- •Практикум по микробиологии Учебно-практическое издание
- •Содержание
- •Введение
- •Правила работы в микробиологической лаборатории
- •Ведение лабораторных записей
- •Методы микроскопического исследования микроорганизмов
- •Методы микроскопии
- •Морфология бактерий
- •Содержание лабораторной работы Задание 1. Приготовление препаратов для прижизненного исследования микроорганизмов
- •Задание 2. Приготовление фиксированного мазка микроорганизмов и изучение при помощи иммерсионной системы микроскопа
- •Задание 3. Изучение различных морфологических групп микроорганизмов
- •Контрольные вопросы
- •Наиболее часто используемые красители
- •Внутриклеточные включения
- •Клеточные структуры
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •1.3. Морфологические особенности и ультраструктура актиномицетов, спирохет, риккетсий, хламидий и микоплазм Цель занятия
- •Основные сведения
- •Контрольные вопросы
- •1.4 Морфологические особенности и ультраструктура микроскопических грибов и простейших Цель занятия
- •Основные сведения
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Условия культивирования микроорганизмов
- •Пищевые потребности микроорганизмов и требования к питательным средам
- •Классификация питательных сред
- •Этапы приготовления питательных сред
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Методы посева биологического материала
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Методы дезинфекции
- •Методы антисептики
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Морфологическая характеристика
- •Культуральные свойства
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •3.2. Физиолого-биохимические свойства микроорганизмов Цель занятия
- •Основные сведения
- •Физиологические особенности микроорганизмов
- •Биохимические свойства микроорганизмов
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •3.3. Определение чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам Цель занятия
- •Основные сведения
- •Определение чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам методом дисков (диффузионный тест)
- •Количественное определение чувствительности бактерий к антимикробным препаратам методом серийных разведений.
- •Микротест–системы для определения чувствительности к антимикробным препаратам
- •Количественное определение чувствительности бактерий к антимикробным препаратам с помощью е–теста
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •3.4. Изучение патогенности и вирулентности микроорганизмов. Работа с лабораторными животными Цель занятия
- •Основные сведения
- •Бактериоскопические методы
- •Биохимические методы
- •Биологические методы
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •4.2. Микрофлора воды Цель занятия
- •Основные сведения
- •Микрофлора природных вод
- •Микробиологический анализ образцов воды
- •Гигиенические и санитарно-бактериологические требования к питьевой воде
- •Нормативы питьевой воды по микробиологическим показателям (СанПин 2.1.4.559-96.)*
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •4.4. Микрофлора воздуха Цель занятия
- •Основные сведения
- •Микробиологический анализ воздуха
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Микрофлора лекарственного сырья и готовых лекарств
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Методы оценки неспецифической защиты организма
- •Дифференцировка лимфоцитов на кластеры дифференциации по поверхностным cd-маркерам
- •Количественное содержание лейкоцитов в циркулирующей крови здоровых людей
- •Анализ функциональной активности т- и в-лимфоцитов
- •Определение концентрации иммуноглобулинов четырех основных изотипов
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •5.2.Методы оценки иммунного ответа Цель занятия
- •Основные сведения
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Библиографический список
- •Состав наиболее часто используемых питательных сред
- •Для выращивания патогенных кокков
- •Для выращивания бактерий кишечной группы (одновременно являются дифференциально-диагностическими)
- •3. Для выращивания патогенных анаэробов
- •4. Для выращивания холерного вибриона
- •5. Для выделения возбудителя дифтерии
- •Для выявления сахаролитических свойств.
- •Среды для выявления протеолитических и гемолитических свойств.
Содержание лабораторной работы
Задание 1. Определение общего микробного числа воздуха
Объект исследования – воздух любого закрытого помещения, можно для сравнения проанализировать воздух часто и редко посещаемых людьми помещений. В стерильную чашку Петри наливают и распределяют равномерным слоем 10–12 мл расплавленного МПА. После застывания среды чашку Петри размещают на горизонтальной поверхности в исследуемом помещении и на 5 минут открывают крышку. Затем чашку подписывают, заворачивают в бумагу и на 7 суток помещают в термостат дном вверх при 37ºС. По окончании срока инкубации подсчитывают число колоний и рассчитывают общее микробное число воздуха по формуле:
;
где Х – количество колоний в чашке Петри,
78,5 см2 – площадь чашки Петри,
104 – 100 см2 × 100 (перевод литров в м3).
При расчёте ОМЧ исходят из опытным путём установленного положения, что в течение 5 минут на горизонтальную поверхность площадью 100 см2 оседает столько микроорганизмов, сколько их содержится в 10 литрах воздуха.
Задание 2. Обнаружение в воздухе закрытых помещений санитарно-показательных микроорганизмов.
Объект исследования – воздух любого закрытого помещения, лучше проанализировать воздух часто посещаемых людьми помещений. В стерильные чашки Петри наливают и распределяют равномерным слоем 10–12 мл расплавленного желточно-солевого агара Чистовича и кровяного агара. После застывания среды чашки Петри размещают на горизонтальной поверхности в исследуемом помещении и на 5 минут открывают крышки. Затем чашки подписывают, заворачивают в бумагу и на 7 суток помещают в термостат дном вверх при 37ºС. По окончании срока инкубации, подсчитывают число колоний гемолитических стафилококков и стрептококков. На желточно-солевом агаре вокруг их колоний виден радужный ореол, образовавшийся в результате разрушения лецитина куриного желтка лецитиназой бактерий. На кровяном агаре вокруг колоний санитарно-показательных микроорганизмов образуется зона гемолиза (светлый с зеленоватым оттенком ореол на красном фоне). Количество гемолитических стафилококков и стрептококков в 1 м3 воздуха подсчитывают по вышеприведенной формуле.
Задание 3. Качественный анализ микрофлоры воздуха.
Объект исследования – посевы микрофлоры воздуха закрытых помещений. Необходимо проанализировать полученные посевы, подсчитать колонии микроорганизмов четырех основных групп, результаты исследования занести в таблицу, сравнить с нормативами.
Объект исследования |
ОМЧ, м/о в 1м3 |
Количество колоний основных групп микроорганизмов |
|||
желто-пигментных |
плесневых грибов |
бацилл |
гемолитических стафилококков и стрептококков |
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
При формулировании вывода учесть, что к группе желтопигментных относится большинство патогенных и условнопатогенных бактерий и преобладание их в посевах на МПА свидетельствует о санитарно-эпидемиологическом неблагополучии данного помещения. Большое количество колоний бацилл говорит о сильном загрязнении воздуха пылью, преобладание плесневых грибов может указывать на наличие комнатных цветов (в сочетании с небольшими значениями ОМЧ) или редко совершаемую влажную уборку помещения.
