
- •Практикум по микробиологии Учебно-практическое издание
- •Содержание
- •Введение
- •Правила работы в микробиологической лаборатории
- •Ведение лабораторных записей
- •Методы микроскопического исследования микроорганизмов
- •Методы микроскопии
- •Морфология бактерий
- •Содержание лабораторной работы Задание 1. Приготовление препаратов для прижизненного исследования микроорганизмов
- •Задание 2. Приготовление фиксированного мазка микроорганизмов и изучение при помощи иммерсионной системы микроскопа
- •Задание 3. Изучение различных морфологических групп микроорганизмов
- •Контрольные вопросы
- •Наиболее часто используемые красители
- •Внутриклеточные включения
- •Клеточные структуры
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •1.3. Морфологические особенности и ультраструктура актиномицетов, спирохет, риккетсий, хламидий и микоплазм Цель занятия
- •Основные сведения
- •Контрольные вопросы
- •1.4 Морфологические особенности и ультраструктура микроскопических грибов и простейших Цель занятия
- •Основные сведения
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Условия культивирования микроорганизмов
- •Пищевые потребности микроорганизмов и требования к питательным средам
- •Классификация питательных сред
- •Этапы приготовления питательных сред
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Методы посева биологического материала
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Методы дезинфекции
- •Методы антисептики
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Морфологическая характеристика
- •Культуральные свойства
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •3.2. Физиолого-биохимические свойства микроорганизмов Цель занятия
- •Основные сведения
- •Физиологические особенности микроорганизмов
- •Биохимические свойства микроорганизмов
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •3.3. Определение чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам Цель занятия
- •Основные сведения
- •Определение чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам методом дисков (диффузионный тест)
- •Количественное определение чувствительности бактерий к антимикробным препаратам методом серийных разведений.
- •Микротест–системы для определения чувствительности к антимикробным препаратам
- •Количественное определение чувствительности бактерий к антимикробным препаратам с помощью е–теста
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •3.4. Изучение патогенности и вирулентности микроорганизмов. Работа с лабораторными животными Цель занятия
- •Основные сведения
- •Бактериоскопические методы
- •Биохимические методы
- •Биологические методы
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •4.2. Микрофлора воды Цель занятия
- •Основные сведения
- •Микрофлора природных вод
- •Микробиологический анализ образцов воды
- •Гигиенические и санитарно-бактериологические требования к питьевой воде
- •Нормативы питьевой воды по микробиологическим показателям (СанПин 2.1.4.559-96.)*
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •4.4. Микрофлора воздуха Цель занятия
- •Основные сведения
- •Микробиологический анализ воздуха
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Микрофлора лекарственного сырья и готовых лекарств
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Методы оценки неспецифической защиты организма
- •Дифференцировка лимфоцитов на кластеры дифференциации по поверхностным cd-маркерам
- •Количественное содержание лейкоцитов в циркулирующей крови здоровых людей
- •Анализ функциональной активности т- и в-лимфоцитов
- •Определение концентрации иммуноглобулинов четырех основных изотипов
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •5.2.Методы оценки иммунного ответа Цель занятия
- •Основные сведения
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Библиографический список
- •Состав наиболее часто используемых питательных сред
- •Для выращивания патогенных кокков
- •Для выращивания бактерий кишечной группы (одновременно являются дифференциально-диагностическими)
- •3. Для выращивания патогенных анаэробов
- •4. Для выращивания холерного вибриона
- •5. Для выделения возбудителя дифтерии
- •Для выявления сахаролитических свойств.
- •Среды для выявления протеолитических и гемолитических свойств.
Основные сведения
Воздух является средой, неблагоприятной для развития микроорганизмов. В нём нет питательных веществ, отсутствует необходимая влага и губительно действует ультрафиолетовый спектр прямых солнечных лучей. Поэтому микрофлора атмосферного воздуха немногочисленна и довольно случайна. Наиболее часто в воздухе обнаруживаются споры дрожжей, конидии и обрывки мицелия грибов, споры бактерий и актиномицетов, неспоровые бактерии (чаще кокки). Видовой состав и количество микроорганизмов в воздухе зависят от микрофлоры территории, над которой находится исследуемый воздух. Бактериальная загрязнённость закрытых помещений (жилых комнат, производственных и общественных помещений и т.д.) всегда большая, особенно в зимнее время. В открытом воздухе почти нет патогенных микробов, в то время как в атмосфере жилых и общественных помещениях, больничных палатах много патогенных и условно патогенных микроорганизмов. В их числе гноеродные стафилококки, стрептококки, возбудитель туберкулеза, пневмококки, энтеробактерии и другие. Следовательно, изучение микроорганизмов воздуха чрезвычайно важно как в плане их распространения, так и для организации и проведения мероприятий, направленных на уничтожение патогенных форм.
Микробиологический анализ воздуха
Для определения количественного содержания и качественного состава микрофлоры воздуха проводится методами, в основу которых положены два принципа: оседание (седиментация) и засасывание (аспирация). При помощи седиментационных методов (например, метод Коха) получают общее представление о содержащихся в воздухе микроорганизмах. Эти методы не дают истинного представления о количестве микроорганизмов, с его помощью определяется всего 35–60 % микроорганизмов в воздухе.
Аспирационные методы (например, метод Кротова) дают возможность довольно точно определить количество микробов в определенном объёме воздуха. Метод Кротова основан на ударно-прибивном действии струи исследуемого воздуха. Прибор Кротова имеет вид цилиндра со съёмной крышкой. Внутри корпуса смонтированы электромотор, центробежный вентилятор и диск-подставка для чашки Петри. В крышке прибора имеется диск из плексигласа с клиновидной щелью для просасывания воздуха. При вращении мотора и вентилятора происходит засасывание воздуха через клиновидную щель в крышке. Струя воздуха, проходя через клиновидную щель, с большой скоростью ударяется о влажную поверхность питательной среды в чашке Петри. В результате удара находящиеся в воздухе аэрозоли, микроорганизмы, пылевые частицы и капельки жидкости равномерно прибиваются к поверхности агара и равномерно распределяются. Количество пропускаемого воздуха можно регулировать. После выращивания колоний в термостате подчитывают их количество и делают пересчёт на 1 м3. Метод Кротова даёт довольно чёткие результаты и характеризуется высокой эффективностью улавливания микрофлоры в пылевой фазе аэрозоля.
При оценке санитарного состояния воздуха закрытых помещений определяют два показателя, сравнивая их затем с существующими нормами: общее микробное число воздуха (ОМЧ), число санитарно-показательных микроорганизмов – гемолитических стафилококков и стрептококков. Гемолитические стафилококки и стрептококки являются постоянными обитателями верхних дыхательных путей человека и служат косвенным показателем загрязнения воздуха патогенными микробами, выделяющимися из организма человека при кашле, чихании, разговоре и др.
Особо строгие санитарные требования предъявляются к воздуху операционных, родильных домов, больничных палат и детских учреждений. Требования к санитарно-гигиеническому состоянию воздуха отражены в таблице 4.
Таблица 4
Санитарно-гигиенические показатели воздуха закрытых помещений (Микробиология, 1978)*
Пробы воздуха |
Сезон года |
Общее микробное число, м/о в 1м3 |
Число гемолитических стафилококков и стрептококков в 1м3 воздуха |
Атмосферный воздух зеленой зоны |
Средне- годовые |
до 350 |
отсутствуют |
Жилое помещение а) чистый воздух б) загрязненный воздух а) чистый воздух б) загрязненный воздух |
Летом Летом
Зимой Зимой |
до 1500 более 2500
до 4500 более 7000 |
до 16 более 36
до 36 более 124 |
Больничные палаты |
Летом Зимой |
до 3500 до 5000 |
до 16 до 36 |
*Лабинская А.С. Микробиология с техникой микробиологических исследований. – М.: Медицина, 1978.