
- •Практикум по микробиологии Учебно-практическое издание
- •Содержание
- •Введение
- •Правила работы в микробиологической лаборатории
- •Ведение лабораторных записей
- •Методы микроскопического исследования микроорганизмов
- •Методы микроскопии
- •Морфология бактерий
- •Содержание лабораторной работы Задание 1. Приготовление препаратов для прижизненного исследования микроорганизмов
- •Задание 2. Приготовление фиксированного мазка микроорганизмов и изучение при помощи иммерсионной системы микроскопа
- •Задание 3. Изучение различных морфологических групп микроорганизмов
- •Контрольные вопросы
- •Наиболее часто используемые красители
- •Внутриклеточные включения
- •Клеточные структуры
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •1.3. Морфологические особенности и ультраструктура актиномицетов, спирохет, риккетсий, хламидий и микоплазм Цель занятия
- •Основные сведения
- •Контрольные вопросы
- •1.4 Морфологические особенности и ультраструктура микроскопических грибов и простейших Цель занятия
- •Основные сведения
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Условия культивирования микроорганизмов
- •Пищевые потребности микроорганизмов и требования к питательным средам
- •Классификация питательных сред
- •Этапы приготовления питательных сред
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Методы посева биологического материала
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Методы дезинфекции
- •Методы антисептики
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Морфологическая характеристика
- •Культуральные свойства
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •3.2. Физиолого-биохимические свойства микроорганизмов Цель занятия
- •Основные сведения
- •Физиологические особенности микроорганизмов
- •Биохимические свойства микроорганизмов
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •3.3. Определение чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам Цель занятия
- •Основные сведения
- •Определение чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам методом дисков (диффузионный тест)
- •Количественное определение чувствительности бактерий к антимикробным препаратам методом серийных разведений.
- •Микротест–системы для определения чувствительности к антимикробным препаратам
- •Количественное определение чувствительности бактерий к антимикробным препаратам с помощью е–теста
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •3.4. Изучение патогенности и вирулентности микроорганизмов. Работа с лабораторными животными Цель занятия
- •Основные сведения
- •Бактериоскопические методы
- •Биохимические методы
- •Биологические методы
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •4.2. Микрофлора воды Цель занятия
- •Основные сведения
- •Микрофлора природных вод
- •Микробиологический анализ образцов воды
- •Гигиенические и санитарно-бактериологические требования к питьевой воде
- •Нормативы питьевой воды по микробиологическим показателям (СанПин 2.1.4.559-96.)*
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •4.4. Микрофлора воздуха Цель занятия
- •Основные сведения
- •Микробиологический анализ воздуха
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Микрофлора лекарственного сырья и готовых лекарств
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Методы оценки неспецифической защиты организма
- •Дифференцировка лимфоцитов на кластеры дифференциации по поверхностным cd-маркерам
- •Количественное содержание лейкоцитов в циркулирующей крови здоровых людей
- •Анализ функциональной активности т- и в-лимфоцитов
- •Определение концентрации иммуноглобулинов четырех основных изотипов
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •5.2.Методы оценки иммунного ответа Цель занятия
- •Основные сведения
- •Содержание лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Библиографический список
- •Состав наиболее часто используемых питательных сред
- •Для выращивания патогенных кокков
- •Для выращивания бактерий кишечной группы (одновременно являются дифференциально-диагностическими)
- •3. Для выращивания патогенных анаэробов
- •4. Для выращивания холерного вибриона
- •5. Для выделения возбудителя дифтерии
- •Для выявления сахаролитических свойств.
- •Среды для выявления протеолитических и гемолитических свойств.
Содержание лабораторной работы
Задание 1. Изучение микрофлоры зубного налета
Объект исследования – зубной налет. На предметное стекло наносят каплю воды, затем спичкой или зубочисткой берут немного зубного налета, смешивают с каплей воды, приготавливают мазок, фиксируют и окрашивают по Граму или фуксином (можно окрасить по Романовскому-Гимзе). Промытый и высушенный препарат рассматривают с иммерсионным объективом. В препарате видны различные формы бактерий.
Задание 2. Исследование смывов с рук
Объект исследования – кожа рук. Смывы с рук изучают на общее микробной загрязнение с целью оценки санитарной обстановки в медицинских и детских учреждениях, на предприятиях общественного питания и т. д. Для получения смывов используют стерильные ватные тампоны, находящиеся в пробирке с 2 мл стерильной воды. Перед взятием смыва увлажняют тампон, дают в руки обследуемому и он протирает сначала кожу левой, затем павой руки в последовательности: тыльная сторона кисти, ладонь, межпальцевые пространства, ногтевые ложа. После окончания процедуры тампон помещают обратно в пробирку, тщательно отполаскивают и перемешивают раствор. Затем отбирают 1 мл раствора, вносят в стерильную чашку Петри и заливают остуженным питательным агаром. Посев выдерживают в термостате при 37ºС в течение 1–2 суток и подсчитывают число колоний микроорганизмов. Результаты анализа выражают числом микроорганизмов в 1 мл смыва.
Можно выполнить отпечатки пальцев рук по поверхности питательного агара, также термостатировать в течение суток и изучить появившиеся колонии микроорганизмов.
Задание 3. Исследование смывов с рук на содержание колиформных бактерий группы.
Объект исследования – кожа рук. Наличие БГКП на коже рук и поверхности окружающих предметов служит косвенным показателем фекального загрязнения. Для выявления БГКП используют увлажнённый стерильный ватный тампон, которым протирают исследуемую поверхность. Затем материал, находящийся на тампоне, осторожно втирают в поверхность элективной питательной среды Эндо. Чашку с посевом термостатируют в течение 1–2 суток при 37ºС, после чего выявляют тёмно-красные или розовые с металлическим блеском колонии. Мазки из колоний красят по методу Грама и микроскопируют. Наличие грамотрицательных мелких палочковидных бактерий свидетельствует о наличии БГКП.
Контрольные вопросы
Какое значение имеет нормальная микрофлора человека?
Что такое дизбактериоз?
Какие микроорганизмы относят к резидентной микрофлоре кожи?
Какой биотоп организма человека наиболее заселен?
Какими методами проводят диагностику дизбактериоза кишечника?
Какие питательные среды используют при анализе микрофлоры кишечника? Какие группы микроорганизмов выявляют?
Каким методом изучают микрофлору зубного налета?
4.2. Микрофлора воды Цель занятия
Знакомство с методами изучения микрофлоры воды и санитарно-бактериологическими требованиями к питьевой воде. Изучение микрофлоры образцов водопроводной, колодезной и поверхностных вод методом высева на агаризованную среду.
Основные сведения
Вода является экологической нишей для многих микробов и одновременно служит средой для их распространения в биосфере. Заселение водоемов высшими животными и растениями, пригодность их вод для питья и нужд промышленности, а также способность к самоочищению зависят главным образом от состава их микрофлоры. В свою очередь, количественный и качественный состав микроорганизмов воды зависит от многих ее физиологических характеристик и, прежде всего, от наличия органических веществ, содержание которого тесно связано с жизнедеятельностью человека и составом окружающих водоем почв. В воде встречаются представители самых разнообразных групп микроорганизмов – кокки, нитчатые бактерии, цианобактерии, пурпурные и зеленые серные бактерии, актиномицеты, дрожжевые и плесневые грибы. В пресных водоемах обнаруживаются различные физиологические группы микроорганизмов. Среди них преобладают сапрофиты родов Pseudomonas, Micrococcus, Bacillus, Proteus, цианобактерии.