Методы дезинфекции

Для дезинфекции применяют физические и химические методы.

Физические методы.

1. Кипячение не менее 30 минут (часто в присутствии 1–2 % р-ра бикарбоната натрия). Дезинфицируют мелкие инструменты, предметные и покровные стекла.

2. Пастеризация при температуре 50–65ºС в течение 5–10 минут с последующим быстрым охлаждением. Дезинфицируют напитки и пищевые продукты.

3. Воздействие УФ излучением с длиной волны 260–300 мкм. Дезинфицируют поверхности предметов, воздух помещений.

4. Гамма-излучение применяют для дезинфекции пластиковой посуды и медицинских инструментов одноразового использования.

Химические методы.

Обрабатывают объекты микробоцидными химическими веществами. Используют перекись водорода, хлорсодержащие соединения (0,1–10 % р-р хлорной извести; 0,5–5 % р-р хлорамина), формальдегид, фенолы (3–5 % р-ры фенола, лизола или карболовой кислоты)

Методы антисептики

В качестве антисептиков используют только малотоксичные для организма соединения, оказывающие антимикробное действие. Это 70 % спирт, 5 % р-р йода, 0,1 % р-р перманганата калия, 0,5–1 % спиртовые р-ры метиленового синего или бриллиантового зеленого, 0,75–4 % р-р хлоргексидина, 1–3 % р-ры гексахлорофена и др. Эти вещества также добавляют к материалам, используемым при изготовлении перевязочных средств, лейкопластырей, зубных протезов, пломбировочных материалов и др.

Содержание лабораторной работы

Задание 1. Изучение влияния на микроорганизмы химических и физических факторов.

Объект исследования – посевы на плотные и жидкие среды культур микроорганизмов, подвергшихся действию высокой температуры (автоклавирование или кипячение), УФ лучей, химических веществ (3 % р-ра хлорамина, 5 % р-ра фенола или лизола, 10 % р-ра хлорной извести).

Отметить интенсивность роста культур микроорганизмов в посевах в сравнении с контролем (посевом культуры микроорганизмов, не подвергшейся действию физических или химических факторов).

Контрольные вопросы

1. Перечислите термические методы стерилизации. Поясните, какие из них используются для стерилизации питательных сред, а какие – для стерилизации стеклянной посуды.

2. Поясните принцип стерилизации сухим жаром. Что и при каком режиме стерилизуют этим методом? Какое оборудование используют?

3. Поясните принцип стерилизации паром под давлением. Что и при каком режиме стерилизуют этим методом? Какое оборудование используют?

4. Поясните принцип пастеризации. Что и при каком режиме стерилизуют этим методом? Какое оборудование используют?

5. Поясните принцип тиндализации. Что и при каком режиме стерилизуют этим методом? Какое оборудование используют?

6. Поясните принцип стерилизации кипячением. Что и при каком режиме стерилизуют этим методом? Какое оборудование используют?

7. Поясните принцип стерилизации фильтрованием. Что и при каком режиме стерилизуют этим методом? Какое оборудование используют?

8. Поясните принцип стерилизации ультрафиолетовыми лучами. Что и при каком режиме стерилизуют этим методом? Какое оборудование используют?

9. Поясните принцип стерилизации ультразвуком. Что и при каком режиме стерилизуют этим методом? Какое оборудование используют?

10. Перечислите методы «холодной» стерилизации. Поясните, какие объекты можно стерилизовать каждым из этих методов.

Раздел 3. иЗУЧЕНИЕ свойств микроорганизмов

3.1. Принципы описания и идентификации прокариот Культуральные свойства прокариот.

Цель занятия

Знакомство с принципами идентификации микроорганизмов. Изучение культуральных свойств микроорганизмов.

Основные сведения

Принципы идентификации и описания прокариот

Принципы классификации и идентификации прокариот и эукариот имеют существенные различия. Идентификация прокариот, которые морфологически менее разнообразны, чем эукариоты, основана на использовании широкого спектра фенотипических и генотипических признаков. Она в большей степени основана на функциональных признаках, на выяснении процессов, которые микроорганизмы способны осуществлять. При описании и идентификации бактерий изучают их культуральные свойства, морфологию, организацию клетки, физиолого-биохимические особенности, химический состав клеток, структуру генома. При этом необходимо соблюдать следующие правила: работать с чистыми культурами, применять стандартные методы исследования, использовать для посевов клетки, находящиеся в активном физиологическом состоянии.

Для точного определения вида бактерий необходимо проделать целый ряд сложных и длительных операций, направленных на накопление как можно большего числа диагностических признаков. В условиях вузовской лаборатории микробиологии возможно определение морфологических, культуральных признаков и некоторых ферментативных свойств. Вся работа по составлению видовой характеристики бактерий обычно проводится в три этапа:

1. изолирование микроорганизма из смешанной микрофлоры (выделение в чистую культуру);

2. изучение морфологии и тинкториальных свойств с использованием микроскопических методов;

3. культивирование для наблюдения культуральных и физиолого-биохимических признаков.

Для решения многих задач бывает достаточным определение легко выявляемых культуральных свойств микроорганизмов, а также их физиолого-биохимических особенностей. К дополнительным признакам, используемым при идентификации микроорганизмов, относятся:

1. наличие родо- и видоспецифических антигенов;

2. чувствительность к видо- и штаммоспецифическим бактериофагам;

3. видовая резистентность к определенным антимикробным препаратам;

4. для патогенных бактерий – способность к синтезу определенных факторов вирулентности.

На современном этапе разработаны и широко используются молекулярно-генетические методы идентификации: рестрикционный анализ, гибридизация с ДНК и РНК зондами, полимеразная цепная реакция.