микроскопа
- •Задание 3. Изучение различных морфологических групп микроорганизмов
- •Контрольные вопросы
- •Наиболее часто используемые красители
- •Внутриклеточные включения
- •Клеточные структуры
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •1.3. Морфологические особенности и ультраструктура актиномицетов, спирохет, риккетсий, хламидий и микоплазм Цель занятия
- •Основные сведения
- •Контрольные вопросы
- •1.4 Морфологические особенности и ультраструктура микроскопических грибов и простейших Цель занятия
- •Основные сведения
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Условия культивирования микроорганизмов
- •Пищевые потребности микроорганизмов и требования к питательным средам
- •Классификация питательных сред
- •Этапы приготовления питательных сред
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Методы посева биологического материала
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Методы дезинфекции
- •Методы антисептики
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Морфологическая характеристика
- •Культуральные свойства
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •3.2. Физиолого-биохимические свойства микроорганизмов Цель занятия
- •Основные сведения
- •Физиологические особенности микроорганизмов
- •Биохимические свойства микроорганизмов
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •3.3. Определение чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам Цель занятия
- •Основные сведения
- •Определение чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам методом дисков (диффузионный тест)
- •Количественное определение чувствительности бактерий к антимикробным препаратам методом серийных разведений.
- •Микротест–системы для определения чувствительности к антимикробным препаратам
- •Количественное определение чувствительности бактерий к антимикробным препаратам с помощью е–теста
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •3.4. Изучение патогенности и вирулентности микроорганизмов. Работа с лабораторными животными Цель занятия
- •Основные сведения
- •Бактериоскопические методы
- •Биохимические методы
- •Биологические методы
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •4.2. Микрофлора воды Цель занятия
- •Основные сведения
- •Микрофлора природных вод
- •Микробиологический анализ образцов воды
- •Гигиенические и санитарно-бактериологические требования к питьевой воде
- •Нормативы питьевой воды по микробиологическим показателям (СанПин 2.1.4.559-96.)*
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •4.4. Микрофлора воздуха Цель занятия
- •Основные сведения
- •Микробиологический анализ воздуха
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Микрофлора лекарственного сырья и готовых лекарств
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Методы оценки неспецифической защиты организма
- •Дифференцировка лимфоцитов на кластеры дифференциации по поверхностным cd-маркерам
- •Количественное содержание лейкоцитов в циркулирующей крови здоровых людей
- •Анализ функциональной активности т- и в-лимфоцитов
- •Определение концентрации иммуноглобулинов четырех основных изотипов
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •5.2.Методы оценки иммунного ответа Цель занятия
- •Основные сведения
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Библиографический список
- •Состав наиболее часто используемых питательных сред
- •Для выращивания патогенных кокков
- •Для выращивания бактерий кишечной группы (одновременно являются дифференциально-диагностическими)
- •3. Для выращивания патогенных анаэробов
- •4. Для выращивания холерного вибриона
- •5. Для выделения возбудителя дифтерии
- •Для выявления сахаролитических свойств.
- •Среды для выявления протеолитических и гемолитических свойств.
Морфология бактерий
Бактерии представляют наиболее обширную и весьма разнообразную группу микроорганизмов. Морфологически бактерии различаются по форме, величине, взаимному расположению клеток и другим признакам. Различают три основные формы бактерий: круглые (шаровидные), цилиндрические (палочковидные) и извитые.
1.Шаровидные клетки (или кокки) могут быть типично шаровидными, или со слегка заострённым концом, или сплюснутыми в виде фасоли. По взаимному расположению различают попарное (диплококки), цепочками (стрептококки), по четыре (тетракокки) или более в одной плоскости (педиококки) и хаотичное (монококки) расположение клеток. При делении клеток в трёх взаимно перпендикулярных плоскостях некоторые шаровидные бактерии располагаются упорядоченными пакетами (сарцины) или в виде хаотичных гроздевидных скоплений (стафилококки).
2. Цилиндрические (палочковидные) клетки по размеру встречаются короткие (длина меньше, чем две ширины), длинные (длина больше, чем две ширины) и нитевидные. В зависимости от взаимного расположения различают одиночно расположенные клетки, диплобактерии и стрептобактерии. Палочковидные клетки могут быть с округлым, заострённым, прямоугольным концом или вдавлением на конце клетки. Спорообразующие палочковидные бактерии, имеющие из-за крупной шаровидной споры форму веретена или барабанной палочки, называют клостридиями.
3. Извитые микроорганизмы все обладаю подвижностью, по степени извитости клетки подразделяются на вибрионы, спириллы и спирохеты. Клетка вибрионов представляет собой часть витка спирали, не изгибается при движении, по форме слегка напоминает запятую. Спириллы также не изгибаются при движении, клетка имеет несколько изгибов, представляя собой несколько витков спирали. Спирохеты – сильно извитые формы бактерий. Оболочка клеток спирохет очень эластична, поэтому их клетки передвигаются путем изгибания и вращения. Это особая форма прокариотических организмов, отличающихся строением и способом передвижения.
Содержание лабораторной работы Задание 1. Приготовление препаратов для прижизненного исследования микроорганизмов
Объект исследования – накопительная культура Bacillus subtilis или навозный настой. Приготовить один из препаратов для прижизненного исследования. Изучить при увеличении ×40 и зарисовать.
а) Препарат раздавленная капля. На прокаленное и остывшее предметное стекло микробиологической петлёй наносят каплю культуральной жидкости. Покровное стекло ставят на ребро у края капли и постепенно опускают на неё. При осторожном опускании покровного стекла между стёклами не остаётся пузырьков воздуха, мешающих микроскопированию. Капля культуральной жидкости должна быть небольшой, чтобы после «раздавливания» жидкость не выступала за края покровного стекла.
б) Препарат висячая капля. По центру покровного стекла наносят микробиологической петлёй небольшую каплю культуральной жидкости и опрокидывают его над углублением специального предметного стекла. Края углубления предварительно смазывают вазелиновым маслом. Капля должна висеть на покровном стекле над углублением предметного стекла. Висячую каплю рассматривают под микроскопом, пользуясь плоским зеркалом. Диафрагму при этом суживают.
в) Прижизненная окраска микроорганизмов. При приготовлении препаратов раздавленная и висячая капля для лучшей видимости микроорганизмы можно слегка подкрасить, нанося на предметное (покровное) стекло вначале каплю раствора нейтрального красного, а затем каплю культуральной жидкости и смешав обе капли микробиологической петлёй.