
- •Практикум по микробиологии Учебно-практическое издание
- •Содержание
- •Введение
- •Правила работы в микробиологической лаборатории
- •Ведение лабораторных записей
- •Методы микроскопического исследования микроорганизмов
- •Методы микроскопии
- •Морфология бактерий
- •Содержание лабораторной работы Задание 1. Приготовление препаратов для прижизненного исследования микроорганизмов
- •Задание 2. Приготовление фиксированного мазка микроорганизмов и изучение при помощи иммерсионной системы микроскопа
- •Задание 3. Изучение различных морфологических групп микроорганизмов
- •Контрольные вопросы
- •Наиболее часто используемые красители
- •Внутриклеточные включения
- •Клеточные структуры
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •1.3. Морфологические особенности и ультраструктура актиномицетов, спирохет, риккетсий, хламидий и микоплазм Цель занятия
- •Основные сведения
- •Контрольные вопросы
- •1.4 Морфологические особенности и ультраструктура микроскопических грибов и простейших Цель занятия
- •Основные сведения
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Условия культивирования микроорганизмов
- •Пищевые потребности микроорганизмов и требования к питательным средам
- •Классификация питательных сред
- •Этапы приготовления питательных сред
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Методы посева биологического материала
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Методы дезинфекции
- •Методы антисептики
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Морфологическая характеристика
- •Культуральные свойства
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •3.2. Физиолого-биохимические свойства микроорганизмов Цель занятия
- •Основные сведения
- •Физиологические особенности микроорганизмов
- •Биохимические свойства микроорганизмов
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •3.3. Определение чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам Цель занятия
- •Основные сведения
- •Определение чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам методом дисков (диффузионный тест)
- •Количественное определение чувствительности бактерий к антимикробным препаратам методом серийных разведений.
- •Микротест–системы для определения чувствительности к антимикробным препаратам
- •Количественное определение чувствительности бактерий к антимикробным препаратам с помощью е–теста
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •3.4. Изучение патогенности и вирулентности микроорганизмов. Работа с лабораторными животными Цель занятия
- •Основные сведения
- •Бактериоскопические методы
- •Биохимические методы
- •Биологические методы
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •4.2. Микрофлора воды Цель занятия
- •Основные сведения
- •Микрофлора природных вод
- •Микробиологический анализ образцов воды
- •Гигиенические и санитарно-бактериологические требования к питьевой воде
- •Нормативы питьевой воды по микробиологическим показателям (СанПин 2.1.4.559-96.)*
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •4.4. Микрофлора воздуха Цель занятия
- •Основные сведения
- •Микробиологический анализ воздуха
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Микрофлора лекарственного сырья и готовых лекарств
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Методы оценки неспецифической защиты организма
- •Дифференцировка лимфоцитов на кластеры дифференциации по поверхностным cd-маркерам
- •Количественное содержание лейкоцитов в циркулирующей крови здоровых людей
- •Анализ функциональной активности т- и в-лимфоцитов
- •Определение концентрации иммуноглобулинов четырех основных изотипов
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •5.2.Методы оценки иммунного ответа Цель занятия
- •Основные сведения
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Библиографический список
- •Состав наиболее часто используемых питательных сред
- •Для выращивания патогенных кокков
- •Для выращивания бактерий кишечной группы (одновременно являются дифференциально-диагностическими)
- •3. Для выращивания патогенных анаэробов
- •4. Для выращивания холерного вибриона
- •5. Для выделения возбудителя дифтерии
- •Для выявления сахаролитических свойств.
- •Среды для выявления протеолитических и гемолитических свойств.
Микрофлора природных вод
Для экологической характеристики загрязнения водоемов введено понятие трех зон сапробности:
полисапробная зона – зона сильного загрязнения. В такой зоне водоема ярко выражены анаэробные процессы распада органического опада, сопровождающиеся выделением сероводорода, метана, аммиака и др. Вода полисапробной зоны содержит более 1 млн микроорганизмов в 1 мл, в ней преобладают анаэробные виды бактерий и в большом количестве обнаруживаются БГКП;
мезосапробная зона – зона умеренного загрязнения. Для этой зоны водоемов характерно преобладание аэробных процессов минерализации органических веществ. БГКП выделяются, но в небольшом количестве. Условно мезосапробную зону подразделяют на две подзоны ( и ). Вода -мезосапробной зоны содержит от 100 тыс. до 1 млн. микроорганизмов в 1 мл, вода -мезосапробной зоны – от 1 тыс. до 100 тыс. микроорганизмов в 1 мл;
олигосапробная зона – зона слабого загрязнения. В ней преобладают процессы окисления нитратов и солей двухвалентного железа, БГКП, как правило, отсутствуют.
Микробиологический анализ образцов воды
Количество сапрофитных микроорганизмов в воде колеблется от нескольких единиц до нескольких миллионов в 1 мл в зависимости от степени загрязнения источника воды, времени и места взятия проб для анализа. Воды открытых водоёмов более богаты сапрофитными микроорганизмами по сравнению с подземными. Донные отложения – илы – гораздо богаче бактериями, чем вода в водоёмах.
Большое значение для здоровья населения имеет санитарно-бактериологический надзор за состоянием водоёмов, поскольку возбудители таких инфекционных заболеваний, как брюшной тиф, дизентерия, холера, полиомиелит и многие другие не только способны сохраняться в воде, но и размножаться в ней. Вода может быть фактором массового распространения инфекций среди людей, животных и растений. В санитарном отношении опасна как вода, содержащая патогенные микроорганизмы, так и вода, содержащая большое количество сапрофитных микроорганизмов.
Пробы воды отбирают в стерильную стеклянную посуду с плотно закрывающимися пробками. Доставку проб производят в контейнерах-холодильниках при температуре 4–10ºС. При изучении микрофлоры водоёмов используют методы определения общего количества микроорганизмов, определяют основные биологические группы, а также выявляют представителей специфической микрофлоры и определяют видовой состав. Микробиологический анализ воды проводят чаще всего путем высева определенного объёма воды на плотные питательные среды. Метод прямого счёта бактерий в воде применяется довольно редко. Исследование воды проводят в несколько этапов:
1) определение общего микробного числа (общего количества микроорганизмов в 1 мл воды);
2) обнаружение санитарно-показательных микроорганизмов (бактерий, служащих показателем фекального загрязнения воды) и определение их количества в 1 мл;
3) обнаружение в воде патогенных микроорганизмов, их токсинов и бактериофагов (по эпидемиологическим показателям).
Обнаружение в пробах воды патогенных микроорганизмов обычно связано с большими трудностями и не всегда даёт надёжный результат. В связи с этим принято использовать косвенные показатели возможного инфицирования воды. Таким косвенным показателем служит определение санитарно-показательных микроорганизмов – бактерий семейства Enterobacteriaceae и термотолерантных колиформных бактерий (бактерий группы кишечной палочки). Термотолерантные колиформные бактерии обладают всеми признаками бактерий семейства Enterobacteriaceaе, но способны ферментировать лактозу до кислоты и газа при температуре 44ºС в течение 24 часов. Наличие колиформных бактерий в воде указывает на загрязнение её экскрементами человека или теплокровных животных и на возможное присутствие в ней возбудителей инфекционных заболеваний. Для выявления термотолерантных колиформных бактерий используют два метода: метод мембранных фильтров и титрационный.
Особенно строго ведётся надзор за источниками питьевой воды. Безопасность питьевой воды в эпидемиологическом отношении определяется её соответствием нормативам по микробиологическим показателям.