Морфологическая характеристика

Морфологическая характеристика прокариот включает такие признаки, как форма и размеры клеток, их подвижность, наличие жгутиков и тип жгутикования, способность к спорообразованию. Полезным может оказаться также выявление в клетках хлоросом, карбоксисом, газовых вакуолей, а также включений (гранул волютина, липидов, полисахаридов, белков). Первостепенное значение для идентификации бактерий придается окраске клеток по Граму и строению их клеточных стенок.

Культуральные свойства

К культуральным свойствам относятся характерные особенности роста микроорганизмов на плотных и жидких питательных средах. Обычно их используют для описания культур, в целях идентификации применяют редко.

1. Рост на плотных питательных средах.

На поверхности плотных питательных сред в зависимости от способа посева микроорганизмы могут расти в виде колонии, штриха или сплошного газона. Колонией называют изолированное скопление клеток одного вида, выросшее в большинстве случаев из одной клетки. В зависимости от того, где растут клетки (на поверхности плотной питательной среды, в толще ее или на дне сосуда), различают поверхностные, глубинные и донные колонии. Колонии, выросшие на поверхности среды, отличаются большим разнообразием и, в некоторых случаях, их характерные особенности облегчают идентификацию микроорганизмов. При описании колоний учитывают следующие признаки:

1. величину колонии (диаметр в миллиметрах). Различают точечные колонии (менее 1 мм), мелкие (1–2 мм), средние (2–4 мм) и крупные (4–6 мм и более);

2. форму колонии (округлая, неправильная, амёбовидная, мицелиальная, складчатая, сложная и др.);

3. оптические свойства (отмечают прозрачность, наличие или отсутствие блеска);

4. цвет, обусловленный способностью микроорганизмов синтезировать пигменты. Отмечают цвет колонии и выделение пигмента в среду (следует обратить внимание, что все грязно-белые колонии принято считать бесцветными);

5. поверхность (гладкая, шероховатая, бугристая, складчатая и т.д.). Детально изучить поверхность колонии можно при помощи малого (х10) увеличении микроскопа;

6. профиль колоний (плоский, выпуклый, кратерообразный, каплевидный, конусовидный и др.). Профиль лучше всего определять, глядя сбоку чашки Петри, слегка приоткрыв крышку;

7. край колонии (ровный, волнистый, лопастной, ризоидный и др.). Его оценивают при помощи ручной лупы или малого увеличения микроскопа;

8. структуру колонии (однородная, мелко- или крупнозернистая, волокнистая), которая определяется также при помощи малого увеличения микроскопа;

9. консистенцию колонии можно определить в последнюю очередь при приготовлении мазка, прикасаясь к колонии иглой или петлёй. Различают маслянистую, тестообразную, вязкую, пленчатую, сухую ломкую и др. консистенции.

2. Рост микроорганизмов в жидкой питательной среде более однообразен. Он сопровождается помутнением среды, образованием плёнки или осадка. Нередко рост микроорганизмов сопровождается появлением запаха, пигментацией среды, выделением газа. Последнее обнаруживают по образованию пены, пузырьков, а также при помощи «поплавков» – маленьких запаянных с одного конца трубочек. Поплавок помещают в пробирку запаянным концом вверх и следят, чтобы он полностью был заполнен средой. В случае выделения газа он скапливается в поплавке в виде пузырька.

Для описания характера роста микроорганизмов в жидких средах их выращивают на мясо-пептонном бульоне или другой среде, обеспечивающей хороший рост.

Бульонные культуры не взбалтывают и наблюдения ведут осторожно, сохраняя их в спокойном состоянии. При наблюдении отмечают:

1. наличие осадка и его свойства (скудный он или обильный, плотный, рыхлый, слизистый или хлопьевидный);

2. наличие плёнки на поверхности и её внешний вид (тонкая, плотная или рыхлая, гладкая или складчатая);

3. наличие и степень помутнения (слабая, умеренная или сильная).

На жидких питательных средах проявляются следующие культуральные свойства микроорганизмов:

- рост с равномерным помутнением жидкой среды характерен для факультативных анаэробов;

- придонный рост с образованием осадка на дне пробирки дают анаэробные микроорганизмы. Образующийся осадок может быть обильным или скудным, крошковидным, гомогенным, волокнистым или в виде крупных хлопьев. По консистенции осадок может быть вязким, слизистым, хрупким или пастообразным;

- пристеночный рост характерен для некоторых бактерий и актиномицетов. В этом случае образуются рыхлые хлопья или компактные зерна, прикрепляющиеся к внутренней поверхности стенок сосуда;

- поверхностным ростом отличаются аэробные микроорганизмы. Они образуют пленку различной плотности и консистенции. Пленка может быть нежной и тонкой, исчезающей при встряхивании пробирки (например, так растут клетки Bacillus subtilis). Для грибов свойственно образование плотной, сухой, кожистой пленки. Она мелко снимается целиком в виде круглого диска, соответствующего диаметру сосуда;

- бульон в присутствии палочковидных форм даёт после взбалтывания волнистость – по бульону как бы пробегают шелковистые нити.