
- •Практикум по микробиологии Учебно-практическое издание
- •Содержание
- •Введение
- •Правила работы в микробиологической лаборатории
- •Ведение лабораторных записей
- •Методы микроскопического исследования микроорганизмов
- •Методы микроскопии
- •Морфология бактерий
- •Содержание лабораторной работы Задание 1. Приготовление препаратов для прижизненного исследования микроорганизмов
- •Задание 2. Приготовление фиксированного мазка микроорганизмов и изучение при помощи иммерсионной системы микроскопа
- •Задание 3. Изучение различных морфологических групп микроорганизмов
- •Контрольные вопросы
- •Наиболее часто используемые красители
- •Внутриклеточные включения
- •Клеточные структуры
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •1.3. Морфологические особенности и ультраструктура актиномицетов, спирохет, риккетсий, хламидий и микоплазм Цель занятия
- •Основные сведения
- •Контрольные вопросы
- •1.4 Морфологические особенности и ультраструктура микроскопических грибов и простейших Цель занятия
- •Основные сведения
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Условия культивирования микроорганизмов
- •Пищевые потребности микроорганизмов и требования к питательным средам
- •Классификация питательных сред
- •Этапы приготовления питательных сред
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Методы посева биологического материала
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Методы дезинфекции
- •Методы антисептики
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Морфологическая характеристика
- •Культуральные свойства
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •3.2. Физиолого-биохимические свойства микроорганизмов Цель занятия
- •Основные сведения
- •Физиологические особенности микроорганизмов
- •Биохимические свойства микроорганизмов
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •3.3. Определение чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам Цель занятия
- •Основные сведения
- •Определение чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам методом дисков (диффузионный тест)
- •Количественное определение чувствительности бактерий к антимикробным препаратам методом серийных разведений.
- •Микротест–системы для определения чувствительности к антимикробным препаратам
- •Количественное определение чувствительности бактерий к антимикробным препаратам с помощью е–теста
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •3.4. Изучение патогенности и вирулентности микроорганизмов. Работа с лабораторными животными Цель занятия
- •Основные сведения
- •Бактериоскопические методы
- •Биохимические методы
- •Биологические методы
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •4.2. Микрофлора воды Цель занятия
- •Основные сведения
- •Микрофлора природных вод
- •Микробиологический анализ образцов воды
- •Гигиенические и санитарно-бактериологические требования к питьевой воде
- •Нормативы питьевой воды по микробиологическим показателям (СанПин 2.1.4.559-96.)*
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •4.4. Микрофлора воздуха Цель занятия
- •Основные сведения
- •Микробиологический анализ воздуха
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Микрофлора лекарственного сырья и готовых лекарств
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Методы оценки неспецифической защиты организма
- •Дифференцировка лимфоцитов на кластеры дифференциации по поверхностным cd-маркерам
- •Количественное содержание лейкоцитов в циркулирующей крови здоровых людей
- •Анализ функциональной активности т- и в-лимфоцитов
- •Определение концентрации иммуноглобулинов четырех основных изотипов
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •5.2.Методы оценки иммунного ответа Цель занятия
- •Основные сведения
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Библиографический список
- •Состав наиболее часто используемых питательных сред
- •Для выращивания патогенных кокков
- •Для выращивания бактерий кишечной группы (одновременно являются дифференциально-диагностическими)
- •3. Для выращивания патогенных анаэробов
- •4. Для выращивания холерного вибриона
- •5. Для выделения возбудителя дифтерии
- •Для выявления сахаролитических свойств.
- •Среды для выявления протеолитических и гемолитических свойств.
Среды для выявления протеолитических и гемолитических свойств.
Кровяной агар. Расплавляют 3 % стерильный мясо-пептонный агар, охлаждают его до температуры 45ºС и прибавляют 5–10 % дефибринированной стерильно взятой крови лошади (кролика или барана). Добавление крови производят, соблюдая правила стерильности. Готовую среду тщательно перемешивают и разливают. Слой среды должен быть равномерно окрашен в красный цвет.
Питательный желатин. К мясо-пептонному бульону добавляют желатин из расчета 10–15 г на 100мл. Желатину дают набухнуть и раствориться при медленном нагревании на водяной бане (при 40–45ºС). Устанавливают рН, прибавляя 10 % р-р бикарбоната натрия. Затем фильтруют через бумажный фильтр, стерилизуют дробно 3 дня по часу при 100ºС или однократно при 110ºС.
Свернутая сыворотка. Стерильную лошадиную сыворотку (без консерванта) в пробирках нагревают на водяной бане при 65ºС по 45 минут 3 дня подряд.
ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ МИКРООРГАНИЗМОВ К АНТИМИКРОБНЫМ ПРЕПАРАТАМ МЕТОДОМ СЕРИЙНЫХ РАЗВЕДЕНИЙ
Антибиотик |
МПК, мкг/мл |
||
Чувствительные (S) |
Промежуточ-ные (I) |
Устойчивые (R) |
|
Пенициллины |
|||
Бензилпенициллин при изучении стафилококков |
≤0,12 |
– |
>0,25 |
Бензилпенициллин при изучении других бактерий |
≤1,5 |
– |
>1,5 |
Оксациллин для Staph. aureus |
≤2 |
– |
≥4 |
Оксациллин для других бактерий |
≤0,25 |
– |
≥0,5 |
Метициллин |
≤2 |
– |
>4 |
Ампициллин для Staph. aureus |
≤0,25 |
– |
>0,5 |
Ампициллин для E. coli и других энтеробактерий |
≤8 |
16 |
≥32 |
Карбенициллин для для E. coli и других энтеробактерий |
≤16 |
32 |
≥64 |
Карбенициллин для P. aeruginоsa |
≤128 |
256 |
≥512 |
Пиперацилин для P. aeruginоsa |
≤64 |
– |
≥182 |
Пиперацилин для E. coli и других энтеробактерий |
≤16 |
32 |
≥64 |
Азлоциллин |
≤64 |
– |
≥128 |
Цефалоспорины |
|||
Цефазолин |
<8 |
16 |
>32 |
Цефалотин |
<8 |
16 |
>32 |
Цефаклор |
<8 |
16 |
>32 |
Цефалексин |
≤8 |
16 |
≥32 |
Цефуроксим |
<8 |
16 |
>32 |
Цефамандол |
<8 |
16 |
>32 |
Цефотаксим |
<8 |
16–32 |
>64 |
Цефтриаксон |
<8 |
16–32 |
>64 |
Цефоперазон |
<16 |
32 |
>64 |
Цефтазидим |
<8 |
16 |
>32 |
Цефепим |
<8 |
16 |
>32 |
Новые бета-лактамы |
|||
Имипенем |
<4 |
8 |
>16 |
Меропенем |
<4 |
8 |
>16 |
Хинолоны |
|||
Ципрофлоксацин |
≤1 |
2 |
≥4 |
Продолжение
Офлоксацин |
≤2 |
4 |
≥8 |
Налидиксовая кислота |
≤16 |
– |
≥32 |
Норфлоксацин |
≤4 |
8 |
≥16 |
Аминогликозиды |
|||
Канамицин |
≤16 |
32 |
≥64 |
Гентамицин |
≤4 |
8 |
≥16 |
Тобрамицин |
≤4 |
8 |
≥16 |
Амикацин |
≤16 |
32 |
≥64 |
Нетилмицин |
≤8 |
16 |
>32 |
Тетрациклины, макролиды, линкозамиды |
|||
Тетрациклин |
≤2 |
4-8 |
≥16 |
Доксициклин |
≤4 |
8 |
≥16 |
Эритромицин |
≤0,5 |
1–4 |
≥8 |
Азитромицин |
≤2 |
4 |
≥8 |
Кларитромицин |
≤2 |
4 |
≥8 |
Олеандомицин |
≤2 |
4 |
≥8 |
Линкомицин |
≤2 |
4 |
≥8 |
Клиндамицин |
≤0,25 |
0,5 |
≥1 |
Антибиотики других групп |
|||
Хлорамфеникол |
≤8 |
16 |
≥32 |
Фузидиевая кислота |
≤2 |
4–8 |
≥16 |
Рифампицин |
≤2 |
4 |
≥8 |
Полимиксин |
<50 ЕД/мл |
– |
≥50 ЕД/мл |
Ванкомицин |
≤4 |
8–16 |
≥32 |
Фурадонин |
≤32 |
64 |
≥128 |
ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ МИКРООРГАНИЗМОВ К АНТИМИКРОБНЫМ ПРЕПАРАТАМ МЕТОДОМ ДИСКОВ (на агаре АГВ)
Антибиотик |
Диаметр задержки роста, мм |
||
Чувствительные (S) |
Промежуточ-ные (I) |
Устойчивые (R) |
|
Пенициллины |
|||
Бензилпенициллин при изучении стафилококков |
≤20 |
21–28 |
≥29 |
Бензилпенициллин при изучении других бактерий |
≤10 |
11–16 |
≥ |
Ампициллин при изучении стафилококков |
≤20 |
21–28 |
29≥ |
Ампициллин при изучении грамотрицательных бактерий и энтерококков |
≤9 |
10–13 |
≥14 |
Карбенициллин (25 мкг) |
≤14 |
15–18 |
≥19 |
Карбенициллин (100 мкг) при изучении P. aeruginоsa |
≤11 |
12–14 |
≥15 |
Метициллин |
≤13 |
14–18 |
≥19 |
Оксациллин (10 мкг) |
≤15 |
16–19 |
≥20 |
Азлоциллин (для P. aeruginоsa) |
≤13 |
14–16 |
≥16 |
Продолжение
Пиперацилин (для P. aeruginоsa) |
≤17 |
- |
≥18 |
Азтреонам |
≤15 |
16-21 |
≥22 |
Цефалоспорины |
|||
Цефалотин |
≤14 |
15-18 |
≥19 |
Цефазолин |
≤14 |
15-18 |
≥19 |
Цефуроксим |
≤14 |
15-18 |
≥19 |
Цефокситин |
≤14 |
15-18 |
≥19 |
Цефотаксим |
≤14 |
15-20 |
≥21 |
Цефтриаксон |
≤14 |
15-20 |
≥21 |
Цефоперазон |
≤14 |
15-18 |
≥19 |
Цефтазидим |
≤14 |
15-17 |
≥18 |
Цефалексин |
≤14 |
15-18 |
≥19 |
Цефаклор |
≤14 |
15-18 |
≥19 |
Цефиксим |
≤15 |
16-19 |
≥20 |
Цефепим |
≤14 |
15-17 |
≥18 |
Новые бета-лактамы |
|||
Имипенем |
≤13 |
14-15 |
≥16 |
Меропенем |
≤13 |
14-15 |
≥16 |
Хинолоны |
|||
Ципрофлоксацин |
≤15 |
16-20 |
≥21 |
Офлоксацин |
≤12 |
13-16 |
≥17 |
Налидиксовая кислота |
≤12 |
13-17 |
≥18 |
Аминогликозиды |
|||
Стрептомицин |
≤16 |
17-19 |
≥20 |
Канамицин |
≤14 |
15-18 |
≥19 |
Гентамицин |
≤15 |
- |
≥16 |
Сизомицин |
≤15 |
- |
≥16 |
Тобрамицин |
≤14 |
- |
≥15 |
Амикацин |
≤14 |
15-16 |
≥17 |
Нетилмицин |
≤12 |
13-14 |
≥15 |
Тетрациклины, макролиды, линкозамиды |
|||
Тетрациклин |
≤16 |
17-20 |
≥22 |
Доксициклин |
≤15 |
16-19 |
≥20 |
Эритромицин |
≤17 |
18-21 |
≥22 |
Азитромицин |
≤13 |
14-17 |
≥18 |
Рокситромицин |
≤14 |
15-18 |
≥19 |
Кларитромицин |
≤13 |
14-17 |
≥18 |
Линкомицин |
≤19 |
20-23 |
≥24 |
Клиндамицин |
≤14 |
15-20 |
≥21 |
Олеандомицин |
≤16 |
17-20 |
≥21 |
Антибиотики других групп |
|||
Хлорамфеникол |
≤15 |
16-18 |
≥19 |
Фузидиевая кислота |
≤16 |
17-20 |
≥21 |
Рифампицин |
≤12 |
13-15 |
≥16 |
Полимиксин |
≤11 |
12-14 |
≥15 |
Ванкомицин для стафилококков |
≤11 |
- |
≥12 |
Ванкомицин для энтерококков |
≤14 |
15-16 |
≥17 |
Ристомицин |
≤9 |
10-11 |
≥12 |
Фурадонин |
≤15 |
16-18 |
≥19 |
Фурагин |
≤15 |
16-18 |
≥19 |